Un método para tratar un tumor maligno en un sujeto y composición farmacéutica para uso en el mismo.

Una composición para su uso en el tratamiento de una afección asociada con la presencia de células anómalasque expresan la molécula de adhesión celular ICAM-1,

comprendiendo la composición un virus que es un miembrode la familia Picornaviridae, que reconoce a ICAM-1 para infectividad de una célula anómala y que puede infectar ydestruir al menos alguna de dichas células, en el que las células anómalas son células cancerosas.

Un método para tratar un tumor maligno en un sujeto y composición farmacéutica para uso en el mismo Campo De La Invención La presente invención se refiere a la destrucción de células anómalas utilizando un virus. También se describe un método de exploración de células para determinar si son susceptibles al tratamiento con el virus, así como composiciones farmacéuticas que incorporan el virus. La invención tiene uso veterinario así como una amplia aplicación en el campo médico humano.

Antecedentes De La Invención El melanoma es una causa principal de morbilidad en la población humana. Australia tiene la tasa más alta de melanoma en el mundo. El melanoma es un cáncer de piel agresivo y es el tercer cáncer más común en Australia en hombres y mujeres. Se ha predicho que uno de cada treinta australianos tendrá una forma de melanoma, que da como resultado la muerte de más de mil personas al año solamente en ese país. Cuando se detecta de forma temprana, la mayoría de las formas de melanoma pueden tratarse eficazmente. Sin embargo, el control de formas más avanzadas tiene menos éxito y es un área de intensa investigación. Un objetivo principal en esta área de investigación es la identificación de moléculas que se expresan de forma diferencial en tumores melanocíticos benignos y malignos que pueden usarse para diagnóstico y como dianas para terapias anti-cáncer (Kageshita T. et al; 1993) .

La molécula de adhesión intercelular 1 (ICAM-1) , una molécula crucial en interacciones celulares inflamatorias, es un antígeno de avance del melanoma aceptado. La expresión en superficie de ICAM-1 en melanomas se ha correlacionado en gran medida con el avance de melanoma maligno (Kraus A. et al; 1997 y Morandini R. et al; 1998) .

La molécula ICAM-1 es un miembro de la superfamilia de la inmunoglobulina (Ig) y un contra-receptor para el antígeno 1 de función de integrina leucocitaria (LFA-1/CD11a) y Mac- (CD11b) y es una molécula de unión celular para el 90% de los rinovirus humanos (Stuanton D.E., et al; 1989) . Además, ICAM-1 juega un importante papel en la patogénesis no solamente de infección por rinovirus, sino también en infección por Plasmodium falciparum y en las exacerbaciones de asma, bronquitis crónica y fibrosis quística. Recientemente, se han presentado proteínas reguladoras del complemento que se regulan positivamente en la superficie de melanomas malignos, en particular el

factor acelerador de la degradación conocido como DAF (Cheung NK et al; 1998) .

Los virus capaces de inducir lisis de células malignas a través de su proceso de replicación se conocen como virus oncolíticos y se han realizado ensayos que usan virus oncolíticos para tratar tumores malignos (Nemunaitis J; 1999) . La mayoría de los virus oncolíticos requieren proliferación en la misma especie o linaje celular. La infección de una célula por un virus implica la unión y captación dentro de la célula lo que conduce a o coincide con la retirada de la cápsida viral y la posterior replicación dentro de la célula (Fenner F., et al. The Biology of Animal Viruses. Academic Press. Nueva York, 1974 Segunda Ed.)

Los virus oncolíticos de los que se evaluó la capacidad de destruir células cancerosas incluían el subtipo Egipto 101

de adenovirus que mostraba actividad oncolítica en la línea celular de cáncer uterino/de cuello del útero HeLa, virus de las paperas para el tratamiento de carcinoma gástrico, carcinoma uterino y carcinoma cutáneo, virus de la enfermedad de Newcastle (NDV) , virus de la gripe para el tratamiento del cáncer de ovario y adenovirus para el tratamiento de, por ejemplo, carcinoma cervicouterino (Nemunaitis J; 1999) . Otros informes indicaban que adenovirus y poliovirus recombinantes atenuados pueden encontrar uso en el tratamiento de células de glioma maligno (Alemany R., et al 1999; Andreansky S.S., 1996) y que los reovirus muestran capacidad lítica en células de glioblastoma U87 humano y células NIH-3T3 con una ruta de señalización Ras activada (Coffey M.C. et al., 1998; Strong J.E. et al, 1998) .

