Métodos y composiciones para tratar y prevenir enfermedad asociada con integrina alfa V beta 5.

Un anticuerpo producido por el hibridoma depositado con el Nº de depósito de ATCC PTA-5817.

Métodos y composiciones para tratar y prevenir enfermedad asociada con integrina alfa V beta 5

Antecedentes de la invención El edema pulmonar (“PE”) afecta a millones de personas cada año, provocando morbilidad y mortalidad sustancial. En pacientes con PE, los alvéolos se llenan de líquido de los capilares pulmonares lo que deteriora la transferencia de oxígeno a la circulación sistémica (Hall, et al. en CURRENT THERAPY IN RESPIRATORY MEDICINE (R. Chemiack, Ed., 1986) , páginas 222-227) . Esta secuencia de acontecimientos da como resultado hipoxemia, hipercapnia y muerte si no se toman medidas correctivas.

Cualquier afección o agente que altere la homeostasis de líquidos en los pulmones puede dar como resultado PE, que puede dividirse en general en PE cardiogénica y no cardiogénica (véase, por ejemplo, Kakouros y Kakouros, 15 Hellenic J. Cardiol. 44:385-391 (2003) ) . Por ejemplo, el síndrome de dificultad respiratoria (aguda) del adulto/lesión pulmonar aguda o “SDRA”, que puede desarrollarse como resultado de lesión pulmonar debido a, por ejemplo, neumonía, choque séptico, traumatismo, aspiración de vómito o inhalación química, se asocia con frecuencia con PE no cardiogénico. El PE no cardiogénico se caracteriza por un cambio en la permeabilidad vascular del tejido pulmonar que conduce a un aumento de los niveles de fluido en los pulmones. El PE cardiogénico se provoca con frecuencia por insuficiencia cardiaca del lado izquierdo y puede ser una complicación de un ataque cardiaco, filtración o válvulas cardiacas estrechadas (válvulas mitrales o aórticas) , o cualquier enfermedad del corazón que da como resultado debilitamiento y/o agarrotamiento del músculo cardiaco (cardiomiopatía) . El corazón con insuficiencia transmite su presión aumentada a las venas pulmonares. A medida que aumenta la presión en las venas pulmonares, el fluido se impulsa hacia los espacios aéreos (alvéolos) . Este fluido se convierte después en una barrera al intercambio de oxígeno normal, dando como resultado apnea. El PE cardiogénico se caracteriza por presión hidrostática capilar aumentada que conduce a un aumento de los niveles de fluido en los pulmones.

El PE está provocado, por ejemplo, por permeabilidad capilar alterada; infección; toxinas inhaladas o en circulación; sustancias vasoactivas (por ejemplo, histamina, quininas) ; coagulación intravascular diseminada; reacciones inmunológicas; neumonía asociada con radiación; uremia; casi ahogamiento; inhalación de humo; y síndrome de dificultad respiratoria aguda; insuficiencia ventricular izquierda; estenosis mitral, endocarditis bacteriana; fibrosis venosa pulmonar; estenosis congénita del origen de las venas pulmonares, enfermedad venooclusiva pulmonar; sobreinfusión de fluidos; hipoalbuminemia (por ejemplo, de enteropatía renal, hepática, nutricional o de pérdida de proteínas) ; alta altitud; sobredosis de fármacos, traumatismo del SNC, hemorragia subaracnoidea, embolia pulmonar, enfermedad parenquimal pulmonar, eclampsia, anestesia y operaciones de derivación cardiopulmonar.

Los síntomas de EP pueden incluir, por ejemplo, apnea, respiración rápida y/o trabajosa, taquicardia, hipertensión, presión en el pecho, extremidades frías acompañado o no de cianosis, tos con esputo espumoso o rosado, uso extensivo de músculos de respiración accesorios, crepitaciones húmedas con o sin sibilancia y combinaciones de los mismos. Los ensayos para diagnosticar PE incluyen análisis de sangre tales como recuento sanguíneo completo (CBC) , nitrógeno de urea en sangre (BUN) , creatinina y proteína en suero. Se usan análisis de orina, gases sanguíneos arteriales (ABG) , rayos x del pecho y electrocardiograma (ECG) todos para ayudar al médico a restringir el diagnóstico a PE.

