Método para el tratamiento de enfermedades oncológicas.

ADNasa I humana recombinante para utilizar en el tratamiento de un paciente que tiene cáncer,

en la que dichaADNasa se administra por vía parenteral a la circulación sanguínea sistémica de manera diaria a 0,15-500 mg/kgdurante un periodo de 5-360 días.

Método para el tratamiento de enfermedades oncológicas Sector técnico La presente invención está relacionada con la medicina y la veterinaria y se puede utilizar para el tratamiento, en general, de tumores sólidos. Se refiere a la utilización de ADNasa humana recombinante en el tratamiento de un paciente que tiene cáncer.

Técnica anterior

Las poblaciones de células tumorales, que se desarrollan en el cuerpo del paciente, presentan una variabilidad genética muy elevada que supera a la de las células sanas. La variabilidad genética de las poblaciones de células cancerosas permite la generación de fenotipos, que son insensibles para el control inmunológico y morfogenético y que presentan la capacidad de invasión y metástasis y son insensibles a la terapia para el cáncer. Se considera que la selección y expansión clonal de células cancerosas son la base de la “progresión” biológica y clínica de los tumores. Esta es la razón por la que la estrategia de la terapia moderna del cáncer se basa en el principio de destruir clones de células cancerosas en el cuerpo del paciente con quimioterapia, radioterapia, inmunoterapia, bioterapia, métodos quirúrgicos y la combinación de los mismos.

La quimioterapia, radioterapia, bioterapia y, de manera más reciente, la inmunoterapia son los métodos no quirúrgicos más utilizados en el tratamiento de las enfermedades cancerosas y están dirigidos a la destrucción, daño o desactivación del ADN intracelular de células cancerosas.

La estrategia con quimioterapia se basa en compuestos conocidos: para preparaciones de platino véase "Molecular mechanisms involved in cisplatin cytotoxicity" (“Mecanismos moleculares implicados en la citotoxicidad del cisplatino”) , Jordan P, Carmo-Fonseca M, Cell Mol Life Sci, agosto de 2000, volumen 57: págs. 1229-35, para antibióticos de antraciclina, véase "Daunorubicin and doxorubicin, anthracycline antibiotics, a physicochemical and biological review" (“Daunorrubicina y doxorrubicina, antibióticos de antraciclina, una revisión fisicoquímica y biológica”) , Aubel-Sadron G, Londos-Gagliardi D, Biochimie, mayo de 1984, volumen 66: págs. 333-52, para agentes alquilantes, véase "An overview of cyclophosphamide and ifosfamide pharmacology" (“Resumen de la farmacología de la ciclofosfamida y la ifosfamida”) , y para podofilotoxinas, véase "Podophyllotoxins: current status and recent developments" (Podofilotoxinas: estado actual y desarrollos recientes”) , Damayanthi Y, Lown JW, Curr Med Chem, 5 de junio de 1998: volumen 3, págs. 205-52.

Se han dado a conocer métodos de radioinmunoterapia que permiten irradiar el ADN intracelular de núcleos de células cancerosas por partículas alfa a partir de emisores alfa que se liberan de manera especial en células cancerosas para incrementar el efecto en el ADN intracelular, véase "Targeted alpha therapy: evidence for potential efficacy of alpha-immunoconjugates in the management of micrometastatic cancer" (“Terapia de reconocimiento de alfa: evidencia de la eficacia potencial de inmunoconjugados alfa en el tratamiento de cáncer micrometastásico”) , Allen BJ, Australas Radiol, noviembre de 1999, volumen 43: págs. 480-6.

Existen métodos bioterapéuticos e inmunoterapéuticos, que están dirigidos a la inducción de la apoptosis de células cancerosas, el proceso de la muerte de una célula cancerosa, que empieza con la activación de nucleasas intracelulares con la posterior degradación de ADN intracelular de la célula tumoral, por ejemplo, mediante la administración de construcciones genoterapéuticas, que comprenden genes que inducen la apoptosis, véase "Phase I trial of adenovirus-mediated p53 gene therapy for recurrent glioma: biological and clinical results" (“Prueba en fase I de la terapia con el gen p53 mediada por adenovirus para glioma recurrente: resultados biológicos y clínicos”) Lang FF, Bruner JM, Fuller GN, Aldape K, Prados MD, Chang S, Berger MS, McDermott MW, Kunwar SM, Junck LR, Chandler W, Zwiebel JA, Kaplan RS, Yung WK, J Clin Oncol, 1 de julio de 2003 21:13 2508-18, o genes que codifican los factores que activan las nucleasas que desencadenan la apoptosis, véase "Adenovirus-mediated transfer of caspase-8 augments cell death in gliomas: implication for gene therapy." (“La transferencia mediada por adenovirus de la caspasa-8 aumenta la muerte celular en gliomas: implicación de la terapia génica”) Shinoura N, Koike H, Furitu T, Hashimoto M, Asai A, Kirino T, Hamada H, Hum Gene Ther, 20 mayo de 2000, 11: 8 1123-37, o mediante vacunas contra el cáncer, véase "Vaccine-induced apoptosis: a novel clinical trial end point?" (“Apoptosis inducida por vacunas: ún nuevo punto final de las pruebas clínicas?”) Amin S, Robins RA, Maxwell-Armstrong CA, Scholefield JH, Durrant LG, Cancer Res, junio de 2000, 60: 3132-6.

