Expresión de proteínas de leche humana en plantas transgénicas.

Una semilla o planta de arroz transgénica madura transformada de manera estable con un gen quimérico que tiene

(i) una secuencia de ADN líder que codifica una secuencia de tránsito específica de semilla de monocotiledónea capaz de dirigirse a un polipéptido unido a un orgánulo de célula de endospermo unida operativamente a una región reguladora transcripcional de un gen de monocotiledónea que tiene un promotor específico de maduración de semilla,

en el que dicha región reguladora transcripcional y secuencia de ADN líder unida operativamente se representan en la SEC ID Nº: 15 o 16; y

(ii) una secuencia codificante de proteína optimizada por codones que codifica una proteína normalmente presente en leche humana.

Expresión de proteínas de leche humana en plantas transgénicas Campo de la invención La presente invención se refiere al campo de proteínas de leche humana producidas en las semillas de plantas 5 transgénicas, a extractos de semillas que contienen las proteínas, a plantas y semillas transgénicas y a métodos para producir y usar las mismas.

Referencias En el presente documento se citan las siguientes referencias. Alber y Kawasaki, Mol. and Appl. Genet 1: 419-434, 1982.

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1. Una semilla o planta de arroz transgénica madura transformada de manera estable con un gen quimérico que tiene

(i) una secuencia de ADN líder que codifica una secuencia de tránsito específica de semilla de monocotiledónea capaz de dirigirse a un polipéptido unido a un orgánulo de célula de endospermo unida operativamente a una región reguladora transcripcional de un gen de monocotiledónea que tiene un promotor específico de maduración de semilla, en el que dicha región reguladora transcripcional y secuencia de ADN líder unida operativamente se representan en la SEC ID Nº: 15 o 16; y

(ii) una secuencia codificante de proteína optimizada por codones que codifica una proteína normalmente presente en leche humana.

2. La semilla de la reivindicación 1, en la que la proteína de leche humana se selecciona del grupo que consiste en lactoferrina, lisozima, lactoferricina, lactadherina, kappa caseína, haptocorrina, lactoperoxidasa y alfa-1-antitripsina.

3. La semilla de la reivindicación 2, en la que la proteína de leche humana se selecciona del grupo que consiste en lisozima, lactoferrina, alfa-1-antitripsina y kappa caseína.

4. La semilla de la reivindicación 2 o 3, en la que la proteína de leche humana es lactoferrina o lisozima.

5. Un método para producir una proteína de leche humana recombinante en semillas de plantas de arroz que comprende las etapas de:

(a) obtener una planta de arroz transformada de manera estable con un gen quimérico que contiene

(i) una secuencia de ADN líder que codifica una secuencia de tránsito específica de semilla monocotiledónea capaz de dirigir a un polipéptido unido a un orgánulo de célula de endospermo unido operativamente a una región reguladora transcripcional de un gen de monocotiledónea que tiene un promotor específico de maduración de semilla, en la que dicha región reguladora transcripcional y secuencia de ADN líder unida operativamente se representan en la SEC ID Nº: 15

o 16; y

(ii) una secuencia codificante de proteína optimizada por codones que codifica una proteína normalmente presente en leche humana.

(b) cultivar la planta en condiciones de maduración de semilla;

(c) recoger las semillas de la planta cultivada; y

(d) extraer de las semillas cultivadas una harina, extracto o composición de malta que contiene la proteína de leche humana en forma no purificada.

6. El método de la reivindicación 5, en el que la planta monocotiledónea transformada comprende adicionalmente un ácido nucleico que codifica al menos un factor de transcripción seleccionado del grupo que consiste en Reb, O2 y PBF, y un fragmento activo de los mismos.

7. El método de la reivindicación 6, en el que el factor de transcripción es O2 y/o PBF.

8. El método de una cualquiera de las reivindicaciones 5 a 7, en el que la secuencia codificante de proteína es una secuencia codificante de una proteína de leche humana seleccionada del grupo que consiste en lactoferrina, lisozima, lactoferricina, lactadherina, kappa caseína, haptocorrina, lactoperoxidasa, alfa-1-antitripsina e inmunoglobulinas.

9. El método de la reivindicación 8, en el que la secuencia codificante de proteína se selecciona del grupo de secuencias optimizadas por codones identificadas por las SEC ID Nº: 1, 3 y 7-14.