Derivados de HIDROXIALQUILALMIDÓN y procedimientos para su preparación.

Método para la preparación de un derivado de hidroxialquilalmidón,

que comprende

a. hacer reaccionar hidroxialquilalmidón (HAS) de4 fórmula (I)

mediante el átomo de carbono C* del extremo reductor del HAS con el grupo amino M de un compuesto dereticulación según la fórmula (II)

en la que A es un grupo acetal o un grupo cetal; y L es un espaciador que forma un puente entre M y A, enla que C* se oxida opcionalmente antes de la reacción de HAS con M,

obteniéndose un derivado de HAS según la fórmula (III)

en la que X es el grupo funcional que resulta de la reacción del grupo amino M con el HAS mediante elátomo de carbono C* del extremo reductor opcionalmente oxidado del HAS, yen la que HAS' es la parte restante de la molécula de hidroxialquilalmidón, y R1, R2 y R3 sonindependientemente hidrógeno o un grupo hidroxialquilo lineal o ramificado.

Derivados de hidroxialquilalmidón y procedimientos para su preparación La invención se refiere a un método para la preparación de un derivado de hidroxialquilalmidón que comprende hacer reaccionar hidroxialquilalmidón (HAS) mediante el extremo reductor opcionalmente oxidado del HAS con el grupo amino M de un compuesto de reticulación que, aparte del grupo amino, comprende un grupo carbonilo específicamente protegido, concretamente un grupo acetal o un grupo cetal. El método puede comprender además una reacción del derivado de HAS así obtenido con el grupo amino de un compuesto biológicamente activo mediante alquilación, preferiblemente mediante aminación reductora. Además, la invención se refiere a los derivados de HAS que pueden obtenerse mediante el procedimiento de la invención y un derivados de HAS específicos como tales. La invención también se refiere a composiciones farmacéuticas que comprenden los derivados de HAS que contienen el compuesto biológicamente activo, a esos derivados de HAS como agente terapéutico o profiláctico y al uso de derivados de HAS específicos para la preparación de medicamentos.

El hidroxialquilalmidón (HAS) , en particular hidroxietilalmidón (HES) , es un derivado sustituido de polímero de hidrato de carbono que se produce de manera natural, amilopectina, que está presente en almidón de maíz a una concentración de hasta el 95% en peso, y se degrada por alfa-amilasa en el organismo. HES, en particular, muestra propiedades biológicas ventajosas y se usa como agente de reemplazo de volumen sanguíneo y en terapia de hemodilución en las clínicas (Sommermeyer et al., 1987, Krankenhauspharmazie, 8 (8) , 271-278; Weidler et al., 1991, Arzneimittelforschung/Drug Res., 41, 494-498) .

En la técnica se describen algunas maneras de producción de un derivado de hidroxietilalmidón.

El documento DE 26 16 086 da a conocer la conjugación de hemoglobina a hidroxietilalmidón en la que, en una primera etapa, se une un agente de reticulación, por ejemplo bromociano, a hidroxietilalmidón y posteriormente se une hemoglobina al producto intermedio.

Un campo importante en el que se usa HES es la estabilización de polipéptidos que se aplican, por ejemplo, al sistema circulatorio con el fin de obtener un efecto fisiológico particular. Un ejemplo específico de estos polipéptidos es eritropoyetina, una glicoproteína ácida de aproximadamente 34.000 kDa que es esencial en la regulación del nivel de glóbulos rojos en la circulación.

Un problema bien conocido con la aplicación de polipéptidos y enzimas es que con frecuencia estas proteínas muestran una estabilidad insatisfactoria. Especialmente la eritropoyetina tiene una semivida en plasma relativamente corta (Spivak y Hogans, 1989, Blood 73, 90; McMahon et al., 1990, Blood 76, 1718) . Esto significa que se pierden rápidamente los niveles en plasma terapéuticos y deben llevarse a cabo administraciones intravenosas repetidas. Además, en determinadas circunstancias se observa una respuesta inmunitaria frente a los péptidos.

Generalmente se acepta que puede mejorarse la estabilidad de polipéptidos y se reduce la respuesta inmunitaria frente a estos polipéptidos cuando se acoplan los polipéptidos a moléculas poliméricas.

El documento WO 94/28024 da a conocer que polipéptidos fisiológicamente activos modificados con polietilenglicol (PEG) muestran una reducción de la inmunogenicidad y antigenicidad y circulan en el torrente sanguíneo durante considerablemente más tiempo que las proteínas no conjugadas, es decir, tienen una velocidad de aclaramiento más larga. Sin embargo, los conjugados de PEG-fármaco muestran diversas desventajas, por ejemplo, no muestran una estructura natural que pueda reconocerse por elementos de rutas de degradación in vivo. Por tanto, aparte de conjugados de PEG, se han producido otros conjugados y polimerizados de proteínas.