El tratamiento de PE cardiogénico implica típicamente colocar el paciente con 100% de oxígeno, morfina para calmar la ansiedad y proporcionar algunos efectos cardiacos beneficiosos, furosemida para diuresis, vasodilatadores para reducir el trabajo frente al que el miocardio debe bombear, y fármacos inotrópicos tales como doputamina para aumentar la contractilidad cardiaca. Otras medidas que se han usado son torniquetes rotatorios en tres de las cuatro extremidades y reducir el volumen sanguíneo en 500 ml.

Desafortunadamente, no está disponible ningún tratamiento específico o satisfactoriamente eficaz para PE. Por lo tanto, existe la necesidad en la técnica de terapias más eficaces y específicas para PE. La presente invención aborda éste y otros problemas.

Breve sumario de la invención La presente invención proporciona anticuerpos y composiciones para tratar o prevenir edema pulmonar o lesión pulmonar aguda.

La presente invención proporciona un anticuerpo producido por el hibridoma depositado con el Nº de depósito de ATCC PTA-5817. La invención también proporciona un anticuerpo que se une específicamente a una integrina !v∀5 y es una forma humanizada del anticuerpo producido por el hibridoma depositado con el Nº de depósito de ATCC PTA-5817. La invención también proporciona un anticuerpo humanizado que se une específicamente a integrina !v∀5 y comprende las CDR de cadena pesada y ligera de un anticuerpo producido por el hibridoma depositado con 65 el Nº de depósito de ATCC PTA-5817.

La invención también proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden dichos anticuerpos y un excipiente farmacéuticamente aceptable.

La invención también proporciona dichos anticuerpos para su uso en el tratamiento o prevención de edema pulmonar. La invención proporciona además dichos anticuerpos para su uso en el tratamiento o prevención de lesión pulmonar aguda. Los anticuerpos pueden usarse con un segundo agente terapéutico para tratar edema pulmonar o lesión pulmonar aguda. El segundo agente terapéutico puede seleccionarse del grupo que consiste en: un inhibidor de ruta de TGF∀, proteína C activada, un esteroide, GM-CSF, un inhibidor de plaquetas, un agente diurético; un agente broncodilatador, un anticuerpo que se une a integrina !v∀5, un anticuerpo que se une a ∀5, un segundo antagonista de integrina !v∀5, un antagonista de integrinas !v∀5, un agonista de ∀2 o un tensioactivo. Los anticuerpos pueden administrarse por vía intravenosa, vía intranasal o vía intrabronquial. El sujeto tratado es un sujeto mamífero, por ejemplo, un primate tal como un ser humano, un mono o un chimpancé, un canino o un felino.

La invención también proporciona uso de los anticuerpos de la invención para la fabricación de un medicamento para tratar edema pulmonar. La invención proporciona además el uso de los anticuerpos para la fabricación de un medicamento para tratar lesión pulmonar aguda.

La invención también proporciona kits para tratar o prevenir PE. Los kits comprenden los anticuerpos descritos anteriormente y un segundo agente terapéutico para tratar o prevenir PE. El segundo agente terapéutico puede seleccionarse del grupo que consiste en: un inhibidor de ruta de TGF∀, proteína C activada, un esteroide, GM-CSF, un inhibidor de plaquetas, un agente diurético, un agente broncodilatador, un anticuerpo que se une a integrina !v∀5, un anticuerpo que se une a ∀5, un segundo antagonista de integrina !v∀5, un antagonista de integrina !v∀6, un agonista de ∀2, o un agente tensioactivo.

La invención también proporciona un hibridoma depositado con el Nº de depósito de ATCC PTA-5817.

Estas y otras realizaciones de la invención se ilustran adicionalmente por la descripción detallada a continuación.

Breve descripción de los dibujos La Figura 1 ilustra los resultados de experimentos in vivo que demuestran que los ratones ∀5-/-están protegidos de PE inducido por lesión pulmonar.

