Métodos y composiciones para inhibición de polimerasa.

Un compuesto de fórmula I **Fórmula**

en donde A es NH2; y B es H,

o una sal o hidrato farmacéuticamente aceptables del mismo, para uso en el tratamiento, supresión o prevención de una infección viral.

Métodos y composiciones para inhibición de polimerasa.

Esta solicitud reivindica prioridad de la Solicitud Provisional de los Estados Unidos No. 61/393, 522 presentada el 15 de octubre de 2010 y la Solicitud Provisional de los Estados Unidos No. 61/492, 054, presentada el 1 de junio de 2011. 5

Está invención está limitada al objeto definido en las reivindicaciones; la siguiente descripción está sujeta a esta limitación.

Antecedentes

Las enfermedades virales son responsables tanto por las pandemias globales como por las epidemias estacionales anuales tales como la influenza. Las apariciones pueden ser caracterizadas por virulencia 10 potenciada y pueden ocurrir repentinamente, dando como resultado mortalidades serias. De manera importante, las enfermedades virales no están limitadas a los humanos. Por ejemplo, la influenza también afecta el ganado y las aves, lo cual puede tener un impacto significativo sobre el suministro de alimentos además del incremento del riesgo de transmisión a los humanos. Condiciones de ejemplo relacionadas con infecciones virales incluyen, por ejemplo, influenza, viruela, encefalitis, enfermedad del Nilo 15 Occidental, fiebre amarilla, fiebre del dengue, hepatitis, inmunodeficiencia humana, polio y Coxsackie.

El genoma del virus de la influenza tiene una ARN polimerasa dependiente del ARN, la cual es un complejo heterotrimérico de tres subunidades (PA, PB1 y PB2) . La ARN polimerasa cataliza la trascripción y replicación del ARN viral. Debido a que la transcripción y replicación del virus depende de la actividad de la ARN polimerasa, está enzima ha alcanzado interés como objetivo para el desarrollo de nuevos 20 compuestos antivirales, especialmente en el inicio de la reciente emergencia por virus resistentes a los fármacos.

La US 7, 560, 434 divulga aza nucleósidos para uso en el tratamiento de infecciones virales. Este documento divulga adicionalmente el ejemplo 1 (en donde A=OH y B=H) y el ejemplo 18 (en donde A=OH y B=NH2) , sin embargo la reivindicación 1 (así como la fórmula en el resumen o en las columnas 3-4) 25 excluye los ejemplos 1 y 18 puesto que en la fórmula de este documento al menos uno de R2, R3, R4 tienen que ser diferente a H cuando el anillo pirrolidina está enlazado a una pirrolopirimidina. Además, no se divulga en dicho documento ninguna actividad antiviral de los ejemplos 1 y 18 de manera clara y no ambigua.

La WO 03/100009 divulga Ib e Ic (compuestos en donde A=OH y B=H o NH2) , potenciadores de la 30 eficacia de los fármacos antivirales.

Resumen de la invención La invención provee métodos y composiciones para la inhibición de polimerasas de ácidos nucleicos virales, y métodos y composiciones que son útiles para tratar, suprimir y/o evitar infecciones virales en sujetos. Los métodos comprenden administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente efectiva de un 35 compuesto de fórmula I, o una sal o hidrato farmacéuticamente aceptables del mismo, o una composición que comprende un compuesto de la fórmula I, o una sal o hidrato farmacéuticamente aceptables del mismo, y un vehículo farmacéuticamente aceptable. La composición o método puede comprender adicionalmente uno o más agentes antivirales adicionales. Los métodos y composiciones son útiles para tratar, suprimir y/o evitar las infecciones virales en sujetos que pueden surgir a partir de la infección por 40 uno o más tipos de virus. Así, los métodos y composiciones son útiles para tratamiento, supresión y/o prevención antiviral de amplio espectro.

La presente invención está basada, en parte, en ciertos descubrimientos los cuales están descritos de manera más completa en la sección de Ejemplos de la presente solicitud. Por ejemplo, la presente invención está basada, en parte, en el descubrimiento de que los niveles de título viral en células se 45 redujeron marcadamente por tratamiento con un compuesto de la fórmula I. Así, la presente invención también provee métodos para reducir el título viral en un fluido corporal o célula que comprende poner en contacto dicho fluido o célula con un compuesto de la fórmula I. La presente invención está basada adicionalmente, en parte, en el descubrimiento de que los niveles de título viral en células para varios virus se redujeron marcadamente por tratamiento con un compuesto de la fórmula I, indicando una 50 actividad antiviral de amplio espectro para el compuesto de la fórmula I contra una variedad de cepas virales. Así, la presente invención también provee métodos para reducir el título viral para varios tipos, subtipos y/o cepas de virus en un fluido corporal o célula que comprende poner en contacto dicho fluido o célula con un compuesto de la fórmula I.

