Oligonucleótidos para su uso en la modulación de lipoproteínas y en los niveles de colesterol en humanos.

Un oligonucleótido que consiste en la secuencia de base con ID DE SECUENCIA Nº:

2, donde el oligonucleótido es un oligonucleótido quimérico de 20 nucleótidos de longitud compuesto de una región de hueco central que consiste en diez 2'-desoxinucleótidos flanqueados por los dos lados por cinco alas de nucleótidos compuestos por nucleótidos de 2'-metoxietilo (2'MOE), donde los enlaces de internucleósido son fosforotioato a lo largo del oligonucleótido y todos los residuos de citidina son 5-metilcitidinas, para su uso en el tratamiento de un humano que padece, o tiene un riesgo elevado de padecer hipercolesterolemia, donde:

(a) dicho oligonucleótido se administra durante un período de carga y un período de mantenimiento, o se administra durante un período de mantenimiento, sin un período de carga precedente;

(b) una dosis de 200 mg de dicho oligonucleótido se administra una vez por semana durante el período de mantenimiento; y

(c) dicha dosis de 200 mg se administra por inyección subcutánea.

Oligonucleótidos para su uso en la modulación de lipoproteínas y en los niveles de colesterol en humanos.

CONTEXTO DEL INVENTO

Ámbito del Invento 10

El presente invento trata del oligonucleótido del ID DE SEC. Nº:2 para su uso en el tratamiento de hipercolesterolemia de acuerdo con las reivindicaciones. En este documento se presentan compuestos y métodos para reducir el colesterol LDL y el tratamiento de afecciones asociadas con niveles de colesterol elevados. Más específicamente, se presentan compuestos y métodos para inhibir la expresión de apolipoproteína B en el hígado.

Descripción de las técnicas relacionadas

La cardiopatía coronaria (CHD, por sus siglas en inglés) ha sido la causa principal de muertes en los Estados Unidos durante un siglo y las causas de muertes más habituales en las sociedades occidentales son complicaciones derivadas de la ateroesclerosis (Knopp, New Engl. J. Medicine, 1999, 341, 498-511; Davis y Hui, 20 Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol., 2001, 21, 887-898; Bonow, Circulation, 2002, 106, 3140-3141) . Un nivel alto de colesterol de lipoproteína de baja densidad (colesterol LDL) está ampliamente reconocido como factor de riesgo de CHD. De todas formas, a pesar de la intervención farmacológica, muchos individuos no consiguen reducir los niveles de colesterol LDL.

Las directrices para la terapia de reducción de lípidos las estableció el Panel de Tratamiento de Adultos III del Programa Nacional de Educación sobre el Colesterol (NCEP, por sus siglas en inglés) en 2001. El Comité Coordinador del NCEP recomendó modificaciones a estas directrices en 2004 e incluyó objetivos de tratamientos más agresivos (Grundy et al., Circulation, 2004, 110, 227-239) . Estas directrices definen 3 categorías de riesgo de accidentes coronarios graves y proporcionan unos objetivos de niveles aceptables de colesterol LDL. Los que tienen 30 un riesgo mayor son los pacientes con riesgo de CHD o equivalentes a CHD y deberían mantener el colesterol LDL por debajo de 100 mg/dL. Las directrices de NCEP más recientes recomiendan que los pacientes con alto riesgo de CHD usen terapia con medicamentos para conseguir niveles de colesterol LDL de menos de 70 mg/dL. El CHD equivalente se define como sujetos con diabetes, enfermedad vascular periférica, aneurisma aórtico abdominal, enfermedad de las arterias carótidas sintomáticas y los que tienen factores de riesgo múltiples que confieren un 35 riesgo para 10 años de CHD de más del 20 %. Para la segunda categoría, los pacientes que tienen riesgo moderadamente alto para CHD con factores de riesgo múltiples (2 o más) en los cuales el riesgo para 10 años de CHD del 20 %, el objetivo es un colesterol LDL de menos de 130 mg/dL. Las recomendaciones más recientes incluyen una opción terapéutica para reducir los niveles de colesterol LDL a menos de 100 mg/dL en la categoría de riesgo moderadamente alto. La tercera categoría incluye individuos con 0-1 factores de riesgo y el colesterol LDL 40 objetivo es de menos de 160mg/dL. Los factores de riesgo incluyen la edad, fumar, hipertensión, colesterol HDL bajo e historial familiar de CHD. La terapia con medicamentos debería iniciarse cuando el colesterol LDL en suero se mantenga por encima de 130, 160 y 190 mg/dL en los 3 grupos de riesgo, respectivamente, independientemente de cambios en los hábitos terapéuticos (Grundy et al., Circulation, 2004, 110, 227-239) .

