DERIVADOS DE 5-AZOLONA COMO INHIBIDORES DE CALPAINA.

La presente invención se refiere a compuestos derivados de 4-arilmetilen-1,

3-azol-5-ona, con o sin sustituyentes amino en posición R1, con actividad como inhibidores de calpaina. Estos compuestos poseen la fórmula general I, donde R1, R2, X, Y y W tienen el significado mencionado en la descripción y en las reivindicaciones, sus tautómeros y sus posibles sales. En particular, estos compuestos tienen las fórmulas generales I-A., I-B. y I-C., donde R1, R2, R3, R4, R5, X, Y y Z tienen el significado mencionado en la descripción y en las reivindicaciones, sus tautómeros y sus posibles sales. Los compuestos I tienen aplicación en el tratamiento preventivo o terapéutico de desórdenes relacionadas con niveles elevados de actividad calpaina.

DERIVADOS DE 5-AZOLONA COMO INHIBIDORES DE CALPAINA

SECTOR DE LA TÉCNICA

La presente invención se enmarca en el campo de los inhibidores de enzimas con actividad terapéutica, más específicamente de los inhibidores de calpaina.

ESTADO DE LA TÉCNICA

Las calpainas son una familia de proteasas citosólicas (no lisosomales) neutras calcio-dependientes. Son proteasas con cisteina (“cysteine proteases”) también conocidas como tiolproteasas y son responsables de la proteólisis neutra calciodependiente, en virtud de un dominio de unión a calcio (Curr. Top. Med. Chem. 2010, 270) .1 Su actividad de tipo papaína dependiente de calcio, no lisosomal y precisando pH neutro las diferencia claramente de las catepsinas. Actualmente se conocen al menos, 15 calpainas, de manera que el último término de la serie fue identificado en 2001. Existen diversa clasificaciones para las calpainas, aunque una muy utilizada se basa en la localización de los enzimas en el organismo, distinguiéndose entre CALPAINAS UBIQUAS (expresadas en todas las células del organismo) y CALPAINAS TEJIDO_ESPECIFICAS, que solamente se expresan en determinados tejidos tales como músculo esquelético, retina, testículo, pulmón, tracto digestivo etc (Bioorg. Med. Chem. 2002, 1335) .2

No existe una secuencia única de aminoácidos que sea reconocida por las calpainas, siendo en sustratos proteicos la estructura terciaria más que la primaria la responsable del reconocimiento y corte proteolítico, catalizando estos procesos en una gran variedad de proteínas implicadas en procesos tales como transducción de señales, en la reconstrucción del citoesqueleto, en la regulación del ciclo celular y en la apoptosis.

La actividad de las calpainas in vivo se encuentra regulada por las calpastatinas. La deficiente regulación de calpainas por calpastatinas, además de la sobreactivación, que puede ocurrir al aumentar la concentración intracelular de Ca+2, está asociada a varios desordenes patológicos tales como distrofia muscular, enfermedad renal y envejecimiento, 3 desordenes neurológicos tales como Alzheimer, Parkinson, Hungtinton, enfermedades desmielinizantes (como la esclerosis múltiple) y otras enfermedades degenerativas. Asímismo, el papel de las calpainas y sus inhibidores naturales las calpastatinas en enfermedades renales ha sido demostrado por diversos autores tales como Shi et al., 4 Dnyanmote et al., 5 Peltier et al., 6 Chatterjee et al.7 y Kamal et al.8

Por estas razones, se postula que los inhibidores de calpaina pueden ser utilizados en el tratamiento de estas enfermedades (US 2010/0216844) 9 siendo este postulado confirmado por variedad de investigaciones. Es por ello por lo que el interés en el desarrollo de agentes inhibidores de calpaina ha crecido sustancialmente.

La mayoría de los inhibidores de calpaina desarrollados hasta el momento son análogos peptídicos y su mayor limitación para su uso en tepeútica es su falta de selectividad frente a calpainas, relativa a otras tiolproteasas. Además su estructura polar, característica de una estructura peptídica, presenta un perfil farmacocinético poco adecuado. Sin embargo, en fechas más recientes, se ha desarrollado una serie de inhibidores no-peptídicos que parecen poseer una mayor especificidad frente a diversas calpainas. En todos los casos estudiados son inhibidores reversibles, que parecen no interaccionar con el centro catalítico de las calpainas, sino que interaccionan con un lugar alostérico, que juega un papel importante en la activación catalítica.10 Los rasgos estructurales más frecuentes de estos inhibidores es que suelen ser péptidomiméticos con alguna funcionalidad electrófila.11 Entre las estructuras no-peptidicas con una reconocida acción inhibidora de calpainas destacan:

! El ácido aurintricarboxílico 1, un colorante de estructura quinoide que puede

inhibir tanto la actividad inducida por μ-calpaina, como la inducida por m

calpaina (calpainas 1 y 2, respectivamente, dos de las calpainas ubicuas más

estudiadas) (Fig. A) .12

! Acidos α-mercaptoacrílicos, 13 tales como PD 150606, 2 y PD 151746, 3, una

clase de inhibidores no peptídicos con buena penetración celular y una gran

selectividad frente a calpainas, especialmente frente a μ-calpaina.