El documento WO 02/080979 da a conocer compuestos que comprenden un conjugado de un agente activo y un hidroxialquilalmidón en los que el agente activo y el hidroxialquilalmidón están unidos o bien directamente o bien mediante un compuesto de unión. En lo que se refiere a la unión directa, la reacción de agente activo e hidroxialquilalmidón se lleva a cabo en un medio acuoso que comprende al menos el 10% en peso de agua. No se proporcionan ejemplos que se refieran a un hidroxialquilalmidón unido a un compuesto de reticulación mediante un grupo amino de dicho compuesto de reticulación en los que el compuesto de reticulación contenga además un grupo carbonilo protegido. Adicionalmente, no se proporcionan ejemplos que muestren un derivado de HAS que se obtenga haciendo reaccionar dicho derivado de HAS mediante dicho grupo carbonilo con un grupo amino de un agente biológicamente activo.

El documento WO 03/074087 da a conocer conjugados de hidroxialquilalmidón-proteína en los que el enlace entre una molécula de hidroxialquilalmidón y una proteína es covalente y es el resultado de un acoplamiento de un grupo aldehído terminal del hidroxialquilalmidón o un grupo funcional que resultó de la reacción de dicho grupo aldehído con un grupo funcional de una proteína.

El documento WO 03/074088 da a conocer conjugados de hidroxialquilalmidón con un compuesto de bajo peso molecular en los que el enlace entre el hidroxialquilalmidón y el compuesto de bajo peso molecular es covalente y es el resultado de un acoplamiento de un grupo aldehído terminal del hidroxialquilalmidón o un grupo funcional que resultó de la reacción de dicho grupo aldehído con un grupo funcional de una proteína.

El documento WO 2005/014024 da a conocer polímeros funcionalizados mediante un grupo aminooxilo o un derivado de los mismos, conjugados, estando los polímeros funcionalizados covalentemente acoplados con una proteína mediante un grupo de unión oxima, un procedimiento para preparar los polímeros funcionalizados, un procedimiento para preparar los conjugados, polímeros funcionalizados tal como se obtienen mediante el procedimiento de la presente invención, conjugados tal como se obtienen mediante el procedimiento, y composiciones farmacéuticas que comprenden al menos un conjugado y el uso de dichos conjugados y composiciones para la profilaxis o terapia del organismo humano o animal.

El documento WO 2005/092390 da a conocer conjugados de hidroxialquilalmidón y una proteína estando estos conjugados formados por una unión covalente entre el hidroxialquilalmidón o un derivado del hidroxialquilalmidón y la proteína y un método de producción de estos conjugados y el uso de estos conjugados.

El documento WO 2004/024777 da a conocer derivados de hidroxialquilalmidón, particularmente derivados de hidroxialquilalmidón que pueden obtenerse mediante un procedimiento en el que se hace reaccionar hidroxialquilalmidón con un grupo amino primario o secundario de un compuesto de unión. Según una realización especialmente preferida, el documento WO 2004/024777 da a conocer derivados de hidroxialquilalmidón que pueden obtenerse mediante un procedimiento según el cual se hace reaccionar hidroxialquilalmidón con un grupo amino primario o secundario de un compuesto de unión y se hace reaccionar el producto de reacción resultante con un polipéptido, preferiblemente con una glicoproteína y de manera especialmente preferible con eritropoyetina, mediante al menos otro grupo reactivo del compuesto de unión. Un hidroxialquilalmidón que se prefiere especialmente es hidroxietilalmidón. Según el documento WO 2004/024777, se hace reaccionar el hidroxialquilalmidón, y preferiblemente el hidroxietilalmidón, con el compuesto de unión en su extremo reductor que no se oxida antes de la reacción.

