Polimorfos y sales de N-[5-[4-(5-{[(2R,6S)-2,6-dimetil-4-morfolinil]metil}-1,3-oxazol-2-il)-1H-indazol-6-il]-2-(metiloxi)-3-piridinil]metanosulfonamida.

Un polimorfo (forma II) de N-[5-[4-(5-{[(2R,6S)-2,6-dimetil-4-morfolinil]metil}-1,

3-oxazol-2-il)-1H-indazol-6-il]-2- (metiloxi)-3-piridinil]metanosulfonamida caracterizado porque proporciona un patrón de XRPD que comprende un pico (º2θ) a 9,2 ± 0,.

Polimorfos y sales de N-[5-[4-(5-{[(2R,6S)-2,6-dimetil-4-morfolinil]metil}-1,3-oxazol-2-il)-1H-indazol-6-il]-2-(metiloxi)-3- piridiniljmetanosulfonamida

Campo de la invención

La presente invención se refiere a nuevos polimorfos y sales de un compuesto que es un inhibidor de la actividad cinasa, más específicamente de un compuesto que es un inhibidor de la actividad o función de la isoforma delta de la 3'OH fosfoinosítido cinasa (en lo sucesivo PI3K6), a procedimientos para su preparación, a composiciones farmacéuticas que los comprenden y a su uso en el tratamiento de diversos trastornos.

Antecedentes de la invención

Las membranas celulares representan una gran reserva de segundos mensajeros que pueden alistarse en una variedad de vías de transducción de señales. En relación a la función y regulación de las enzimas efectoras en las vías de señalización de los fosfolípidos, las cinasas PI3 de clase I (por ejemplo, la PI3K6) generan segundos mensajeros a partir del conjunto de los fosfolípidos de la membrana. Las PI3K de clase I convierten el fosfolípido de membrana PI(4,5)P2 en PI(3,4,5)P3,que funciona como un segundo mensajero. El Pl y el PI(4)P también son sustratos de la PI3K y pueden fosforilarse y convertirse en PI3P y PI(3,4)P2, respectivamente. Además, estos fosfoinosítidos pueden convertirse en otros fosfoinosítidos mediante fosfatasas 5'específicas y 3-específicas. Así, la actividad enzimática de la PI3K da como resultado, ya sea directa o indirectamente, la generación de dos subtipos de 3'-fosfoinosítido que funcionan como segundos mensajeros en las vías de transducción de señales intracelulares (Trends Biochem. Sd. 22 (7) págs. 267-72 (1997) por Vanhaesebroeck y col.; Chem. Rev. 101 (8) págs. 2365-80 (2001) por Leslie y col.; Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 17, págs. 615-75 (2001) de Katso y col.; y Cell. Mol. Life Sd. 59 (5) págs. 761-79 (2002) de Toker). Hasta la fecha, se han identificado ocho PI3K de mamíferos, divididas en tres clases principales (I, II y III) según su homología de secuencia, estructura, compañeros de unión, modo de activación y preferencia de sustrato. In vitro, las PI3K de clase I pueden fosforilar al fosfatidilinositol (Pl), fosfatidilinositol-4- fosfato (PI4P) y fosfatidilinositol-4,5-bifosfato (PI(4,5)P2) para producir fosfatidilinositol-3-fosfato (PI3P), fosfatidilinositol-3,4-bisfosfato (PI(3,4)P2,y fosfat i d i I i n o sito I-3,4,5-tr ifosfato (Pl(3,4,5)P3,respectivamente. Las PI3K de clase II pueden fosforilar al Pl y al PI4P. Las PI3K de clase III puede fosforilar solamente al Pl (Vanhaesebroeck y col. (1997), citado anteriormente; Vanhaesebroeck y col. Exp. Cell. Res. 253 (1) págs. 239-54 (1999); y Leslie y col (2001),citado anteriormente).