Además, se ha usado un oncolisado de vaccinia en ensayos clínicos para tratar pacientes de melanoma (Fase II)

(Nemunaitis J., 1999) . También se han presentado virus Herpes simplex (HSV) modificados, no neurovirulentos, como prometedores para el tratamiento de tumores cerebrales incluyendo melanoma intracraneal y melanoma subcutáneo humano (Randazzo B.R., 1997) , mientras que se ha informado de que la infección con adenovirus potencia la destrucción de células de melanoma por la mitotoxina vegetal saporina (Satyamoorthy K., 1997) .

El receptor en células diana reconocidas por adenovirus difiere para diferentes tipos de adenovirus. Esto es, los subgrupos de adenovirus A, C, D, E y F, por ejemplo, reconocen al receptor CAR mientras que el tipo 5 de adenovirus (sub-grupo C) , tipo 2 de adenovirus (sub-grupo C) y tipo 9 de adenovirus (sub-grupo D) reconocen a la molécula principal de histocompatibilidad de clase II, integrinas !m∀2y !v, respectivamente. Se sabe que el receptor CAR se expresa en líneas celulares de melanoma (Hemmi S., et al, 1998) : El heparán sulfato es reconocido por los 65 tipos 1 y 2 de herpes simplex y el herpesvirus humano 7, virus adeno-asociado de tipo 2. El receptor para el herpesvirus humano 7 es CD4 mientras que el virus de Epstein-Barr reconoce al receptor del complemento Cr2

(CD21) . Los poliovirus de tipo 1 y 2 reconocen al receptor de poliovirus (Pvr) para la adhesión celular mientras que el reovirus reconoce ácido siálico. Los virus de la gripe A y B reconocen al ácido siálico, ácido N-acetil neuramínico para adhesión celular. Por el contrario, el virus de la gripe de tipo C reconoce el ácido siálico, ácido 9-O-acetil neuramínico. El virus Vaccinia reconoce al receptor del factor de crecimiento epidérmico y al heparán sulfato. Los coxsackievirus A13, A15, A18 y A21 reconocen a ICAM-1 y a la proteína reguladora del complemento DAF (CD55) (véase, por ejemplo, el documento, Shafren D.R., et al 1997) . La DAF también es reconocida por el enterovirus 70. Véase, por ejemplo, el documento Flint SJ, et al (2000) Principles of Virology: molecular biology, pathogenesis and control. ASM Press, Washington.

La extensión metastática tumoral es un proceso patológico asociado con una serie de eventos de adhesión/desadhesión acoplados con degradación tisular regulada. Se sabe que la adhesión a y la migración a través de la matriz extracelular es esencial para la invasión tumoral. La familia más grande de moléculas de adhesión extracelular es la familia de la integrina (Marshall J.F. y Hart I.R., 1996) y miembros del grupo !v∀ de integrinas han demostrado expresarse en diversos tipos celulares. Por ejemplo, !v∀1 se expresa en células de neuroblastoma, melanoma y

osteosarcoma, !v∀3 se expresa en células de melanoma, glioblastoma y carcinoma renal y !v∀5 se expresa en células de melanoma al igual que !v∀8 (Marshall J.F. y Hart I.R., 1996) .

A pesar del avance realizado en el tratamiento de tumores malignos, el tratamiento del cáncer incluyendo melanoma plantea un gran desafío para la investigación y sigue existiendo la necesidad de alternativas a los enfoques de terapia existentes.