El documento WO 2004/024776 da a conocer derivados de hidroxialquilalmidón, particularmente derivados de hidroxialquilalmidón que pueden obtenerse mediante un procedimiento en el que se hace reaccionar hidroxialquilalmidón con un grupo amino primario o secundario de un compuesto de reticulación o con dos compuestos de reticulación en los que el derivado de hidroxialquilalmidón resultante tiene al menos un grupo funcional X que puede hacerse reaccionar con un grupo funcional Y de un compuesto adicional, y en los que este grupo Y del compuesto adicional es un grupo aldehído, un grupo ceto, un grupo hemiacetal, un grupo acetal o un grupo tio. Según una realización especialmente preferida, el documento WO 2004/024776 se refiere un derivados de hidroxialquilalmidón que pueden obtenerse mediante un procedimiento según el cual se hace reaccionar hidroxialquilalmidón con un grupo amino primario o secundario de un compuesto de reticulación, haciéndose reaccionar adicionalmente de manera opcional el producto de reacción resultante con un segundo compuesto... [Seguir leyendo]

1. Método para la preparación de un derivado de hidroxialquilalmidón, que comprende a. hacer reaccionar hidroxialquilalmidón (HAS) de fórmula (I)

mediante el átomo de carbono C* del extremo reductor del HAS con el grupo amino M de un compuesto de 10 reticulación según la fórmula (II) M-L-A (II) en la que A es un grupo acetal o un grupo cetal; y L es un espaciador que forma un puente entre M y A, en 15 la que C* se oxida opcionalmente antes de la reacción de HAS con M, obteniéndose un derivado de HAS según la fórmula (III)

en la que X es el grupo funcional que resulta de la reacción del grupo amino M con el HAS mediante el átomo de carbono C* del extremo reductor opcionalmente oxidado del HAS, y

en la que HAS’ es la parte restante de la molécula de hidroxialquilalmidón, y R1, R2 y R3 son 25 independientemente hidrógeno o un grupo hidroxialquilo lineal o ramificado.

2. Método según la reivindicación 1, en el que R1, R2 y R3 son independientemente un grupo - (CH2CH2O) n-H, en el que n es un número entero, preferiblemente 0, 1, 2, 3, 4, 5 ó 6.

3. Método según la reivindicación 1 ó 2, en el que el hidroxialquilalmidón es hidroxietilalmidón (HES) .

4. Método según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que A es un residuo según la fórmula (IIa)

en la que Z1 y Z2 son cada uno independientemente O o S o NRx, preferiblemente O, en el que Rx es H o alquilo inferior tal como metilo, etilo o propilo tal como n-propilo o i-propilo, o C (O) -Ry en el que Ry se selecciona preferiblemente del grupo que consiste en alquilo C1-C6 y arilo C6-C14, incluso más preferiblemente se selecciona del grupo que consiste en metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo y terc-butilo opcionalmente sustituidos, preferiblemente no sustituidos; siendo Rx preferiblemente H; A1 y A2 son cada uno independientemente metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, terc-butilo, bencilo, 1, 1, 1-tricloroetilo, nitrobencilo, metoxibencilo, etoxibencilo, o están formando un anillo según la fórmula (IIb)

en la que A1 y A2, tomados juntos, son - (CH2) 2- o - (CH2) 3- o - (CH2CH (CH3) ) -, y

en la que A3 es H o metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, pentilo, bencilo, o está formando un anillo con el átomo de N del grupo amino M o con un átomo adecuado comprendido en L, siendo A3 preferiblemente H.

5. Método según la reivindicación 4, en el que Z1 y Z2 son cada uno O; A3 es H; y en el que A1 y A2 son cada uno etilo o en el que A1 y A2 están formando un anillo según la fórmula (IIb) en la que A1 y A2, tomados juntos, son - (CH2) 2-.

6. Método según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que el grupo amino M es un grupo según la 20 fórmula (IIc)

en la que Y o bien está ausente o bien es un resto químico seleccionado del grupo que consiste en en el que G es O o S o NH, y, si está presente dos veces, cada G es independientemente O o S o NH, prefiriéndose O, y en el que R’ es H o un grupo hidroxilo o un residuo orgánico seleccionado del grupo que consiste en alquilo, alquilo sustituido, alquenilo, alquenilo sustituido, alquinilo, alquinilo sustituido, arilo, arilo sustituido, arilalquilo, arilalquilo sustituido, alquilarilo y alquilarilo sustituido; preferiblemente H o un residuo orgánico seleccionado del grupo que consiste en alquilo y alquilo sustituido; más preferiblemente H o alquilo.

7. Método según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en el que el grupo amino M es H2N-, H2N-O-, H2NNH- (C=O) -, H3C-NH- o H3C-NH-O-, preferiblemente H2N-, H2N-O- o H2N-NH- (C=O) -.

8. Método según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en el que en (i) , se hace reaccionar HAS mediante su extremo reductor oxidado con el grupo amino M del compuesto de reticulación, siendo M H2N-, y en el

que la reacción se lleva a cabo a una temperatura en el intervalo de desde 0 hasta 80ºC, y en el que X es - (C=O) -NH-.