Es conocida en la patente de Estados Unidos 6.455.250 la utilización de la endonucleasa Endo SR para el tratamiento de enfermedades del cáncer mediante su administración intracelular en las células diana.

De los métodos indicados anteriormente, se seleccionó como prototipo la quimioterapia con el etopósido 4demetilepipodofilotoxin- (4, 6-O-R) - etiliden) -b-D-glucopiranósido.

La topoisomerasa II es una enzima celular esencial que regula muchos aspectos de la función del ADN. La enzima es responsable de la interconversión de diferentes formas topológicas del ADN intracelular mediante la generación de roturas transitorias de ADN de doble cadena. El etopósido, como inhibidor de la topoisomerasa II, incrementa el nivel intracelular de los complejos “ADN roto-topoisomerasa II”.

El resultado de la influencia de este fármaco es la acumulación de roturas de ADN intracelular de doble cadena que conduce a la muerte celular, véase "Topoisomerase II as a target for anticancer drugs: when enzymes stop being nice" (“Topoisomerasa II como diana para fármacos anticancerígenos: cuando las enzimas dejan de ser buenas”) , Fortune JM, Osheroff N., Prog Nucleic Acid Res Mol Biol 2000, volumen 64: págs. 221-53.

El inconveniente del método prototipo, así como de cualquier otro método conocido, es su eficacia baja. Esto se explica de la siguiente manera. El método prototipo, así como otros métodos conocidos, implican la célula cancerosa y, principalmente, el ADN intracelular como diana terapéutica.

La experiencia de dicha terapia constata que:

- debido a la gran variabilidad genética, las células cancerosas se vuelven, como regla general, insensibles a la terapia antes de ser eliminadas de manera adecuada mediante la utilización del método;

- el ADN intracelular es una diana de estrategia difícil y conduce a la necesidad de una quimioterapia antineoplásica con una dosificación elevada y/o la necesidad de sistemas de liberación complicados (sistemas de liberación de fármacos) . Además, el método prototipo que influye en el ADN intracelular de células cancerosas también daña el ADN de células sanas y esa es la razón de su toxicidad elevada.

Sugihara S. y otros dan a conocer que la introducción sistémica de ADNasa I pancreática bovina (0, 1 unidades Kunitz (KU) por ratón por día) podría ralentizar el desarrollo de metástasis en el hígado. Los autores dan a conocer que el efecto de la ADNasa sola no es satisfactorio y requiere la combinación con la extracción quirúrgica del tumor primario (Sugihara S. y otros, British Journal of Cancer. Nature Publishing Group, London, GB, volumen 67, No. 1, 1 de enero de 1993, páginas 66-70; XP008086562ISSN: 0007-0920) .

Descripción de la invención La solución al objetivo de desarrollar un método muy eficaz y poco tóxico en la terapia contra el cáncer es la base de la presente invención. Según la presente invención, este problema se resuelve mediante la administración en la circulación sistémica de un agente que destruye el ADN extracelular de la sangre; y dicho agente se puede introducir en la dosis que proporciona la alteración del perfil electroforético del ADN extracelular de la sangre, el cual podría detectarse mediante electroforesis en gel en campo de pulsos; el agente se puede introducir en unas dosis y un programa de administración que proporcionan una actividad hidrolítica en el plasma, medida en el plasma sanguíneo, que supera las 150 unidades Kunitz/litro de plasma sanguíneo, y este nivel se puede mantener durante más de 12 horas en 24 horas en total; el tratamiento se puede llevar a cabo de manera continua durante no menos de 48 horas; la enzima ADNasa se puede utilizar como agente para destruir el ADN extracelular de la sangre; mediante lo cual, como agente, se introduce de manera parenteral... [Seguir leyendo]

1. ADNasa I humana recombinante para utilizar en el tratamiento de un paciente que tiene cáncer, en la que dicha ADNasa se administra por vía parenteral a la circulación sanguínea sistémica de manera diaria a 0, 15-500 mg/kg durante un periodo de 5-360 días.