Las lipoproteínas de baja densidad son una de las cinco grandes clases de lipoproteínas, que incluyen las siguientes: quilomicrones, responsables del transporte de lípidos de la dieta del intestino a los tejidos; lipoproteínas de muy baja densidad (VLDL) ; lipoproteínas de densidad intermedia (IDL) ; lipoproteínas de baja densidad (LDL) ; todas ellas transportan triacilgliceroles y colesterol desde el hígado a los tejidos; y lipoproteínas de alta densidad (HDL) , que transportan colesterol endógeno a partir de tejidos al hígado. Las partículas de las lipoproteínas pasan 50 por un procesamiento metabólico continuo y tienen propiedades y composiciones variadas. Los componentes de proteína de las lipoproteínas son conocidos como apolipoproteínas. Por lo menos nueve apolipoproteínas, una de las cuales es la apolipoproteína B, se distribuyen en cantidades significativas entre las diversas lipoproteínas humanas.

La apolipoproteína B (también conocida como ApoB, apolipoproteína B-100; ApoB-100, apolipoproteína B-55 48; ApoB-48 y antígeno Ag (x) ) , es una gran glicoproteína implicada en el ensamblaje y secreción de lípidos y en el transporte y absorción mediada por receptores y la administración de distintas clases de lipoproteínas. La apolipoproteína B lleva a cabo varias funciones, incluida la absorción y procesamiento de lípidos de la dieta, así como la regulación de los niveles de lipoproteína circulante (Davidson and Shelness, Annu. Rev. Nutr., 2000, 20, 169-193) . 60

En los mamíferos existen dos formas de apolipoproteína B. ApoB-100 representa la proteína de largo completo que contiene 4536 residuos de aminoácidos, sintetizados primariamente en el hígado humano (Davidson y Shelness, Annu. Rev. Nutr., 2000, 20, 169-193) . Una forma truncada conocida como apoB-48 es colineal con los residuos de amino terminal 2152 y se sintetiza en el intestino delgado de todos los mamíferos (Davidson y Shelness, 65 Annu. Rev. Nutr., 2000, 20, 169-193) . En humanos, apoB-48 circula en asociación con quilomicrones y restos y esas partículas se despejan por un receptor independiente conocido como proteína relacionada con receptor de LDL (Davidson y Shelness, Annu. Rev. Nutr., 2000, 20, 169-193) . ApoB-48 puede entenderse como una adaptación en la que el lípido de la dieta se suministra a partir del intestino delgado al hígado, mientras que apoB-100 participa en el transporte y suministro de colesterol (Davidson y Shelness, Annu. Rev. Nutr., 2000, 20, 169-193) . ApoB-100 es el principal componente proteico del LDL y contiene el dominio necesario para la interacción de esta especie de 5 lipoproteína con el receptor de LDL. Además, apoB-100 contiene un residuo de cisteína no apareado que media una interacción con apolipoproteína (a) y genera lipoproteína (a) o Lp (a) , otra lipoproteína independiente con potencial aterogénico (Davidson y Shelness, Annu. Rev. Nutr., 2000, 20, 169-193) . Los niveles elevados de plasma de apoB-100 que contenga lipoproteína Lp (a) se asocian con un alto riesgo de ateroesclerosis y sus manifestaciones, que podrían incluir hipercolesterolemia (Seed et al., N. Engl. J. Med., 1990, 322, 1494-1499) , infarto de miocardio 10 (Sandkamp et al., Clin. Chem., 1990, 36, 20-23) y trombosis (Nowak-Gottl et al., Pediatrics, 1997, 99, E11) .

La apolipoproteína B implica homeostasis de colesterol y su sobreproducción se ha asociado con varias enfermedades, incluida la hipercolesterolemia familiar, apoB-100 defectuoso familiar e hipercolesterolemia familiar combinada (Kane y Havel, The Metabolic and Molecular Bases of Inherited Diseases [Bases metabólica y molecular 15 de enfermedades hereditarias], 2001, 8ª edición, 2717-2751) . También se observan perturbaciones del metabolismo de apoB-100 que se corresponden con un alto riesgo de CHD en diabetes y obesidad (Grundy, Am. J. Cardiol., 1998, 81, 18B-25B; Chan et al., Diabetes, 2002, 51, 2377-2386; Chan et al., Metabolism, 2002, 51, 1041-1046) . Además, se ha demostrado por medio de estudios genéticos en modelos de ratón que existe una correlación entre la apolipoproteína B elevada, niveles elevados de colesterol y ateroesclerosis (Kim y Young, J. Lipid Res., 1998, 39, 20 703-723; Nishina et al., J. Lipid Res., 1990, 31, 859-869) .