La Figura 2 ilustra los resultados de experimentos in vivo que demuestran que un anticuerpo que se une 35 específicamente a ∀5 (es decir, ALULA) reduce la gravedad de PE inducido por reperfusión por isquemia.

La Figura 3 ilustra los resultados de experimentos in vivo que demuestran que un anticuerpo que se une específicamente a ∀5 (es decir, ALULA) reduce la gravedad de inducido por lesión pulmonar de ventilación de volumen corriente grande.

La Figura 4 ilustra los resultados de experimentos in vitro que demuestran que un anticuerpo que se une específicamente a ∀5 (es decir, ALULA) bloquea la adhesión de células que expresan integrina !v∀5 a placas recubiertas con un intervalo de concentraciones del ligando de integrina !v∀5, vitronectina.

Descripción detallada de la invención Introducción La presente invención se basa... [Seguir leyendo]

1. Un anticuerpo producido por el hibridoma depositado con el Nº de depósito de ATCC PTA-5817.

2. Un anticuerpo que se une específicamente a integrina !v∀5, donde el anticuerpo es una forma humanizada del anticuerpo producido por el hibridoma depositado con el Nº de depósito de ATCC PTA-5817.

3. Un anticuerpo humanizado que se une específicamente a integrina !v∀5, que comprende las regiones determinantes de complementariedad de cadena pesada y ligera de un anticuerpo producido por el hibridoma 10 depositado con el Nº de depósito de ATCC PTA-5817.

4. El anticuerpo de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, donde el anticuerpo se selecciona del grupo que consiste en un scFv, un Fab y un (Fab’) 2.

5. Una composición farmacéutica que comprende un excipiente farmacéuticamente aceptable y el anticuerpo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4.

6. El anticuerpo de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 para su uso en el tratamiento o prevención de edema pulmonar. 20

7. El anticuerpo de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 para su uso en el tratamiento o prevención de lesión pulmonar aguda.

8. El anticuerpo de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 para el uso de la reivindicación 6, donde el uso 25 comprende además administrar un segundo agente terapéutico para tratar o prevenir edema pulmonar.

9. El anticuerpo de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 para el uso de la reivindicación 7, donde el uso comprende además administrar un segundo agente terapéutico para tratar o prevenir lesión pulmonar aguda.

10. El anticuerpo de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 para el uso de la reivindicación 8 o 9, donde el segundo agente terapéutico se selecciona del grupo que consiste en un inhibidor de ruta de TGF∀, Proteína C activada, un esteroide, GM-SCF, un inhibidor de plaquetas, un agente diurético, un agente broncodilatador, un anticuerpo que se une a integrina !v∀5, un anticuerpo que se une a ∀5, un segundo antagonista de integrina !v∀5, un antagonista de integrina !v∀6, un agonista de ∀-2 y un tensioactivo.

11. El anticuerpo de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 para el uso de una cualquiera de las reivindicaciones 6 a 10, que se administra por vía intravenosa, por vía intranasal o por vía intrabronquial.

12. Uso del anticuerpo de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 para la fabricación de un medicamento para 40 tratar edema pulmonar.

13. Uso del anticuerpo de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 para la fabricación de un medicamento para tratar lesión pulmonar aguda.

14. Un kit para tratar o prevenir edema pulmonar, que comprende el anticuerpo de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 y un segundo agente terapéutico para tratar o prevenir edema pulmonar.

15. El kit de la reivindicación 14, donde el segundo agente terapéutico se selecciona del grupo que consiste en un inhibidor de la ruta de TGF∀, Proteína C activada, un esteroide, GM-SCF, un inhibidor de plaquetas, un agente 50 diurético, un agente broncodilatador, un anticuerpo que se une a integrina !v∀5, un anticuerpo que se une a ∀5, un segundo antagonista de integrina !v∀5, un antagonista de integrina !v∀6, un agonista de ∀-2 y un tensioactivo.

16. Un hibridoma depositado con el Nº de Depósito de ATCC PTA-5817.