9. Método según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en el que en (i) , se hace reaccionar HAS, preferiblemente en un sistema acuoso, mediante su extremo reductor no oxidado, con el grupo amino M del

compuesto de reticulación, siendo M H2N-, y en el que la reacción se lleva a cabo a una temperatura en el intervalo de desde 20 hasta 80ºC a un pH en el intervalo de desde 4 hasta 7, siendo X -CH=N-.

10. Método según la reivindicación 9, en el que en (i) , la reacción se lleva a cabo en presencia de un agente reductor, preferiblemente NaCNBH3, para obtener un derivado de HAS, siendo X -CH2-NH-. 50

11. Método según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en el que en (i) , se hace reaccionar HAS, preferiblemente en un sistema acuoso, mediante su extremo reductor no oxidado con el grupo amino M del compuesto de reticulación, siendo M H2N-O o H2N-NH- (C=O) -, y en el que la reacción se lleva a cabo a una temperatura en el intervalo de desde 5 hasta 80ºC a un pH en el intervalo de desde 4, 5 hasta 6, 5, siendo X

- CH=N-O- o -CH=N-NH- (C=O) -.

12. Método según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, en el que L que forma un puente entre a M y A es un espaciador que comprende al menos una unidad estructural según la fórmula (IId) , que consiste preferiblemente en una unidad estructural según la fórmula (IId)

en la que L1 y L2 son independientemente uno de otro H o un residuo orgánico seleccionado del grupo que consiste en alquilo, alquilo sustituido, alquenilo, alquenilo sustituido, alquinilo, alquinilo sustituido, arilo, arilo sustituido, arilalquilo, arilalquilo sustituido, alquilarilo, alquilarilo sustituido, y residuos -O-R’’ en los que R’’ se selecciona del grupo que consiste en alquilo, alquilo sustituido, alquenilo, alquenilo sustituido, alquinilo, alquinilo sustituido, arilo, arilo sustituido, arilalquilo, arilalquilo sustituido, alquilarilo, alquilarilo sustituido; preferiblemente H o un residuo orgánico seleccionado del grupo que consiste en alquilo y alquilo sustituido;

más preferiblemente H o alquilo; más preferiblemente H,

en la que n es un número entero desde 1 hasta 20, preferiblemente desde 1 hasta 10, más preferiblemente desde 1 hasta 6, más preferiblemente desde 1 hasta 4, más preferiblemente 2.

13. Método según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, en el que L es - (CL1L2) n-, preferiblemente - (CH2) n-, en el que n es un número entero desde 1 hasta 20, preferiblemente desde 1 hasta 10, y en el que, más preferiblemente, L es -CH2-CH2-.

14. Método según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, en el que L comprende al menos una unidad

estructural - (CL1L2) n-O- (CL1L2) n2-, preferiblemente - (CH2) n1-O- (CH2) n2 en la que n1 es igual a, o diferente de, n2, y en el que el espaciador L está unido preferiblemente mediante - (CL1L2) n1- al grupo amino M del compuesto de reticulación.

15. Método según la reivindicación 14, en el que L es - ( (CL1L2) 2-O) m-CL1L2-, preferiblemente - ( (CH2) 2-O) m-CH2-, 30 en la que m es 1, 2 ó 3, más preferiblemente 2 ó 3.

16. Método según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, en el que L es - (CL1L2) n- (C=O) -NH- (CL1L2) n-, preferiblemente - (CH2) n- (C=O) -NH- (CH2) n-, en la que cada n está, independientemente uno de otro, preferiblemente en el intervalo de desde 1 hasta 4, más preferiblemente en el intervalo de desde 1 hasta 3.

17. Método según la reivindicación 16, en el que L se selecciona del grupo que consiste en - (CH2) 3- (C=O) -NH- (CH2) 3-; - (CH2) 3- (C=O) -NH- (CH2) 2-;

- (CH2) 2- (C=O) -NH- (CH2) 3- y - (CH2) 2- (C=O) -NH- (CH2) 2-; lo más preferiblemente se selecciona del grupo que consiste en - (CH2) 3- (C=O) -NH- (CH2) 2- y - (CH2) 2- (C=O) -NH- (CH2) 2-.