En estudios de pacientes con hipobetalipoproteínaemia familiar (FHBL) , estos pacientes mostraron una reducción de los niveles de apolipoproteína B en suero, niveles reducidos de colesterol LDL en suero y una reducción de la incidencia de enfermedad de la arteria coronaria (Schonfeld et al., J. Lipid Res., 2003, 44, 878-883) . 25 Los estudios en murinos han demostrado que los ratones que tienen deficiencias heterocigóticas en la apolipoproteína B muestran una reducción del colesterol LDL en suero y de la apolipoproteína B y, además, están protegidos contra la hipercolesterolemia inducida por la dieta. (Farese et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A., 1995, 92, 1774-1778) .

WO 2004/044181, WO 03/097662 y WO 03/011887 presentan oligonucleótidos antisentido dirigidos a la apolipoproteína B.

RESUMEN DEL INVENTO

El presente invento proporciona un oligonucleótido que consiste en la secuencia de la base del núcleo del ID de la SEC. Nº:2, donde el oligonucleótido es un oligonucleótido quimérico de 20 nucleótidos de longitud compuesto por una región de hueco central... [Seguir leyendo]

1. Un oligonucleótido que consiste en la secuencia de base con ID DE SECUENCIA Nº:2, donde el oligonucleótido es un oligonucleótido quimérico de 20 nucleótidos de longitud compuesto de una región de hueco central que 5 consiste en die.

2. desoxinucleótidos flanqueados por los dos lados por cinco alas de nucleótidos compuestos por nucleótidos d.

2. metoxietilo (2MOE) , donde los enlaces de internucleósido son fosforotioato a lo largo del oligonucleótido y todos los residuos de citidina son 5-metilcitidinas, para su uso en el tratamiento de un humano que padece, o tiene un riesgo elevado de padecer hipercolesterolemia, donde:

(a) dicho oligonucleótido se administra durante un período de carga y un período de mantenimiento, o se administra durante un período de mantenimiento, sin un período de carga precedente;

(b) una dosis de 200 mg de dicho oligonucleótido se administra una vez por semana durante el período de mantenimiento; y

(c) dicha dosis de 200 mg se administra por inyección subcutánea. 15

2. El oligonucleótido para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, donde el período de carga dura 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 o 10 días, y donde una única administración o múltiples administraciones se realizan todos los días, cada 2 días, cada 3 días, cada 4 días, cada 5 días, cada 6 días o todas las semanas.

3. El oligonucleótido para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, donde el período de carga dura 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34 o 35 días, y se hace una única administración todos los días, cada 2 días, cada 3 días, cada 4 días, cada 5 días, cada 6 días o cada 7 días.

4. El oligonucleótido para su uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-3, donde las dosis 25 administradas durante el período de mantenimiento son iguales a las dosis administradas durante el período de carga.

5. El oligonucleótido para su uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-3, donde las dosis administradas durante el período de mantenimiento son más bajas que las dosis administradas durante el 30 período de carga.

6. El oligonucleótido para su uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-3, donde las dosis administradas durante el período de mantenimiento son menos frecuentes que la dosis administrada durante el período de carga. 35

7. El oligonucleótido para su uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-6, donde dicho humano muestra por lo menos una indicación seleccionada a partir del grupo que consta de: nivel alto de colesterol total en suero, nivel alto de Colesterol LDL en suero, proporción alta de colesterol total:HDL y proporción alta de LDL:HDL. 40

8. El oligonucleótido para su uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-6, donde dicho humano ha padecido o padece hipercolesterolemia homocigótica familiar o heterocigótica familiar.

9. El oligonucleótido para su uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-6, donde dicho humano ha 45 padecido, padece o tiene un alto riesgo de hipercolesterolemia no familiar.

10. El oligonucleótido para su uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-6, donde dicho humano tiene niveles de Colesterol LDL en suero por encima de aproximadamente 70 mg/dL, por encima de aproximadamente 100 mg/dL o por encima de aproximadamente 130 mg/dL, antes de la administración de dicho oligonucleótido. 50