La PI3K de clase I es un heterodímero que consiste en una subunidad catalítica p110 y una subunidad reguladora, y la familia se divide además en las enzimas de clase la y de clase Ib según sus compañeros reguladores y mecanismo de regulación. Las enzimas de clase la consisten en tres subunidades catalíticas distintas (p110a, p110p y p1105) que se dimerizan con cinco subunidades reguladoras distintas (p85a, p55a, p50a, p85(3 y p55y), siendo todas las subunidades catalíticas capaces de interactuar con todas las subunidades reguladoras para formar una variedad de heterodímeros. Las PI3K de clase la generalmente se activan en respuesta a la estimulación de las tirosina cinasas receptoras por el factor de crecimiento, a través de la interacción de los dominios SH2 de la subunldad reguladora con restos fosfo-tirosina específicos de las proteínas receptoras o adaptadoras activadas tales como el IRS-1. Las GTPasas pequeñas (ras, como un ejemplo) también están involucradas en la activación de la PI3K en conjunción con la activación de la tirosina cinasa receptora. Tanto la p110a como la p110(3 se expresan constitutivamente en todos los tipos celulares, mientras que la expresión de la p1105 está más restringido a poblaciones de leucocitos y algunas células epiteliales. En contraste, la única enzima de clase Ib consiste en una subunldad catalítica p110y que ¡nteractúa con una subunldad reguladora p101. Además, la enzima de clase Ib se activa en respuesta a sistemas de receptor acoplado a proteína G sistemas (GPCR) y su expresión parece estar limitada a los leucocitos.

Esquema A: Conversión de PI(4,5)P2 en PI(3,4,5)P3

Ptdlns(4,5)P2

Ptdlns(3,4,5)P,

Como se ¡lustra en el esquema A anterior, las fosfoinosítido 3-clnasas (PI3K) fosforllan el hldroxllo del tercer carbono del anillo de ¡nosltol. La fosforilación de fosfolnosítidos para generar Ptdlns(3,4,5)P3, Ptdlns(3,4)P2 y Ptdlns(3)P, produce segundos mensajeros para una variedad de vías de transducción de señales, incluyendo aquellos 5 esenciales para la proliferación celular, la diferenciación celular, el crecimiento celular, el tamaño celular, la supervivencia celular, la apoptosis, la adhesión, la motilidad celular, la migración celular, la quimlotaxls, la Invasión, la reorganización del citoesqueleto, los cambios en la forma celular, el tráfico de vesículas y la vía metabóllca (Katso y col. (2001), citado anteriormente; y Mol. Med. Today 6 (9) págs. 347-57 (2000) por Stein y col.J.

La actividad de las PI3-cinasas responsables de generar estos productos de señalización fosforilados se identificó 10 originalmente como asociada a oncoproteínas virales y a las tirosina cinasas receptoras de factor de crecimiento que fosforilan el fosfatidilinositol (Pl) y sus derivados fosforilados en el 3'-hidroxilo del anillo de inositol (Panayotou y col. Trends Cell Biol. 2 págs. 358-60 (1992)). Sin embargo, estudios bioquímicos más recientes han revelado que las PI3-cinasas de clase I (por ejemplo, la isoforma de clase IA PI3K6) son enzimas cinasas específicas duales, lo que significa que muestran actividad tanto lípido cinasa (fosforilación de fosfoinosítidos) como proteína cinasa, que ha 15 demostrado ser capaz de la fosforilación de otra proteína como sustrato, incluyendo la auto-fosforilación como un mecanismo de regulación intramolecular (EMBO J. 18 (5) págs. 1292-302 (1999) por Vanhaesebroeck y col.) Los procedimientos celulares en los que la PI3K desempeña un papel esencial incluyen la supresión de la apoptosis, la reorganización del esqueleto de actina, el crecimiento de los miocitos cardiacos, la estimulación de la glucógeno sintasa por la insulina, el cebado de neutrófilos mediado por TNFa y la generación de superóxido, y la migración de 20 leucocitos y la adhesión a las células endoteliales.

Se cree que la activación de la PI3-cinasa está involucrada en una amplia gama de respuestas celulares Incluyendo el crecimiento, la diferenciación y la apoptosis celulares. (Parker, Current Biology 5 (6) págs. 577-79 (1995); y Yao y col. Science 267 (5206) págs. 2003-06 (1995)). La PI3-clnasa parece estar involucrada en varios aspectos de la activación de los leucocitos. Se ha demostrado que una PI3-clnasa asociada a p85 se asocia físicamente al dominio cltoplásmlco del CD28, que es una molécula coestimuladora importante para la activación de los linfocitos T en respuesta al antfgeno (Pagés y col. Nature 369 págs. 327-29 (1994); y Rudd, Immunity 4 págs. 527-34 (1996)). La activación de los linfocitos T a través del CD28 reduce el umbral para la activación por el antfgeno y aumenta la magnitud y duración de la respuesta proliferativa. Estos efectos están ligados a aumentos en la transcripción de varios genes Incluyendo la interleucina-2 (IL2), un importante factor de crecimiento de linfocitos T (Fraser y col. Science 251 (4991) págs. 313-16 (1991)). La PI3Ky se ha Identificado como un mediador de la regulación G beta- gamma-dependiente de la actividad de la JNK y G beta-gamma son subunidades de proteínas G heterotrlmérlcas (López-llasaca y col. J. Biol. Chem. 273 (5) págs. 2.505 -8 (1998)). Recientemente, (Laffargue y col. Inmunity 16 (3) págs. 441-51 (2002)) se ha descrito que la PI3Ky retransmite señales inflamatorias a través de diversos receptores acoplados a G(i) y es fundamental para la función de los mastocitos, los estímulos en el contexto de los leucocitos, y la inmunología incluyendo las citoclnas, qulmiocinas, adenoslnas, anticuerpos, integrinas, factores de agregación, factores de crecimiento, virus u hormonas, por ejemplo (J. Cell Sci. 114 (Parte 16). págs. 2903-10 (2001) por Lawlor y col.; Laffargue y col. (2002), citado anteriormente; y Curr. Opinión Cell Biol. 14 (2) págs. 203-13 (2002) por Stephens y col.).