18. Método según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, en el que el compuesto de reticulación M-L-A según la fórmula (II) se selecciona del grupo que consiste en H2N- (CH2) 2-CH (OCH2CH3) 2; 50 H2N- (CH2) 2-O- (CH2) 2-O-CH2-CH (OCH2CH3) 2, H2N- (CH2) 2- (C=O) -NH- (CH2) 2-CH (OCH2CH3) 2; 55 H2N- (CH2) 3- (C=O) -NH- (CH2) 2-CH (OCH2CH3) 2;

H2N- (CH2) 7-CH (OCH2CH3) 2; H2N-O- (CH2) 2-O- (CH2) 2-O-CH2-CH (OCH2CH3) 2; y

H2N-NH- (C=O) - (CH2) 2- (C=O) -NH- (CH2) 2-CH (OCH2CH3) 2; preferiblemente del grupo que consiste en

H2N- (CH2) 2-CH (OCH2CH3) 2; H2N- (CH2) 2-O- (CH2) 2-O-CH2-CH (OCH2CH3) 2,

H2N- (CH2) 2- (C=O) -NH- (CH2) 2-CH (OCH2CH3) 2; H2N- (CH2) 3- (C=O) -NH- (CH2) 2-CH (OCH2CH3) 2; H2N-O- (CH2) 2-O- (CH2) 2-O-CH2-CH (OCH2CH3) 2; y

H2N-NH- (C=O) - (CH2) 2- (C=O) -NH- (CH2) 2-CH (OCH2CH3) 2; y más preferiblemente del grupo que consiste en H2N- (CH2) 2-CH (OCH2CH3) 2; H2N- (CH2) 2-O- (CH2) 2-O-CH2-CH (OCH2CH3) 2, H2N- (CH2) 2- (C=O) -NH- (CH2) 2-CH (OCH2CH3) 2; y

H2N- (CH2) 3- (C=O) -NH- (CH2) 2-CH (OCH2CH3) 2.

19. Método según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, en el que el compuesto de reticulación M-L-A

según la fórmula (II) es 1-amino-3, 3-dietoxipropano. 30

20. Método según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 19, que comprende además (ii) hacer reaccionar el derivado de HAS según la fórmula (III) mediante el grupo A con un grupo amino de un agente biológicamente activo H2N-BA’, mediante aminación reductora, obteniendo un derivado de HAS 35 según la fórmula (IV)

21. Método según la reivindicación 20, en el que antes de (ii) , se transforma el grupo A del derivado de HAS 40 según la fórmula (III) en el grupo aldehído o ceto correspondiente.

22. Método según la reivindicación 20 ó 21, en el que en (ii) , la reacción se lleva a cabo, preferiblemente en un sistema acuoso, en presencia de un agente reductor, preferiblemente NaCNBH3, a una temperatura en el intervalo de desde 0 hasta 37ºC, preferiblemente de 0 a 25ºC y un pH en el intervalo de desde 3 hasta 9,

preferiblemente desde 3 a 7, más preferiblemente desde 3 hasta inferior a 7, y en el que en (ii) , la razón molar del derivado de HAS con respecto al agente biológicamente activo BA es de desde 0, 1:1 hasta 200:1 equivalentes, preferiblemente desde 1:1 hasta 50:1 equivalentes, basándose en el peso molecular promedio en número (Mn) del derivado de HAS.

23. Método según cualquiera de las reivindicaciones 20 a 22, en el que el compuesto biológicamente activo BA es un péptido, un oligopéptido, un polipéptido, una proteína, un derivado funcional, fragmento o mimético del polipéptido o proteína, un compuesto de molécula pequeña o un oligonucleótido.

24. Método según la reivindicación 23, en el que la proteína es eritropoyetina (EPO) tal como EPO humana 55 recombinante (rhEPO) , un factor estimulante de colonias (CSF) tal como G-CSF como G-CSF humano

recombinante (rhG-CSF) , interferón (IFN) tal como IFN alfa, IFN beta, IFN gamma como IFN alfa humano

recombinante (rhIFN alfa) o IFN beta humano recombinante (rhIFN beta) , factor VII tal como factor VIIa

humano recombinante (rhFVIIa) , factor IX tal como factor IX humano recombinante (rhFIX) , hormona del

crecimiento (GH) tal como hormona del crecimiento humana recombinante (rhGH) , fragmentos Fab tales

5 como fragmento Fab derivado de una molécula de inmunoglobulina G humana (hFab) , inmunoglobulina G

tal como inmunoglobulina G murina (mlgG) , péptido-1 similar a glucagón (GLP-1) , asparaginasa tal como

asparaginasa recombinante (rAsparaginasa) , leptina tal como leptina humana recombinante (rhLeptina) ,

interleucina-2, interleucina-11, alfa-1-antitripsina, un anticuerpo o un fragmento de anticuerpo o un

andamiaje proteico alternativo.

