Derivados de nistatina y su uso como agentes antifúngicos.

Un compuesto que es un derivado de nistatina que tiene un doble enlace adicional presente entre C28 y C29 y que está modificado además con respecto a nistatina en C16 y opcionalmente una o más de las posiciones C5,

C9, C10 o en el grupo amino de micosamina, que tiene la fórmula (I)**Fórmula**

en la que,

R1 y R2 representan, cada uno independientemente, un átomo de hidrógeno, un grupo hidroxilo, un grupo alcoxi, un grupo aciloxi o un grupo alquilo, o juntos forman un grupo carbonilo;

R3 y R4 representan, cada uno independientemente, un átomo de hidrógeno, un grupo hidroxilo, un grupo alcoxi, un grupo aciloxi o un grupo alquilo, o juntos forman un grupo carbonilo;

R5 y R6 representan, cada uno independientemente, un átomo de hidrógeno, un grupo hidroxilo, un grupo alcoxi, un grupo aciloxi o un grupo alquilo;

R7 representa un grupo alquilo o un grupo amida;

R8 y R9 representan, cada uno independientemente, un átomo de hidrógeno, un grupo alquilamino, un grupo de azúcar o un grupo acilo;

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo,

en el que

por "grupo alquilo" se quiere decir un grupo de hidrocarburo saturado cíclico o acíclico, de cadena lineal o ramificado, que contiene hasta 20 átomos de carbono, que puede estar no sustituido o sustituido con un sustituyente seleccionado de los grupos hidroxi, alcoxi, aciloxi y amino, y que puede estar interrumpido con uno o más grupos seleccionados de -arilo-, -O-, -NR12- y -S-, en el que R12 representa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo de C1-6;

por "grupo alcoxi" se quiere decir un grupo -OR, en el que R es un grupo alquilo como se define aquí antes; por "grupo aciloxi" se quiere decir un grupo -OCOR14, en el que R14 es un grupo alquilo como se define aquí antes;

por "grupo alquilamino" se quiere decir un grupo -(CH2)xNR16R17 en el que x es 1 a 10 y R16 y R17 representan, cada uno independientemente, un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo de C1-6;

por "grupo de azúcar" se quiere decir un sacárido, preferiblemente un oligo- o monosacárido;

por "grupo acilo" se quiere decir un grupo -COR18 en el que R18 es un grupo alquilo como se define antes; por "grupo amida" se quiere decir un grupo de fórmula (III):**Fórmula**

en la que R10 y R11 representan, cada uno independientemente, un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo opcionalmente sustituido como se define aquí antes, o juntos forman un anillo alquilo.

Derivados de nistatina y su uso como agentes antifúngicos

La presente invención se refiere a nuevos derivados de nistatina y a procedimientos para la preparación de los mismos. La invención se refiere particularmente al uso de los nuevos derivados de nistatina en medicina, especialmente como agentes antifúngicos.

La nistatina es un complejo de origen natural de sustancias antifúngicas producido por ciertas cepas de la bacteria grampositiva Streptomyces noursei. El principal componente de la nistatina es nistatina Ai, que es un macrólido poliénico que tiene la estructura mostrada a continuación:

OH

La nistatina es el agente activo presente en un número de preparaciones patentadas (por ejemplo Infestat, Nyspes, Nystamont, Nystan, Mycostatin y Nilstat) para uso en el tratamiento de candidiasis de la piel y membranas mucosas. Habitualmente se administra de forma oral o tópica incluso aunque sólo se absorbe pobremente desde el tubo digestivo o a través de la piel y las membranas. Esto es debido a que es tóxica cuando se administra parenteralmente.

La nistatina es una parte de una familia de antibióticos macrólidos poliénicos. Otros miembros de la familia incluyen pimaricina, rimocidina, candicidina, aureofacina, levorina y anfotericina. La anfotericina es el agente antifúngico usado más habitualmente, ya que se considera generalmente que es el más eficaz. Tiene actividad antifúngica de amplio espectro pero, al igual que la nistatina, tiene la importante desventaja de la toxicidad, lo que limita las vías de administración y las dosis que se pueden usar.

Los esfuerzos de investigación sobre antibióticos policétidos macrólicos se han centrado por lo tanto en anfotericina y, en particular, en la identificación de nuevos análogos de anfotericina con menor toxicidad. Se han adoptado generalmente dos enfoques distintos. En un primer enfoque, los investigadores han usado modificaciones químicas para tratar de reducir la toxicidad y/o para mejorar la actividad antifúngica de anfotericina. Puesto que la síntesis total de anfotericina no es económicamente factible, sin embargo, el material de partida es habitualmente anfotericina B obtenida a partir de cultivos de Streptomyces nodosus. Como resultado, las modificaciones químicas se han concentrado en la derivatización de los grupos funcionales presentes en el anillo de anfotericina B.