Los inhibidores específicos de los miembros individuales de una familia de enzimas proporcionan herramientas invaluables para descifrar las funciones de cada enzima. Dos compuestos, el LY294002 y la wortmanina (en lo sucesivo),... [Seguir leyendo]

1. Un polimorfo (forma II) de A/-[5-[4-(5-{[(2R,6S)-2,6-d¡met¡l-4-morfol¡nil]met¡l}-1,3-oxazol-2-¡l)-1/-/-¡ndazol-6-¡l]-2- (met¡loxi)-3-p¡r¡d¡n¡l]metanosulfonam¡da caracterizado porque proporciona un patrón de XRPD que comprende un pico (°20) a 9,2 ± 0,1

5 2. Un polimorfo según la reivindicación 1 caracterizado porque proporciona un patrón de XRPD que comprende

picos sustancialmente como se expone en la tabla 1

Tabla 1

3. Un polimorfo según la reivindicación 1 o la reivindicación 2 caracterizado porque proporciona un patrón de 10 XRPD sustancialmente de acuerdo con la figura 1.

4. Un polimorfo (forma III) de A/-[5-[4-(5-{[(2R,6S)-2,6-dimetil-4-morfolinil]metil}-1,3-oxazol-2-il)-1/-/-indazol-6-il]-2- (metiloxi)-3-piridinil]metanosulfonamida caracterizado porque proporciona un patrón de XRPD que comprende un pico (°26) a 6,7 ± 0,1.

5. Un polimorfo según la reivindicación 5 caracterizado porque proporciona un patrón de XRPD que comprende 15 picos sustancialmente como se expone en la tabla 2

Tabla 2

(continuación)

6. Un polimorfo según la reivindicación 4 o la reivindicación 5 caracterizado porque proporciona un patrón de XRPD sustancialmente de acuerdo con la figura 2.

5 7. Un polimorfo (forma IV) de A/-[5-[4-(5-{[(2R,6S)-2,6-d¡metil-4-morfol¡nil]metil}-1,3-oxazol-2-il)-1H-indazol-6-il]-2-

(met¡lox¡)-3-p¡r¡d¡n¡l]metanosulfonamida caracterizado porque proporciona un patrón de XRPD que comprende un pico (°20) a aproximadamente 5,8.

8. Un polimorfo según la reivindicación 7 caracterizado porque proporciona un patrón de XRPD que comprende picos sustancialmente como se expone en la tabla 3

Tabla 3

9. Un polimorfo según la reivindicación 7 o la reivindicación 8 caracterizado porque proporciona un patrón de XRPD sustancialmente de acuerdo con la figura 3.

10. Una sal de A/-[5-[4-(5-{[(2R,6S)-2,6-dimetil-4-morfolinil]met¡l}-1,3-oxazol-2-il)-1/-/-indazol-6-il]-2-(metiloxi)-3- 15 pirid¡n¡l]metanosulfonamida que es la sal de sodio, tosllato, maleato, hemipamoato, heminaftalenodisulfonato,

mesltllenosulfonato, hemibifenildlsulfonato, 2-naftalenosulfonato (napsllato), hemicinamato, hemisebacato, hemlplromelltato o hemlbencenodiacrllato.

11. Una composición farmacéutica que comprende un polimorfo o sal como se define en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10 y uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables.

12. Un polimorfo o una sal como se define en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10 para su uso en terapia médica.

5 13. Un polimorfo o una sal como se define en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10 para su uso en el

tratamiento de un trastorno mediado por la actividad inapropiada de la PI3-cinasa.

14. El uso de un polimorfo o una sal como se define en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10 en la fabricación de un medicamento para su uso en el tratamiento de un trastorno mediado por la actividad inapropiada de la PI3-cinasa.