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25. Derivado de hidroxialquilalmidón (HAS) de fórmula (III)

en la que A es un grupo acetal o cetal; L es un espaciador que forma un puente entre X y A; en la que X es un el grupo funcional que resulta de la reacción de un grupo amino M de un compuesto de reticulación de fórmula (II) 20 M-L-A (II) con hidroxialquilalmidón (HAS) de fórmula (I)

mediante el átomo de carbono C* del HAS, en la que C* se oxida opcionalmente antes de la reacción de HAS con M,

en la que HAS’ es la parte restante de la molécula de hidroxialquilalmidón y R1, R2 y R3 son 30 independientemente hidrógeno o un grupo hidroxialquilo lineal o ramificado.

26. Derivado de HAS según la reivindicación 25, en el que R1, R2 y R3 son independientemente un grupo - (CH2CH2O) n-H, en el que n es un número entero, preferiblemente 0, 1, 2, 3, 4, 5 ó 6.

27. Derivado de HAS según la reivindicación 25 ó 26, en el que el hidroxialquilalmidón es hidroxietilalmidón (HES) .

28. Derivado de HAS según cualquiera de las reivindicaciones 25 a 27, en el que A es un residuo según la fórmula (IIa) 40

en la que Z1 y Z2 son cada uno independientemente O o S o NRx, preferiblemente O, en el que Rx es H o alquilo inferior tal como metilo, etilo o propilo tal como n-propilo o i-propilo, o C (O) -Ry en el que Ry se selecciona preferiblemente del grupo que consiste en alquilo C1-C6 y arilo C6-C14, incluso más preferiblemente se selecciona del grupo que consiste en metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo y terc-butilo opcionalmente sustituidos, preferiblemente no sustituidos; siendo Rx preferiblemente H; A1 y A2 son cada uno independientemente metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, terc-butilo, bencilo, 1, 1, 1-tricloroetilo, nitrobencilo, metoxibencilo, etoxibencilo, o están formando un anillo según la fórmula (IIb)

en la que A1 y A2, tomados juntos, son - (CH2) 2- o - (CH2) 3- o - (CH2CH (CH3) ) -, y

en la que A3 es H o metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, pentilo, bencilo, o está formando un anillo con el átomo de N del grupo amino M o con un átomo adecuado comprendido en L, siendo A3

preferiblemente H.

29. Derivado de HAS según cualquiera de las reivindicaciones 25 a 28, en el que X se selecciona del grupo que consiste en -CH=N-, -CH2-NH-, -CH=N-O-, -CH2-NH-O-, -C (=O) -NH-, -C (=O) -NH-NH-, preferiblemente que consiste en -CH2-NH-, -CH=N-, -CH=N-O-, -CH2-NH-O- y -CH=N-NH- (C=O) -.

30. Derivado de HAS según cualquiera de las reivindicaciones 25 a 29, en el que L que forma un puente entre M y A es un espaciador que comprende al menos una unidad estructural según la fórmula (IId) , que consiste preferiblemente en una unidad estructural según la fórmula (IId)

en la que L1 y L2 son independientemente uno de otro H o un residuo orgánico seleccionado del grupo que consiste en alquilo, alquilo sustituido, alquenilo, alquenilo sustituido, alquinilo, alquinilo sustituido, arilo, arilo sustituido, arilalquilo, arilalquilo sustituido, alquilarilo, alquilarilo sustituido, y residuos -O-R’’ en los que R’’ se selecciona del grupo que consiste en alquilo, alquilo sustituido, alquenilo, alquenilo sustituido, alquinilo,

alquinilo sustituido, arilo, arilo sustituido, arilalquilo, arilalquilo sustituido, alquilarilo, alquilarilo sustituido; preferiblemente H o un residuo orgánico seleccionado del grupo que consiste en alquilo y alquilo sustituido; más preferiblemente H o alquilo; más preferiblemente H,

en la que n es un número entero desde 1 hasta 20, preferiblemente desde 1 hasta 10, más preferiblemente 40 desde 1 hasta 6, más preferiblemente desde 1 hasta 4, más preferiblemente 2.

31. Derivado de HAS según la reivindicación 30, en el que L es - (CL1L2) n-, preferiblemente - (CH2) n-, en la que n es un número entero desde 1 hasta 20, preferiblemente desde 1 hasta 10, y en el que, más preferiblemente, L es -CH2-CH2-.

32. Derivado de HAS según la reivindicación 30, en el que L comprende al menos una unidad estructural - (CL1L2) n1-O- (CL1L2) n2-, preferiblemente - (CH2) n1-O- (CH2) n2 en la que n1 es igual a, o diferente de, n2, y en el que el espaciador L está unido preferiblemente mediante - (CL1L2) n1- al grupo amino M del compuesto de reticulación.