Mucho más recientemente, los investigadores han adoptado un enfoque diferente que se dirige a la ruta biosintética de anfotericina, que está compuesta de una línea de ensamblaje de diferentes enzimas. La cadena de carbono de anfotericina se ensambla a partir de unidades de acetato y propionato mediante policétido sintasas modulares (tipo 1), y el macrólido resultante se modifica subsiguientemente por otras enzimas que provocan oxidación, glucosilación e hidroxilación. Se han identificado los genes que codifican las enzimas implicadas en esta biosíntesis, y de este modo los investigadores han sido capaces de introducir cambios a la ruta biosintética natural, por ejemplo, eliminando, añadiendo o modificando un gen, y de ese modo eliminando, añadiendo o modificando una enzima implicada en la síntesis. El resultado neto son moléculas de anfotericina modificadas.

Por lo tanto, se ha obtenido y ensayado un gran número de moléculas de anfotericina modificadas, especialmente derivados modificados químicamente. A pesar de estos esfuerzos, sin embargo, se han identificado pocos candidatos farmacéuticos prometedores que tengan un balance apropiado de propiedades farmacológicas, principalmente actividad antifúngica elevada, baja toxicidad, y solubilidad en agua. Por tanto, todavía existe la necesidad de nuevos antibióticos para tratar enfermedades infecciosas, y en particular infecciones fúngicas sistémicas agudas que están creciendo en incidencia. Este requisito se hace cada vez más urgente a medida que se desarrolla resistencia a los agentes antifúngicos existentes.

En comparación con la anfotericina, se ha llevado a cabo muy poca investigación sobre la modificación de nistatina, presuntamente debido a que tiene una actividad menor que la anfotericina, aunque sufre de las mismas desventajas de toxicidad e insolubilidad en agua. Como resultado, no se ha considerado una molécula de partida atractiva para tal trabajo.

En un estudio reciente (Organic Letters, 26, 8 (9), 187-189), se prepararon dos derivados de nistatina mediante alquilación reductora del grupo amino de micosamina. Se encontró que los derivados resultantes tienen mayor

actividad antifúngica que la nistatina, pero fueron menos activos que los derivados de anfotericina B preparados de la misma manera. La modificación de anfotericina B se consideró por lo tanto más prometedora, y la toxicidad de estos derivados se ensayó y se demostró que es considerablemente menor en comparación con la molécula progenitora.

En el documento WO1/59126 se describe la clonación y secuenciación del agolpamiento génico que codifica la policétido sintasa y otras enzimas responsables de la síntesis de nistatina. El documento WO1/59126 también continúa sugiriendo una plétora de manipulaciones potenciales que se podrían llevar a cabo en teoría sobre el agrupamiento génico para producir estructuras de nistatina modificadas. Éstas incluyen modificaciones para eliminar o añadir enlaces dobles del fragmento poliénico de nistatina, modificaciones para eliminar o reponer el grupo carboxilo de C16, modificaciones para añadir otros grupos hidroxilo, y modificaciones para truncar el anillo de macrolactona.

Estará claro inmediatamente de lo anterior que se podrían preparar un gran número (aproximadamente 117) de estructuras de nistatina modificadas diferentes llevando a cabo una o más de las modificaciones sugeridas en el documento WO1/59126. La posibilidad de modificar entonces además cualesquiera de los compuestos producidos mediante manipulación genética con modificaciones químicas adicionales significa que son teóricamente posibles quintillones de compuestos. Puesto que se ha llevado a cabo tan poco trabajo sobre la nistatina, sin embargo, no hay datos para sugerir cuál de este basto número de compuestos puede mostrar menor toxicidad en comparación con nistatina y/o anfotericina (es decir, esos agentes activos usados actualmente).

Sin embargo, ahora se ha encontrado sorprendentemente que ciertos derivados de nistatina tienen una toxicidad significativamente menor que anfotericina, y ventajosamente, también se ha encontrado que los mismos derivados muestran actividad antifúngica útil. A diferencia de la inmensa mayoría de compuestos de anfotericina modificados que se han preparado, los derivados de nistatina que se han identificado ahora son derivados de "segunda generación". En otras palabras, estos compuestos son derivados de un derivado de nistatina, y de este modo comprenden dos o más modificaciones con respecto a la estructura de nistatina Ai.