En algunas realizaciones, la presente invención provee un método para inhibir una ARN o ADN polimerasa que comprende poner en contacto la polimerasa con una cantidad inhibidora efectiva del compuesto de la fórmula I, o una sal, solvato o hidrato farmacéuticamente aceptables del mismo.

En algunas realizaciones, el método se lleva a cabo in vivo.

En algunas realizaciones, la presente invención provee un método para tratar un sujeto que sufre de una 5 infección viral de ARN que comprende administrar a dicho sujeto una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En algunas realizaciones, el fluido corporal es sangre. En algunas realizaciones el fluido corporal es plasma. En algunas realizaciones, el fluido corporal es suero sanguíneo.

En algunas realizaciones, el sujeto es un mamífero. En algunas realizaciones, el sujeto es un humano. En 10 algunas realizaciones, el sujeto es un ave. En algunas realizaciones, el sujeto es un porcino o cerdo.

Estas y otras realizaciones de la invención se describen adicionalmente en las siguientes secciones de la solicitud, incluyendo descripción detallada de Ejemplo y Reivindicaciones.

Todavía otros objetos y ventajas de la invención serán evidentes para las personas experimentadas en la técnica a partir de la presente divulgación, la cual es simplemente ilustrativa y no restrictiva. 15

Resumen de las figuras La figura 1 muestra la fosforilación del compuesto 1 en células de carcinoma hepatocelular humano (Huh-7)

La figura 2 muestra la fosforilación de la 3H adenosina en células Huh-7.

La figura 3 muestra la fosforilación de 3H compuesto 1 en células Huh-7. 20

La figura 4 muestra la incorporación en ARN total y ADN genómico de 3H compuesto 1 y 3H adenosina en células Huh-7 después de 24 horas.

La figura 5 muestra los efectos de combinación del compuesto 1 y peramivir (un inhibidor de la neuraminidasa) sobre la influenza in vitro.

La figura 6 muestra el efecto del compuesto 1 (intramuscular) sobre la pérdida de peso en ratones 25 infectados con el virus de influenza H3N2 A/Victoria/3/75.

La figura 7 muestra el efecto del compuesto 1 (oral) en la pérdida de peso en ratones infectados con el virus de la influenza H3N2 A/Victoria/3/75.

La figura 8 muestra el efecto del compuesto 1 (intraperitoneal, intramuscular y oral) sobre la supervivencia de ratones infectados con el virus del Ébola. 30

La figura 9 muestra el efecto del compuesto 1 (intraperitoneal, intramuscular y oral) sobre la pérdida de peso en ratones infectados con el virus del Ébola.

La figura 10 muestra el efecto del compuesto 1 (intramuscular y oral) sobre la supervivencia de ratones infectados con el virus del Ébola.

La figura 11 muestra el efecto del compuesto 1 (intramuscular y oral) sobre la pérdida de peso en ratones 35 infectados con virus del Ébola.

La figura 12 muestra el efecto del compuesto 1 sobre la supervivencia de hámster infectados con el virus de la fiebre amarilla.

La figura 13 muestra el efecto del compuesto 1 sobre la pérdida de peso en hámster infectados con el virus de la fiebre amarilla. 40

La figura 14 muestra la curva farmacocinética oral del compuesto 1 dosificado a 10 mg/kg medida en ratas.

Descripción detallada La invención provee métodos y composiciones para la inhibición de polimerasas de ácidos nucleicos virales, tales como ARN y ADN polimerasas, y métodos y composiciones que son útiles para tratar infecciones virales en sujetos. Los métodos comprenden la administración al sujeto de una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la fórmula I, o una sal o hidrato farmacéuticamente aceptables del mismo, o una composición que comprende un compuesto de la fórmula I, o una sal o 5 hidrato farmacéuticamente aceptable del mismo, y un vehículo farmacéuticamente aceptable. La composición o método puede comprender opcionalmente... [Seguir leyendo]

1. Un compuesto de fórmula I

en donde A es NH2; y B es H, o una sal o hidrato farmacéuticamente aceptables del mismo, para uso en el tratamiento, supresión o prevención de una infección viral. 5

2. El compuesto para uso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde dicha infección viral comprende infección con uno o más virus.