33. Derivado de HAS según la reivindicación 31, L es - ( (CL1L2) 2-O) m- (CL1L2) -, preferiblemente - ( (CH2) 2-O) m5 CH2-, en la que m es 1, 2 ó 3, más preferiblemente 2 ó 3.

34. Derivado de HAS según la reivindicación 30, en el que L es - (CL1L2) n- (C=O) -NH- (CL1L2) n-, preferiblemente - (CH2) n- (C=O) -NH- (CH2) n-, en la que cada n está, independientemente uno de otro, preferiblemente en el intervalo de desde 1 hasta 4, más preferiblemente en el intervalo de desde 1 hasta 3.

35. Derivado de HAS según la reivindicación 34, en el que L se selecciona del grupo que consiste en - (CH2) 3- (C=O) -NH- (CH2) 3-; - (CH2) 3- (C=O) -NH- (CH2) 2-.

15. (CH2) 2- (C=O) -NH- (CH2) 3- y - (CH2) 2- (C=O) -NH- (CH2) 2-; lo más preferiblemente se selecciona del grupo que consiste en - (CH2) 3- (C=O) -NH- (CH2) 2- y - (CH2) 2- (C=O)

NH- (CH2) 2-. 20 36. Derivado de hidroxialquilalmidón según cualquiera de las reivindicaciones 25 a 30, que tiene la estructura

37. Derivado de hidroxialquilalmidón según cualquiera de las reivindicaciones 25 a 30, que tiene la estructura

38. Derivado de hidroxialquilalmidón de fórmula (IV)

en la que X es un grupo funcional que resulta de la reacción de un grupo amino M de un compuesto de reticulación de fórmula (II) 35 M-L-A (II) en la que X no es un grupo amida -C (=O) -NH-, con hidroxialquilalmidón (HAS) de fórmula (1) 40

mediante el átomo de carbono C* del HAS, en la que C* se oxida opcionalmente, lo más preferiblemente no se oxida antes de la reacción de HAS con M,

en la que HAS’ es la parte restante de la molécula de hidroxialquilalmidón y R1, R2 y R3 son independientemente hidrógeno o un grupo hidroxialquilo lineal o ramificado,

en la que A es un residuo según la fórmula (IIa) 10

en la que Z1 y Z2 son cada uno independientemente O o S o NRx, preferiblemente O, en el que Rx es H o alquilo inferior tal como metilo, etilo o propilo tal como n-propilo o i-propilo, o C (O) -Ry en el que Ry se selecciona preferiblemente del grupo que consiste en alquilo C1-C6 y arilo C6-C14, incluso más preferiblemente se selecciona del grupo que consiste en metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo y terc-butilo opcionalmente sustituidos, preferiblemente no sustituidos; siendo Rx preferiblemente H; A1 y A2 son cada uno independientemente metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, terc-butilo, bencilo, 1, 1, 1-tricloroetilo, nitrobencilo, metoxibencilo, etoxibencilo, o están formando un anillo según la fórmula (IIb)

en la que A1 y A2, tomados juntos, son - (CH2) 2- o - (CH2) 3- o - (CH2CH (CH3) ) -, y

en la que A3 es H o metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, pentilo, bencilo, o está formando un anillo con el átomo de N del grupo amino M o con un átomo adecuado comprendido en L, siendo A3 preferiblemente H;

y en la que L es un espaciador que forma un puente entre M y A,

en la que BA’ es la parte restante de un agente biológicamente activo BA’-NH2 que queda tras la reacción del grupo amino de BA mediante aminación reductora con A o con el grupo aldehído o grupo ceto correspondiente a A.

39. Derivado de HAS según la reivindicación 38, en el que X se selecciona del grupo que consiste en -CH2-NH-, -CH=N-, -CH2-NH-O y -CH=N-O-, lo más preferiblemente -CH2-NH- y -CH2-NH-O-, lo más preferiblemente -CH2-NH-.

40. Derivado de HAS según la reivindicación 38 ó 39, en el que L que forma un puente entre M y A es un espaciador que comprende al menos una unidad estructural según la fórmula (IId) , que consiste preferiblemente en una unidad estructural según la fórmula (IId)

en la que L1 y L2 son independientemente uno de otro H o un residuo orgánico seleccionado del grupo que consiste en alquilo, alquilo sustituido, alquenilo, alquenilo sustituido, alquinilo, alquinilo sustituido, arilo, arilo sustituido, arilalquilo, arilalquilo sustituido, alquilarilo, alquilarilo sustituido, y residuos -O-R’’ en los que R’’ se selecciona del grupo que consiste en alquilo, alquilo sustituido, alquenilo, alquenilo sustituido, alquinilo, alquinilo sustituido, arilo, arilo sustituido, arilalquilo, arilalquilo sustituido, alquilarilo, alquilarilo sustituido; preferiblemente H o un residuo orgánico seleccionado del grupo que consiste en alquilo y alquilo sustituido;

más preferiblemente H o alquilo; más preferiblemente H,

en la que n es un número entero desde 1 hasta 20, preferiblemente desde 1 hasta 10, más preferiblemente desde 1 hasta 6, más preferiblemente desde 1 hasta 4, más preferiblemente 2.

