Fracción de extracto de hoja de melisa que tiene actividades inhibidoras de MMP y de angiogénesis, y composición que comprende la misma.

Una composición farmacéutica para uso en inhibir actividades de MMP 2 o MMP 9 (metaloproteinasa de matriz) y angiogénesis que comprende una fracción de acetato de etilo de hoja de melisa junto con una vehículo farmacéuticamente aceptable,

en la que la hoja de melisa se extrae con etanol o metanol al 70-80 5 % y se concentra, y después el extracto de etanol o metanol concentrado se suspende en agua y se fracciona con acetato de etilo, y se seca para obtener la fracción de acetato de etilo de hoja de melisa.

Fracciïn de extracto de hoja de melisa que tiene actividades inhibidoras de MMP y de angiogïnesis, y composiciïn que comprende la misma 5

Campo tïcnico La presente invenciïn se refiere a una fracciïn de acetato de etilo de hoja de melisa que tiene excelentes actividades inhibidoras de MMP y de angiogïnesis, y una composiciïn que comprende la misma. En particular, la fracciïn de acetato de etilo de hoja de melisa se caracteriza porque la hoja de melisa se extrae con alcohol C1∼C6 al 70∼80 % y despuïs el extracto de alcohol concentrado se suspende en agua y se fracciona con acetato de etilo y se seca, obteniïndose la fracciïn de acetato de etilo de hoja de melisa.

Tïcnica anterior

La melisa (Melissa officinalis) , una hoja perenne de la familia de las lamiïceas, tambiïn se denomina hoja de limïn, toronjil o cidronela, como denominaciones comunes y populares.

Los constituyentes claves de la Melissa officinalis son flavonoides, ïcidos terpïnicos, aceites volïtiles, glicïsidos de los compuestos alcohïlicos y fenïlicos y derivados de ïcido cafeico. Especialmente, como flavonoides son componentes abundantes cinarïsido, cosmosina, ramnocitrina e isoquercitrina y como ïcido terpïnico es un componente el ïcido ursïlico. El ïcido rosmarïnico como derivados de ïcido cafeico es el componente mïs abundante (aproximadamente el 4, 7 %) , y geranial, neral, citronelal y eugenol son componentes bien conocidos como aceites volïtiles contenidos en el extracto de hoja de melisa.

El ïcido rosmarïnico, un componente no volïtil abundante de la hoja de melisa, tiene un efecto potente antiinflamatorio y antipirïtico, y se han usado aceites esenciales contra la depresiïn, cefalea neurogïnica, disminuciïn de la memoria, neuralgia, fiebre y tambiïn es bien conocido por tener efectos sedantes, antibacterianos, antivïricos, antioxidantes y antihormonales. Recientemente, el extracto de hoja de melisa se ha incluido entre los activadores de la circulaciïn sanguïnea, que fomentan la dilataciïn de vasos sanguïneos perifïricos.

La angiogïnesis es el proceso de generaciïn de nuevos vasos sanguïneos capilares. La neovascularizaciïn estï regulada estrechamente, y tiene lugar durante el desarrollo embrionario, la remodelaciïn de tejido, la cicatrizaciïn de heridas y ciclos periïdicos de desarrollo del cuerpo lïteo (Folkman y Cotran, Relation of vascular proliferation to tumor growth, Int Rev Exp Pathol 16 207-248, 1976) .

Las cïlulas endoteliales se desarrollan muy lentamente en comparaciïn con otros tipos de cïlulas del organismo. Sin embargo, la proliferaciïn de cïlulas endoteliales estï inducida por citocinas de proangiogïnesis, enzimas hidrolïticas activas que liberan mediadores angiogïnicos de la matriz extracelular o la estimulaciïn de factores angiogïnicos.

En general, el proceso de angiogïnesis es la degradaciïn de la membrana basal de vasos sanguïneos, la migraciïn de cïlulas endoteliales y la formaciïn de lumen mediante proliferaciïn y diferenciaciïn de cïlulas endoteliales. Uno de los eventos principales en el proceso de angiogïnesis es la ruptura de la matriz extracelular antes de la formaciïn 45 de los vasos sanguïneos capilares. La enzima mïs importante de degradaciïn de matriz es la metaloproteinasa de matriz (MMP) .