3. El compuesto para uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-2, en donde la infección viral comprende un virus seleccionado del grupo consistente de las familias orthmyxoviridae, paramyxoviridae, arenaviridae, bunyaviridae, flaviviridae, filoviridae, togaviridae, picornaviridae, y 10 coronaviridae; o en donde la infección viral es seleccionada del grupo consistente de virus de adenovirus, rinovirus, hepatitis, virus de inmunodeficiencia, polio, sarampión, Ébola, Coxsackie, Rhino, Nilo Occidental, viruela, encefalitis, fiebre amarilla, fiebre del dengue, influenza A, influenza B, lassa, coriomeningitis linfocítica, Junín, machupo, guanarito, hantavirus, fiebre del valle del Rift, La Crosse, encefalitis de California, 15 Crimea-Congo, Marburg, encefalitis Japonesa, Bosque de Kyasanur, encefalitis equina venezolana, encefalitis equina oriental, encefalitis equina occidental, síndrome respiratorio agudo severo (SARS) , parainfluenza, respiratorio sincicial, Punta Toro, Tacaribe y paquindae; o en donde la infección viral es seleccionada del grupo consistente de virus de adenovirus, fiebre del dengue, influenza A, influenza B, Junín, sarampión, parainfluenza, Pichinde, punta toro, respiratorio 20 sincicial, rinovirus, fiebre del valle del Rift, SARS-CoV, tacaribe, encefalitis equina venezolana, Nilo Occidental, y fiebre amarilla; o

en donde la infección viral es seleccionada del grupo consistente de virus de Ébola, fiebre amarilla, Marburg, influenza A e influenza B.

4. Un compuesto de fórmula I: 25

en donde A es NH2; y B es H; o una sal o hidrato farmacéuticamente aceptables del mismo, para uso en la inhibición de una ARN polimerasa viral seleccionada del grupo consistente de polimerasas virales de orthmyxoviridae, paramyxoviridae, arenaviridae, bunyaviridae, flaviviridae, filoviridae, togaviridae, picornaviridae, y coronaviridae. 30

5. El compuesto para uso de acuerdo con la reivindicación 4, en donde se inhibe una segunda ARN polimerasa viral.

6. El compuesto para uso de acuerdo con la reivindicación 5, en donde la segunda ARN polimerasa viral es seleccionada del grupo consistente de las polimerasas virales de orthmyxoviridae, paramyxoviridae, arenaviridae, bunyaviridae, flaviviridae, filoviridae, togaviridae, picornaviridae, y coronaviridae.

7. El compuesto para uso de acuerdo con la reivindicación 5 o 6, en donde la segunda ARN polimerasa viral es seleccionada del grupo consistente de polimerasas virales de adenovirus, influenza A, influenza B, 5 parainfluenza, respiratorio sincicial, rinovirus, Junín, Pichinde, fiebre del Valle del Rift, fiebre del dengue, sarampión, fiebre amarilla, tacaribe, encefalitis equina venezolana, Nilo occidental y SARS-CoV.

8. El compuesto para uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 4-7, en donde la ARN polimerasa viral es seleccionada del grupo consistente de polimerasas virales de adenovirus, rinovirus, hepatitis, virus de inmunodeficiencia, polio, sarampión, Ébola, Coxsackie, Rhino, Nilo Occidental, viruela, 10 encefalitis, fiebre amarilla, fiebre del dengue, influenza A, influenza B, lassa, coriomeningitis linfocítica, Junín, machupo, guanarito, hantavirus, fiebre del valle del Rift, La Crosse, encefalitis de California, Crimea-Congo, Marburg, encefalitis Japonesa, Bosque de Kyasanur, encefalitis equina venezolana, encefalitis equina oriental, encefalitis equina occidental, síndrome respiratorio agudo severo (SARS) , parainfluenza, respiratorio sincicial, Punta Toro, Tacaribe y paquindae; o 15

en donde la ARN polimerasa viral es una polimerasa seleccionada del grupo consistente de polimerasas virales de adenovirus, fiebre del dengue, influenza A, influenza B, Junín, sarampión, parainfluenza, Pichinde, punta toro, respiratorio sincicial, rinovirus, fiebre del valle del Rift, SARS-CoV, tacaribe, encefalitis equina venezolana, Nilo Occidental, y fiebre amarilla; o

en donde la ARN polimerasa viral es una polimerasa seleccionada del grupo consistente de polimerasas 20 virales de Ébola, fiebre amarilla, Marburg, influenza A e influenza B.

9. El compuesto para uso de acuerdo con cualquier reivindicación precedente, que comprende adicionalmente la administración de un agente antiviral adicional.

10. El compuesto para uso de acuerdo con la reivindicación 9, en donde el agente antiviral adicional es seleccionado del grupo consistente de laninamivir, oseltamivir, zanamivir y peramivir. 25

11. El compuesto para uso de acuerdo con la reivindicación 9 o 10, en donde el agente antiviral adicional es peramivir.

12. El compuesto para uso de acuerdo con cualquier reivindicación precedente, en donde el compuesto es para administración intravenosa, intraperitoneal, intramuscular u oral.