Adicionalmente, el derivado PDI-150606, 2, ha demostrado su utilidad

preventiva en el caso de daño renal, facilitando además la recuperación del tejido (Fig. A) .14

Figura A

! Derivados de carboxamidas alicíclicas o carbocíclicas, constituidas por derivados del ácido 3-amino-2-oxo-carboxílico, acilados con diferentes ácidos benzoicos 4 (WO 98/25883, 15 WO 99/54293, 16) (Fig. B) o ácidos benzoicos incluidos en una estructura heterocíclica 5, (WO 98/25899) , (Fig. B) .17 Otras carboxamidas que incluyen, en el resto amino derivados de ácidos 2

oxocarboxílicos, acilados con ácidos carboxílicos derivados de estructuras heterocíclicas 6-8, (WO-99/61423, 18 WO-99/54320, 19 WO-99/54310, 20 WO99/54304, 21 WO-99/54305, 22 Bioorg. Med. Chem. Lett., 2005, 2857, 23 Bioorg. Med. Chem. Lett., 2008, 205, 24 Eur. J. Med. Chem. 2009, 1331, 25 (Fig. B) ) han sido también descritas como inhibidores de calpaina.

R1 H

R3 NO

OO

O N

R2 N

OH

OHR1 H O O

5

O O

O O

R1

R4 O O H

O

H

N

R

N

N

R4

N

N

ON

H

H

N

N

H

H

O

O

R2

R3

H

H

CH3

O

O CH3

7 O

Figura B

! Otros análogos no peptídicos son los derivados de carboxamidas 926 (Fig. C) ,

que se caracterizan por poseer una significativa selectividad por μ-calpaina,

frente a otras cisteína proteasas, los compuestos 10, derivados de

piridincarboxamidas, unidos mediante diversas posiciones, a un pirazol

5 sustituido, a través del átomo de nitrógeno (WO 2008/080969, 27 WO

2009/08358128) , o bien a un 1, 3-azol a través de las posiciones 2 ó 4 (WO

2010/09475529) . Por último también se han descrito como inhibidores de

calpainas las carboxamidas heterocíclicas 11, derivadas de sistemas de 4, 5 ó 6

eslabones, incluyendo en el sistema heterocíclico un resto de amida,

10 sulfinamida o sulfonamida (WO 2010/12810230) .

R1

O

R1

O

X

N

X

H R3a R3b

N

Rn H R3a R3b

X

NN

N

RW

RW

N

R2

R2

10

R1

O

R4 XY

N H R3a R3b N

O

R2

Figura C

Por otro lado, nuestro grupo ha comunicado recientemente31 una nueva síntesis total del alcaloide variolina B, uno de los miembros de una familia de alcaloides aislados de la esponja marina Kirtpatrickia varialosa.32 La variolina B se caracteriza por poseer un núcleo de pirrolo[1, 2-c]pirimidina, con la posición 9, marcadamente electrófila. Este sistema heterocíclico, poco común, podría guardar los requerimientos necesarios para construir a partir de él carboxamidas del tipo denominado genéricamente híbridos peptido-heterociclo (WO 2006/064075) 33 y que podrían guardar los requerimientos estructurales necesarios para actuar como inhibidores de calpaina. Los primeros intentos indicaban que los derivados sencillos del núcleo de pirrolo[1, 2-c]pirimidina 7carboxamida, constituidos por una cadena de 2 ó 3 aminoácidos proporcionaban valores pobres de actidad biológica. La extensión de esta investigación a otras aminas no peptídicas nos ha permitido aislar una serie de estructuras, en las que la actividad

inhibitoria de calpaina aumenta de manera espectacular y la presencia de cadenas peptídicas no es necesaria para lograr tal actividad biológica. Este hecho incrementa notablemente su potencial utilidad terapéutica como inhibidores enzimáticos. Es de esperar que este tipo de derivados no-peptídicos posean mayor estabilidad metabólica y una farmacocinética más adecuada que los denominados híbridos péptido-heterociclo.

DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN

La presente invención se refiere a compuestos derivados de 4-arilmetilen-1, 3azol-5-ona, con o sin sustitutentes amino en posición R1, con actividad como 15 inhibidores de calpaina.

La presente invención se refiere a un compuesto que es caracterizado porque tiene estructura de 1, 3-azol-5-ona, con o sin sustituyentes amino en disposición R1, y de fórmula I,

R1W

O

N X

R2 I

En la que:

-El grupo...