De este modo, visto desde un primer aspecto, la invención proporciona un compuesto que es un derivado de nistatina que tiene un doble enlace adicional presente entre C28 y C29 y que está modificado además con respecto a nistatina en C16 y opcionalmente una o más de las posiciones C5, C9, C1 o en el grupo amino de micosamina, que tiene la fórmula I,

en la que,

R1 y R2 representan, cada uno independientemente, un átomo de hidrógeno, un grupo hidroxilo, un grupo alcoxi, un grupo aciloxi o un grupo alquilo, o juntos forman un grupo carbonilo (por ejemplo R1 y R2 representan, cada uno independientemente, un átomo de hidrógeno o un grupo hidroxilo, o juntos forman un grupo carbonilo;

R3 y R4 representan, cada uno independientemente, un átomo de hidrógeno, un grupo hidroxilo, un grupo alcoxi, un grupo aciloxi o un grupo alquilo, o juntos forman un grupo carbonilo (por ejemplo, R3 y R4 representan, cada uno independientemente, un átomo de hidrógeno o un grupo hidroxilo, o juntos forman un grupo carbonilo;

R5 y R6 representan, cada uno independientemente, un átomo de hidrógeno, un grupo hidroxilo, un grupo alcoxi, un grupo aciloxi o un grupo alquilo (por ejemplo, un átomo de hidrógeno o un grupo hidroxilo);

R7 representa un grupo alquilo o un grupo amida;

R8 y R9 representan, cada uno independientemente, un átomo de hidrógeno, un grupo alquilamino, un grupo de azúcar o un grupo acilo;

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que

por "grupo alquilo" se quiere decir un grupo de hidrocarburo saturado cíclico o acíclico, de cadena lineal o ramificado, que contiene hasta 2 átomos de carbono, que puede estar no sustituido o sustituido con un sustituyente seleccionado de los grupos hidroxi, alcoxi, aciloxi... [Seguir leyendo]

1. Un compuesto que es un derivado de nistatina que tiene un doble enlace adicional presente entre C28 y C29 y que está modificado además con respecto a nistatina en C16 y opcionalmente una o más de las posiciones C5, C9, C1 o en el grupo amino de micosamina, que tiene la fórmula (I)

R1 y R2 representan, cada uno independientemente, un átomo de hidrógeno, un grupo hidroxilo, un grupo alcoxi, un grupo aciloxi o un grupo alquilo, o juntos forman un grupo carbonilo;

R3 y R4 representan, cada uno independientemente, un átomo de hidrógeno, un grupo hidroxilo, un grupo alcoxi, un grupo aciloxi o un grupo alquilo, o juntos forman un grupo carbonilo;

R5 y R6 representan, cada uno independientemente, un átomo de hidrógeno, un grupo hidroxilo, un grupo alcoxi, un grupo aciloxi o un grupo alquilo;

R7 representa un grupo alquilo o un grupo amida;

R8 y R9 representan, cada uno independientemente, un átomo de hidrógeno, un grupo alquilamino, un grupo de azúcar o un grupo acilo;

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo,

por "grupo alquilo" se quiere decir un grupo de hidrocarburo saturado cíclico o acíclico, de cadena lineal o ramificado, que contiene hasta 2 átomos de carbono, que puede estar no sustituido o sustituido con un sustituyente seleccionado de los grupos hidroxi, alcoxi, aciloxi y amino y que puede estar interrumpido con uno o más grupos seleccionados de -arilo-, -O-, -NR12- y -S-, en el que R12 representa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo de Ci^;

por "grupo alcoxi" se quiere decir un grupo -OR, en el que R es un grupo alquilo como se define aquí antes;

por "grupo aciloxi" se quiere decir un grupo -OCOR14, en el que R14 es un grupo alquilo como se define aquí antes;

por "grupo alquilamino" se quiere decir un grupo -(CH2)XNR16R17 en el que x es 1 a 1 y R16 y R17 representan, cada uno independientemente, un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo de C^;

por "grupo de azúcar" se quiere decir un sacárido, preferiblemente un oligo- o monosacárido;

por "grupo acilo" se quiere decir un grupo -COR18 en el que R18 es un grupo alquilo como se define antes;

por "grupo amida" se quiere decir un grupo de fórmula (III):

en la que R1 y R11 representan, cada uno independientemente, un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo opcionalmente sustituido como se define aquí antes, o juntos forman un anillo alquilo.

en la que,

en el que

o

R11 (III)

2. Un compuesto como se reivindica en la reivindicación 1, en el que el grupo amino de micosamina está sustituido con uno o más grupos alquilamino o azúcar.

