Utilización de ésteres de alquilglucósido como inductores de beta-defensinas.

Ésteres de alquilglucósido como principios activos que provocan un reequilibrado de la flora comensal de la piel yde las mucosas y/o una disminución de la adhesión de los microorganismos patógenos sobre el tejido epitelial porinducción de la expresión de péptidos antimicrobianos endógenos,

para su utilización en una composición tópicadermatológica o dermocosmetológica destinada al tratamiento preventivo o curativo de las afecciones microbianas.

Utilización de ésteres de alquilglucósido como inductores de beta-defensinas.

La presente invención se refiere a unos ésteres de alquilglucósido como principios activos que provocan un reequilibrio de la flora comensal de la piel y de las mucosas y/o una disminución de la adhesión de los microorganismos patógenos sobre el tejido epitelial por inducción de la expresión de péptidos antimicrobianos endógenos, para su utilización en una composición tópica dermatológica o dermocosmetológica destinada al tratamiento preventivo o curativo de las afecciones microbianas.

En el marco de la presente invención, los productos a base de "mono- o di-éster de alquilo de a, r-butilglucósido" se utilizan para desencadenar una reacción inmune en un organismo hospedante por generación in vivo de péptidos antimicrobianos endógenos, de la familia de las r-defensinas (hBD-2, hBD-3) y de las catelicidinas (LL-37) , protectores frente a infecciones por microorganismos vivos tales como los virus encapsulados, las bacterias o los parásitos, que conducen así a la eliminación selectiva del o de los agentes patógenos. Estos productos no estimulan, de manera concomitante o separada, unas reacciones inflamatorias, una irritación o una intolerancia.

Estos productos pueden ser utilizados a título preventivo (tratamiento profiláctico) o curativo (tratamiento terapéutico) durante infecciones de los tejidos epiteliales cutáneos y córneos, de las mucosas gingivales y vaginales, con el fin de reequilibrar la microflora y favorecer la homeostasis epitelial durante fenómenos infecciosos durante los cuales se alteran los procesos de cicatrización.

La utilización de ésteres de alquilglucósido según la presente invención está más particularmente destinada a la preparación de una composición tópica dermatológica o dermo-cosmetológica destinada al tratamiento de la dermatitis atópica, destinada a favorecer la homeostasis epitelial para el tratamiento de afecciones oftálmicas, para el tratamiento de afecciones gingivales o también para favorecer la homeostasis epitelial en el tratamiento de afecciones vaginales.

Se conocen unas composiciones dermatológicas que comprenden un polisacárido y un sacárido de bajo peso molecular que actúan en sinergia, para tratar las dermatosis de contacto (US no 5.837.266 y US no 5.888.520) .

Las interfaces epiteliales de los vertebrados superiores tienen una importancia estratégica evidente, ya que se trata del sitio de primer contacto de un organismo con el entorno microbiano antigénico. Los epitelios escamosos estratificados funcionan como "barrera" frente a los traumatismos mecánicos, a la pérdida de piel y a las infecciones microbianas. Para comprender esta función, sólo se pueden aislar estos epitelios de su entorno físico, tal como la estanqueidad conferida por los sistemas de adhesión inter-celulares (Presland & Dale, 2000) , pero también químico o microbiano.

Así, el epitelio desempeña paralelamente un papel activo en las defensas inmunitarias del hospedante, activadas durante las agresiones exógenas y en particular en la inmunidad innata o natural, que constituye una primera línea de defensa, caracterizada por una respuesta inmediata y no específica. Uno de los mecanismos es la inducción por las células epiteliales de órganos tales como la piel, los bronquios, los intestinos, las vías urinarias, el ojo, el aparato genital, de compuestos antimicrobianos de naturaleza peptídica (véase Koczulla y Bals, 2003; Yang D., et al. 2004) . Estos péptidos producidos por las células epiteliales funcionarían en una cierta medida manteniendo la flora natural de los microorganismos en un estado de equilibrio apropiado a cada nicho ecológico. La microflora comensal desempeña en efecto un papel importante en este entorno, limitando la colonización por gérmenes patógenos y estimulando las defensas naturales inmunitarias.