41. Derivado de HAS según la reivindicación 40, en el que L es - (CL1L2) n-, preferiblemente - (CH2) n-, en la que n es un número entero desde 1 hasta 20, preferiblemente desde 1 hasta 10, y en el que, más preferiblemente, L es -CH2-CH2-.

42. Derivado de HAS según la reivindicación 40, en el que L comprende al menos una unidad estructural

- (CL1L2) n) -O- (CL) L2) n2-, preferiblemente - (CH2) n1-O- (CH2) n2 en la que n1 es igual a, o diferente de, n2, y en el que el espaciador L está unido preferiblemente mediante - (CL) L2) n1- al grupo amino M del compuesto de reticulación.

43. Derivado de HAS según la reivindicación 42, L es - ( (CL1L2) 2-O) m- (CL1L2) -, preferiblemente - ( (CH2) 2-O) m25 CH2-, en la que m es 1, 2 ó 3, más preferiblemente 2 ó 3.

44. Derivado de HAS según la reivindicación 40, en el que L es - (CL1L2) n- (C=O) -NH- (CL1L2) n-, preferiblemente - (CH2) n- (C=O) -NH- (CH2) n-, en la que cada n está, independientemente uno de otro, preferiblemente en el intervalo de desde 1 hasta 4, más preferiblemente en el intervalo de desde 1 hasta 3.

45. Derivado de HAS según la reivindicación 44, en el que L se selecciona del grupo que consiste en

- (CH2) 3- (C=O) -NH- (CH2) 3-; - (CH2) 3- (C=O) -NH- (CH2) 2-;

- (CH2) 2- (C=O) -NH- (CH2) 3- y - (CH2) 2- (C=O) -NH- (CH2) 2-;

lo más preferiblemente se selecciona del grupo que consiste en

- (CH2) 3- (C=O) -NH- (CH2) 2- y - (CH2) 2- (C=O) -NH- (CH2) 2-. 40

46. Derivado de HAS según cualquiera de las reivindicaciones 38 a 40, que tiene la estructura 45 47. Derivado de HAS según cualquiera de las reivindicaciones 38 a 46, en el que el compuesto biológicamente activo BA es un péptido, un oligopéptido, un polipéptido, una proteína, un derivado funcional, fragmento o mimético del polipéptido o proteína, un compuesto de molécula pequeña o un oligonucleótido.

48. Derivado de HAS según la reivindicación 47, en el que la proteína es eritropoyetina (EPO) tal como EPO

humana recombinante (rhEPO) , un factor estimulante de colonias (CSF) tal como G-CSF como G-CSF humano recombinante (rhG-CSF) , interferón (IFN) tal como IFN alfa, IFN beta, IFN gamma como IFN alfa humano recombinante (rhIFN alfa) o IFN beta humano recombinante (rhIFN beta) , factor VII tal como factor VIIa humano recombinante (rhFVIIa) , factor IX tal como factor IX humano recombinante (rhFIX) , hormona del crecimiento (GH) tal como hormona del crecimiento humana recombinante (rhGH) , fragmentos Fab tales como fragmento Fab derivado de una molécula de inmunoglobulina G humana (hFab) , inmunoglobulina G

tal como inmunoglobulina G murina (mIgG) , péptido-1 similar a glucagón (GLP-1) , asparaginasa tal como asparaginasa recombinante (rAsparaginasa) , leptina tal como leptina humana recombinante (rhLeptina) , interleucina-2, interleucina-11, alfa-1-antitripsina, un anticuerpo o un fragmento de anticuerpo o un andamiaje proteico alternativo.

49. Derivado de HAS según cualquiera de las reivindicaciones 38 a 48, como agente terapéutico o profiláctico.

50. Derivado de HAS según cualquiera de las reivindicaciones 38 a 48, para su uso en un método para el tratamiento del organismo humano o animal.

51. Composición farmacéutica que comprende, en una cantidad terapéuticamente eficaz, un derivado de HAS según cualquiera de las reivindicaciones 38 a 48.