Cuando tiene lugar un fallo en la regulaciïn de la angiogïnesis o las MMP estïn sobreactivadas, tiene lugar una angiogïnesis patolïgica (Polverini PJ, Critical Reviews in Oral Biology, 6 (3) , 230-247 (1995) ; Arup Das y col., Progress in Retinal and Eye Research, 22 (2003) 721-748; Nick Di Girolamo y col., IOVS, agosto de 2001, Vol. 42, Nï 9, 1963-1968; Patricia Lee y col., Survey of ophthalmology, Vol 43, Nï 3, nov-dic 1998, 245-269; D.B. Holland y col., British Journal of Dermatology 2004, 150, 72-81; Anthony H Vagnucci Jr y col., The Lancet, Vol. 361, 15 de febrero, 2003, 605-608; Berislav V. Zlokovic, Trends in Neuroscience, Vol. 28, Nï 4, abril de 2005, 202-208; Jaap G. Neels y col., The FASEB Journal express artïculo 10. 1096/fj.03-1101fje. Publicado en lïnea el 14 de abril de 2004;

D.L. Crandall y col., Microcirculation, 4, 1997, 211-232; G. Voros y col., Endocrinology, 146, 2005, 4545-4554; M.A. Rupnick y col., PNAS, 99, 2002, 10730-10735; E. Brakenhielm y col., Circ. Res., 94, 2004, 1579-1588; H.R. Lijnen y col., Arterioscler Thromb Vasc Biol., 22. 2002, 374-379; D. Demeulemeester y col., Biochem. Biophys. Res. Commun., 329, 2005, 105-110, etc.) .

Desarrollo de cïncer y metïstasis Angioma, angiofibroma, deformidad vascular y enfermedades cardiovasculares tales como aterosclerosis, angiostenosis, esclerosis edïmica y estenosis;

Enfermedades oftalmolïgicas tales como retinopatïa diabïtica, degeneraciïn macular (incluida la degeneraciïn macular relacionada con la edad) , pterigiïn, degeneraciïn de la retina, angiogïnesis en implante de cïrnea, glaucoma angiogïnico, enfermedades angiogïnicas de la cïrnea tales como sinequia de la cïrnea y sinequia del iris, fibroplasias retrolentales, conjuntivitis granular, ïlcera de cïrnea, retinopatïa de cuerpo vïtreo proliferativa, retinopatïa inmadura, inflamaciïn de ojo en ojos, cïrnea cïnica, sïndrome de Sjogren, miopïa, tumores oculares y rechazo en implante de cïrnea;

Obesidad;

Enfermedades crïnicas tales como artritis, artritis reumatoide, osteoartritis, artritis sïptica, osteopatïa mediada por MMP y pïrdida degenerativa de cartïlago despuïs de una lesiïn traumïtica articular;

Enfermedades inflamatorias tales como inflamaciïn del sistema nervioso central y enfermedad inflamatoria del intestino;

Enfermedades dermatolïgicas tales como psoriasis, telangiectasia, granuloma piogïnico, dermatitis seborreica y 15 acnï;

Enfermedad de Alhzeimer;

Sinequia de la cïrnea, proteinuria, eneurisma aïrtico abdominal, tejido nervioso desmielinizado, fibrosis hepïtica, enfermedad nefroglomerular, ruptura prematura de la membrana fetal, enfermedades periodontales tales como gingivitis y periodontitis.

En particular, la angiogïnesis tiene un papel muy importante en el desarrollo y la metïstasis de cïlulas cancerosas. Los nuevos vasos sanguïneos no solo suministran nutrientes y oxïgeno para un desarrollo rïpido de la cïlulas cancerosas, sino que tambiïn proporcionan un acceso a la circulaciïn para la evoluciïn de metïstasis [Folkman y Tyler, Cancer Invasion and metastasis, Biologic mechanisms and Therapy (S.B. Day ed.) Raven press, Nueva York, 94-103 (1977) ; Polverini PJ, Critical Reviews in Oral Biology, 6 (3) , 230-247 (1995) ].

Los pacientes con cïncer mueren debido a la metïstasis, y la quimioterapia y la inmunoterapia usadas actualmente en el tratamiento de cïncer no pueden contribuir a la supervivencia de pacientes con cïncer debido a la falta de efectos antimetastïsicos.

La artritis, una enfermedad inflamatoria bien conocida, se inicia como enfermedad autoinmunitaria. No obstante, el desarrollo de cïlulas endoteliales vasculares en la cavidad sinovial se activa mediante las citocinas inflamatorias,

que finalmente destruyen el cartïlago en la articulaciïn. En otras palabras, la proliferaciïn de cïlulas sinoviales y cïlulas endoteliales en la cavidad sinovial junto con citocinas que inducen la inflamaciïn induce angiogïnesis y formaciïn de pannus, que desempeïan el papel principal en la destrucciïn de cartïlago (Kocb AE, Polverini PJ y Lcibovich SJ, Arth Rheum 29, 471-479, 1986; Stupack DG, Storgard CM y Cheresh DA, Braz J Med Biol Rcs 32, 578581, 1999 Koch AE, Arthritis Rheum 41, 951-962, 1998) . Mientras tanto, se ha demostrado tambiïn que la estromelisina, en artritis y en lesiïn traumïtica de las articulaciones, se reconoce que tiene un papel importante en la activaciïn de procolagenasa para activar colagenasa [Murphy, G. y col., Biochem. J. 248, 265∼268 (1987) ]. Por lo tanto, la regulaciïn a la baja de la actividad de MMP puede evitar el progreso de la artritis.