Están repartidos en cuatro grupos en base a su tamaño, su secuencia en aminoácidos y su estructura (Koczulla & Bals, 2003) . Entre estos grupos:

la familia de las defensinas es objeto de investigaciones importantes desde finales de los años 90 (véanse Gantz, 1999; Huttner & Bevins, 1999) . Todas las defensinas son unos péptidos policatiónicos ricos en aminoácidos básicos, que forman tres puentes disulfuros a partir de sus seis residuos de cisteína que conducen a una estructura en triple hoja beta. En base a la alineación de estos puentes disulfuros, se han definido dos clases de defensinas, las a y r-defensinas (Koczulla & Bals, 2003) . Principalmente, se han puesto en evidencia cuatro r-defensinas, o bien después del aislamiento a partir de los epitelios, HBD-1 y 2 (Weinberg et al., 1998) o mediante cribado biomolecular, HBD-3 y 4 (Koczulla & Bals, 2003) .

la familia de las catelicidinas constituye otro gran grupo de péptidos antimicrobianos encontrado en numerosos mamíferos. Se ha puesto en evidencia un sólo péptido de esta familia en el ser humano, hCAP18/LL-37 (Zanetti et al., 2004) . Su expresión se ha encontrado en varios tejidos epiteliales y en particular en los queratinocitos durante patologías cutáneas de tipo inflamatorio (Frohm et al., 1997) , pero también en diversas células inmunitarias (monocitos, células NK y linfocitos B) (Yang et al., 2004) . Este péptido está compuesto al principio por un péptido señal en el extremo NH2-terminal (pre-región) , por una región conservada, el dominio tipo catelina (pro-región) y por el dominio antimicrobiano en COOH terminal LL

37. La catelicidina se almacena en los gránulos de los neutrófilos en forma inactiva Catelina/LL-37 y después es escindida por la elastasa o la proteinasa 3 para liberar LL-37 (Koczulla & Bals, 2003) .

En la mayoría de los epitelios, el péptido HBD-1 está expresado constitutivamente mientras que HBD-2, HBD-3 y LL37 son inducibles por los estímulos pro-inflamatorios como el TNF-a o la IL1-r, los estímulos infecciosos y el nivel de diferenciación de los queratinocitos cutáneos (Liu et al., 2002; Frohm et al., 1997) . Los receptores o PRR (Gordon, 2000) utilizados para esta inducción, encontrados más frecuentemente son los receptores de la inmunidad innata y en particular los receptores Toll Like o TLR (TLR2 y TLR4) y CD14 (Chung y Dale, 2004) , pero también PAR-2 (Protease activated receptor) (Chung et al., 2004) que implican la activación de las vías de señalización (NF) -KB o AP-1.

Las r-defensinas y LL-37 presentan un amplio espectro antimicrobiano: bacterias, hongos y parásitos. Su función microbicida se basa en su estructura anfipática, que permite su asociación con la superficie membranaria microbiana, su agregación y finalmente la formación de poros (Gallo RL & Huttner KM., 1998; Zaiou et al., 2003) . HBD-2 ejerce una acción bactericida sobre las cepas de gram negativo, pero generalmente restringida a una acción bacteriostática sobre las cepas de gram positivo. De forma complementaria, el péptido HBD-3 tiene una fuerte actividad microbicida que incluye las bacterias de tipo gram negativo, pero también gram positivo tal como Staphylococcus aureus (S. aureus) (Schibli et al., 2002) . LL-37 presenta no sólo una amplia actividad microbicida dirigida contra las bacterias de gram negativo y positivo (Zaiou et al., 2003) , sino también unos efectos antimicrobianos sinérgicos con el de las r-defensinas, en particular HBD-2 que lo vuelven bactericida frente a S. aureus (Ong et al., 2002) .