Sumario De La Invención La presente invención es el resultado del sorprendente descubrimiento de que puede conseguirse una destrucción significativa de células anómalas con el uso de un virus y reconocimiento/interacción de los marcadores expresados por la célula utilizados por el virus para la infectividad de las células.

En un aspecto se proporciona una composición para su uso en el tratamiento de una afección asociada con la presencia de células anómalas que expresan la molécula de adhesión celular ICAM-1, comprendiendo la composición un virus que es un miembro de la familia Picornaviridae, que reconoce ICAM-1 para infectividad de una célula anómala y que puede infectar y destruir al menos algunas de dichas células, donde las células anómalas son células cancerosas.

Para los fines de la presente invención, la expresión “células anómalas” debe considerarse en su sentido más amplio para incluir células malignas, las células de cualquier crecimiento anómalo y cualquier célula que tenga expresión regulada positivamente de al menos una de las moléculas de adhesión celular y la proteína reguladora del complemento relativa a células normales correspondientes del mismo tipo celular que expresan su fenotipo normal, en el que las células son células cancerosas o no y en el que las células proliferan a una velocidad anómala o no. Por consiguiente, la expresión incluye células preneoplásicas y neoplásicas... [Seguir leyendo]

1. Una composición para su uso en el tratamiento de una afección asociada con la presencia de células anómalas que expresan la molécula de adhesión celular ICAM-1, comprendiendo la composición un virus que es un miembro de la familia Picornaviridae, que reconoce a ICAM-1 para infectividad de una célula anómala y que puede infectar y destruir al menos alguna de dichas células, en el que las células anómalas son células cancerosas.

2. Una composición para su uso en el tratamiento de una afección asociada con la presencia de células anómalas que expresan la molécula de adhesión celular ICAM-1 de acuerdo con la reivindicación 1, en la que la expresión de ICAM-1 está regulada positivamente en las células anómalas con respecto a dichas células no malignas que expresan su fenotipo normal.

3. Una composición para su uso en el tratamiento de una afección asociada con la presencia de células anómalas que expresan la molécula de adhesión celular ICAM-1 de acuerdo con la reivindicación 1 o 2, en la que las células anómalas son células de cáncer de próstata, células de cáncer de mama, células de carcinoma gástrico, células de cáncer colorrectal, células de cáncer de glioma o células de cáncer de piel.

4. Una composición para su uso en el tratamiento de una afección asociada con la presencia de células anómalas que expresan la molécula de adhesión celular ICAM-1 de acuerdo con la reivindicación 1, en la que las células 20 anómalas son células de melanoma.

5. Una composición para su uso en el tratamiento de una afección asociada con la presencia de células anómalas que expresan la molécula de adhesión celular ICAM-1 de acuerdo con la reivindicación 1, en la que las células anómalas son células de cáncer de próstata.

6. Una composición para su uso en el tratamiento de una afección asociada con la presencia de células anómalas que expresan la molécula de adhesión celular ICAM-1 de acuerdo con la reivindicación 1, en la que las células anómalas son células de cáncer de mama.

7. Una composición para su uso en el tratamiento de una afección asociada con la presencia de células anómalas que expresan la molécula de adhesión celular ICAM-1 de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-6, en la que el virus reconoce a ICAM-1 y a la proteína reguladora del complemento DAF.

8. Una composición para su uso en el tratamiento de una afección asociada con la presencia de células anómalas que expresan la molécula de adhesión celular ICAM-1 de acuerdo con la reivindicación 7, en la que las células anómalas son células de melanoma y expresan ICAM-1 y DAF.

9. Una composición para su uso en el tratamiento de una afección asociada con la presencia de células anómalas que expresan la molécula de adhesión celular ICAM-1 de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-8, en la que el virus está en forma modificada, consistiendo la modificación en emplear moléculas de adhesión celular adicionales como receptores celulares o en producir un virus para reconocer una selectina.

10. Una composición para su uso en el tratamiento de una afección asociada con la presencia de células anómalas que expresan la molécula de adhesión celular ICAM-1 de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, para 45 la administración por vía intravenosa, intratumoral, intraperitoneal, intramuscular o por aplicación tópica.