Mucha gente pierde la visiïn a lo largo del mundo debido a diversas enfermedades oculares. Muchos pacientes se 45 quedan ciegos debido a la infiltraciïn de las cïlulas sanguïneas capilares en el humor vïtreo (Jeffrey MI y Takayuki A, J Clin Invest 103, 1231-1236, 1999) . Degeneraciïn macular relacionada con la edad, retinopatïa diabïtica, retinopatïa de prematuridad, glaucoma angiogïnico, enfermedades angiogïnicas de la cïrnea son enfermedades angiogïnicas oculares tïpicas [Adamis AP, Aiello LP y D’Amato RA, Angiogïnesis 3, 9-14 (1999) ]. La retinopatïa diabïtica, una complicaciïn de la diabetes, estï provocada por la ruptura de capilares y por el cubrimiento de la hemorragia de la superficie de la retina.

La colagenasa, la... [Seguir leyendo]

1. Una composiciïn farmacïutica para uso en inhibir actividades de MMP 2 o MMP 9 (metaloproteinasa de matriz) y angiogïnesis que comprende una fracciïn de acetato de etilo de hoja de melisa junto con una vehïculo farmacïuticamente aceptable, en la que la hoja de melisa se extrae con etanol o metanol a.

7. 80 % y se concentra, y despuïs el extracto de etanol o metanol concentrado se suspende en agua y se fracciona con acetato de etilo, y se seca para obtener la fracciïn de acetato de etilo de hoja de melisa.

2. Una composiciïn farmacïutica para usar en la prevenciïn o el tratamiento de la obesidad, que comprende la fracciïn de acetato de etilo de hoja de melisa de la reivindicaciïn 1 junto con un vehïculo farmacïuticamente aceptable, causando dicha composiciïn la reducciïn del tejido adiposo.

3. Una composiciïn farmacïutica para usar en la prevenciïn o el tratamiento de retinopatïa diabïtica, degeneraciïn macular, degeneraciïn macular relacionada con la edad, pterigiïn, degeneraciïn de la retina, neovascularizaciïn de injerto de cïrnea, glaucoma neovascular, enfermedad neovascular de la cïrnea, fibroplasia retrolental, tracoma, ïlcera de la cïrnea, retinopatïa inmadura, queratocono, sïndrome de Sjogren, miopïa, tumor ocular o rechazo de injerto despuïs de queratoplastia, que comprende la fracciïn de acetato de etilo de hoja de melisa de la reivindicaciïn 1 junto con un vehïculo farmacïuticamente aceptable.

4. Una composiciïn farmacïutica para usar en la prevenciïn o el tratamiento del desarrollo de cïncer y de metïstasis que comprende la fracciïn de acetato de etilo de hoja de melisa de la reivindicaciïn 1 junto con un vehïculo farmacïuticamente aceptable.

5. Una composiciïn farmacïutica para usar en la prevenciïn o el tratamiento de hemangioma, angiofibroma,

malformaciïn vascular, arteriosclerosis, adhesiïn vascular, escleroderma o reestenosis, que comprende la fracciïn de acetato de etilo de hoja de melisa de la reivindicaciïn 1 junto con un vehïculo farmacïuticamente aceptable.

6. Una composiciïn farmacïutica para usar en la prevenciïn o el tratamiento artritis, artritis reumatoide, osteoartritis, artritis sïptica, osteopenia mediada por MMP o pïrdida degenerativa de cartïlago despuïs de una lesiïn traumïtica articular, que comprende la fracciïn de acetato de etilo de hoja de melisa de la reivindicaciïn 1 junto con un vehïculo farmacïuticamente aceptable.

7. Una composiciïn farmacïutica para usar en la prevenciïn o el tratamiento de psoriasis, telangiestasia, granuloma biogïnico, dermatitis seborreica o acnï, que comprende la fracciïn de acetato de etilo de hoja de melisa de la 35 reivindicaciïn 1 junto con un vehïculo farmacïuticamente aceptable.

8. Una composiciïn farmacïutica para usar en la prevenciïn o el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer que comprende la fracciïn de acetato de etilo de hoja de melisa de la reivindicaciïn 1 junto con un vehïculo farmacïuticamente aceptable.

9. Una composiciïn farmacïutica para usar en la prevenciïn o el tratamiento de concrescencia anormal de heridas, proteinuria, aneurisma aïrtico abdominal, tejido nervioso desmielinizado, fibrosis hepïtica, enfermedades nefroglomerulares, ruptura prematura de la membrana fetal o enfermedades periodontales, que comprende la fracciïn de acetato de etilo de hoja de melisa de la reivindicaciïn 1 junto con un vehïculo farmacïuticamente 45 aceptable.

10. La composiciïn farmacïutica para usar segïn una cualquiera de las reivindicaciones 1 y 3 a 10, estando formulada la composiciïn en una forma de dosificaciïn de grïnulos, polvos, comprimidos, comprimidos recubiertos, cïpsulas, pïldoras, jarabes, gotas, lïquidos, soluciones, suspensiones, emulsiones o soluciones inyectables.