Además de esta actividad antimicrobiana directa, las r-defensinas y la catelidicina LL-37 epiteliales son capaces, a concentraciones sub-micromolares, de ejercer un cierto número de otras actividades de señalización que conducen a la iniciación de las defensas inmunes adaptativas y así servir de unión entre la inmunidad innata y adaptativa (véase Yang D., 2002 y 2004) . Así, las r-defensinas HBD-2 y -3 son capaces de emitir una señal quimiotáctica que permitirá el reclutamiento de las células dendríticas inmaduras y de los linfocitos T de memoria, sobre el sitio de la infección por medio del receptor específico CCR6 (Yang D. et al., 1999; véase Yang D. et al., 2004) . Por otra parte, se ha demostrado que HBD-2 podía inducir la maduración de estos linfocitos por medio de un receptor Toll-like TKR4 llevado por las células dendríticas (Biragyn A. et al., 2002) . Por su parte, LL-37 posee unas propiedades importantes de señalización, como el quimiotactismo de las células inmunitarias, a concentraciones del orden del nanomolar. Este péptido contribuye así al reclutamiento de neutrófilos, de mastocitos, de monocitos y de macrófagos por medio del Human Formyl Peptide Receptor Like-1 (FPRL-1) (Scott et al., 2002) . (Véase Yang D. et al., 2004) .

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1. Ésteres de alquilglucósido como principios activos que provocan un reequilibrado de la flora comensal de la piel y de las mucosas y/o una disminución de la adhesión de los microorganismos patógenos sobre el tejido epitelial por

inducción de la expresión de péptidos antimicrobianos endógenos, para su utilización en una composición tópica dermatológica o dermocosmetológica destinada al tratamiento preventivo o curativo de las afecciones microbianas.

2. Ésteres según la reivindicación 1, caracterizados porque los péptidos antimicrobianos endógenos pertenecen a la familia de las r-defensinas y de las catelicidinas. 10

3. Ésteres según una de las reivindicaciones 1 o 2, caracterizados porque los péptidos antimicrobianos endógenos de la familia de las r-defensinas son entonces HBD-2 y HBD-3.

4. Ésteres según una de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizados porque el péptido antimicrobiano endógeno de la 15 familia de las catelicidinas es el LL-37.

5. Ésteres según una de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizados porque la composición tópica está destinada a favorecer la homeostasis epitelial para el tratamiento de la dermatitis atópica.

6. Ésteres según una de las reivindicaciones 1 a 5, caracterizados porque la composición está destinada a favorecer la homeostasis epitelial para el tratamiento de afecciones oftálmicas.

7. Ésteres según una de las reivindicaciones 1 a 6, caracterizados porque la composición está destinada a favorecer la homeostasis epitelial para el tratamiento de afecciones gingivales. 25

8. Ésteres según una de las reivindicaciones 1 a 7, caracterizados porque la composición está destinada a favorecer la homeostasis epitelial en el tratamiento de afecciones vaginales.

9. Ésteres según una de las reivindicaciones 1 a 8, caracterizados porque el éster de alquilglucósido es un mono- o 30 di-éster de alquilo de C8-C20 de alquil C1-C6-glucósido.

10. Ésteres según una de las reivindicaciones 1 a 9, caracterizados porque el éster de alquilglucósido es un mono- o di-éster de alquilo de C8-C20 de butilglucósido.

11. Ésteres según una de las reivindicaciones 1 a 10, caracterizados porque el éster de alquilglucósido es un mono

o di-caprilato, -caprato, -laurato, -palmitato, -miristato, -estearato, -cocoato de a-butilglucósido.

12. Ésteres según una de las reivindicaciones 1 a 11, caracterizados porque el éster de alquilglucósido es el laurato de a-butilglucósido, preferentemente diluido en el palmitato de octilo. 40

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