3. Un compuesto como se reivindica en la reivindicación 1 o en la reivindicación 2, en el que R1 representa un átomo de hidrógeno, un grupo hidroxilo o un grupo alcoxi (por ejemplo un grupo -OCi_6) y R2 es un átomo de hidrógeno, o en el que R1 y R2 forman juntos un grupo carbonilo; y

en el que R3 representa un átomo de hidrógeno, un grupo hidroxilo o un grupo alcoxi (por ejemplo un grupo -OCi^) y R4 es un átomo de hidrógeno, o en el que R3 y R4 forman juntos un grupo carbonilo; y

en el que R5 representa un átomo de hidrógeno, un grupo hidroxilo o un grupo alcoxi (por ejemplo un grupo -OCi^) y R6 es un átomo de hidrógeno.

4. Un compuesto como se reivindica en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que R8 representa un átomo de hidrógeno, un grupo alquilamino, un azúcar o un grupo acilo, y R9 es idéntico a R8 o es un átomo de hidrógeno, por ejemplo R9 es un átomo de hidrógeno, o

en el que R8 es un grupo de azúcar o un grupo alquilamino y R9 es un átomo de hidrógeno.

5. Un compuesto como se reivindica en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que R7 es metilo o una amida de fórmula III

o

,R'°

r" (in)

en la que R1 y R11 representan, cada uno independientemente, un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo de C-mo ramificado o no ramificado, opcionalmente sustituido con grupos hidroxi, aciloxi o amino, y opcionalmente interrumpido con átomos de oxígeno o nitrógeno, o R1 y R11 forman juntos un grupo alquilo de Ci^ cíclico, opcionalmente sustituido con grupos hidroxi, aciloxi o amino, y opcionalmente interrumpido con átomos de oxígeno o nitrógeno.

6. Un compuesto como se reivindica en la reivindicación 5, en el que R7 es metilo, CONH(CH2)nN(CH3)2 o CONH(CH2)nOH en los que n es 2 ó 3.

7. Un compuesto como se reivindica en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en el que R8 es un grupo alquilamino de fórmula -(ChhjxNhh o -(CH2)xN(alquil Ci-6)2 en las que x es 2 a 6, o es un monosacárido seleccionado de glucosa, galactosa, glucopiranosa, manopiranosa, galactopiranosa, fructopiranosa y tagotopiranosa, o es un oligosacárido seleccionado de lactosa, melibiosa, sacarosa, maltosa y celobiosa.

8. Un compuesto como se reivindica en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en el que R7 es alquilo de Ci_6 (por ejemplo metilo) y al menos uno de R8 y R9 (por ejemplo tanto R8 como R9) son átomos de hidrógeno; o

en el que R7 es un grupo amida, preferiblemente un grupo amida de fórmula III como se define aquí antes, y al menos uno de R8 y R9 (por ejemplo tanto R8 como R9) son átomos de hidrógeno.

9. Un compuesto como se reivindica en cualquier reivindicación anterior en forma de una sal de glutamato.

1. Un compuesto como se reivindica en la reivindicación 1, seleccionado de:

(i) compuestos nos 1, 3, 5, 6, 7, 8, 9, 1, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 24, 25, 26, 27, 28, y 29, en los que, en la fórmula I, R1 a R9 son como se definen según la siguiente tabla:

y

(ii) compuestos nos 3, 31,32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 4, 41,42, 43, 44, 45, 46, 48, 49, 5, 51,52, 53, 54, 55, 56, y 57, de la fórmula

en la que R7 a R9 son como se definen según la siguiente tabla:

11. Un compuesto como se reivindica en la reivindicación 1, seleccionado de los compuestos n®51,9, 1,1, 12, 13, 14, 15, 16, 28, 29, 41,48 y 51.

12. Un compuesto como se reivindica en la reivindicación 1, de fórmula:

OH

o una sal de glutamato del mismo.

13. Un procedimiento para obtener compuestos como se reivindican en cualquier reivindicación anterior, que comprende:

(i) modificar un agrupamiento génico que codifica el sistema de policétido sintasa responsable de la síntesis

de nistatina, para producir un derivado de nistatina que tiene un doble enlace entre C28 y C29; y

(ii) modificar adicionalmente dicho agrupamiento génico para producir un derivado de nistatina que está modificado en C16 y opcionalmente una o más de las posiciones C5, C9, C1, o en el grupo amino de micosamina,

o

(iii) modificar el derivado resultante en C16 y opcionalmente una o más de las posiciones C5, C9, C1, o en el

grupo amino de micosamina mediante una reacción química.

14. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto como se reivindica en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, y un vehículo, diluyente o excipiente.

15. Un compuesto como se reivindica en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, para uso en terapia.

16. Un compuesto como se reivindica en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, para uso en el tratamiento de

infecciones fúngicas.