1. Un compuesto que es caracterizado porque tiene estructura de 1, 3-azol-5-ona, con o sin sustituyentes amino en disposición R1, y de fórmula I, 5

R1W

O

N X

R2 I

En la que: -El grupo X es oxígeno (O) , NH, NR6 o N-CH2-CO2R7 indistintamente, en el que

R6 está seleccionado entre un grupo alquilo entre 1-4 átomos de carbono, cicloalquilo, bencilo y metoxialquilo, con alquilo entre 1 y 3 átomos de carbono, y R7 es un alquilo entre 1 y 2 átomos de carbono,

-El grupo R1 está independientemente seleccionado entre los grupos -H

- NHR8, en el que R8 está seleccionado entre un grupo alquilo entre 1-4 átomos de carbono, cicloalquilo, bencilo y metoxialquilo, con alquilo entre 1 y 3 átomos de carbono,

-R6 y R8 pueden ser iguales o diferentes, -El grupo R2 es hidrógeno (H) , metilo (-CH3) o fenilo (-C6H5) .

20. W es un radical arílico de fórmula W1, W2 o W3,

R4 R5

R4

R3

*

*

*

Y

YZ

W1W2 W3

donde, -* representa el enlace de unión con la estructura I, -R3 está seleccionado entre hidrógeno (H) , OH y OAc, -R4 es hidrógeno (H) o bromo (Br) , indistintamente, -R5 está seleccionado entre hidrógeno (H) , cloro (Cl) o metoxi (OMe) , -Y está seleccionado entre NH, azufre (S) u oxígeno (O) , -Z está seleccionado entre nitrógeno (N) o CH, indistintamente 2. Un compuesto según la reivindicación 1, caracterizado porque está seleccionado entre: -4-Benziliden-2-metil-4H-oxazol-5-ona (12, descrito) , -Acetato de 4- (2-metil-5-oxo-oxazol-4-ilidenometil) -fenilo (13, descrito) , -5-Benziliden-2-metil-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (14, descrito) , - (4-Benziliden-2 metil-5-oxo-4, 5-dihidro-imidazol-1-il) -acetato de etilo (15,

descrito) , -5-Benziliden-2, 3-dimetil-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (16, descrito) , -5- (4-Hidroxi-benziliden) -2, 3-dimetil-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (17, descrito) , -5-Benziliden-3- (2-metoxi-etil) -2-metil-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (18) , -4-Benziliden-2-fenil-4H-oxazol-5-ona (19, descrito) , -5-Benziliden-2-fenil-3, 5-dihidroimidazol-4-ona (20, descrito) , -2-Metil-5- (1H-pirrol-2-il-metilen) -3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (21) , -[2-Metil-5-oxo-4- (1H-pirrol-2-il-metilen) -4, 5-dihidro-imidazol-1-il]-acetato de etilo (22) , -2-Metil-5-tiofen-2-il-metilen-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (23) , - (2-Metil-5-oxo-4-tiofen-2-il-metilen-4, 5-dihidro-imidazol-1-il) -acetato de etilo (24) , -5- (3-Bromo-tiofen-2-il-metilen) -2-metil-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (25) , -3- (2-Metoxi-etil) -2-metil-5-tiofen-2-il-metilen-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (26) , -2-Fenil-5-tiofen-2-il-metilen-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (27) , -5-Furan-2-il-metilen-2-metil-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (28) , - (4-Furan-2-il-metilen-2-metil-5-oxo-4, 5-dihidro-imidazol-1-il) -acetato de etilo (29) , -4- (1H-Indol-2-il-metilen) -2-metil-4H-oxazol-5-ona (30) , -5- (1H-Indol-2-il-metilen) -2-metil-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (31) , -[4- (1H-Indol-2-il-metilen) -2-metil-5-oxo-4, 5-dihidroimidazol-1-il]-acetato de etilo (32) , -[4- (3-Bromo-1H-indol-2-il-metilen) -2-metil-5-oxo-4, 5-dihydro-imidazol-1-il]acetato de etilo (33) ,

- 5- (1H-Indol-2-il-metilen) -3- (2-metoxietil) -2-metil-3, 5-dihidroimidazol-4-ona (34) , -5- (3-Bromo-1H-indol-2-il-metilen) -2-metil-3, 5-dihidroimidazol-4-ona (35) , -5-[ (1H-Indol-2-il) - (2-metoxietilamino) -metilen]-2-metil-3, 5-dihidroimidazol-4ºna (36) , -5-[ (1H-Indol-2-il) - (2-metoxietilamino) -metilen]-3- (2-metoxietil) -2-metil-3, 5dihidroimidazol-4-ona (37) , -4- (1H-Indol-2-il-metilen) -2-fenil-4H-oxazol-5-ona (38) , -5- (1H-Indol-2-il-metilen) -2-fenil-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (39) , -5- (3-Bromo-1H-indol-2-il-metilen) -2-fenil-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (40) , -5-[ (1H-Indol-2-il) - (2-metoxietilamino) -metilen]-3- (2-metoxietil) -2-fenil-3, 5dihidro-imidazol-4-ona (41) , -5-[ (1H-Indol-2-il) - (2-metoxietilamino) -metilen]-3- (2-metoxi-etil) -3, 5-dihidroimidazol-4-ona (42) , -3-Butil-5-[butilamino- (1H-indol-2-il) -metilen]-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (43) , -5-[ (1H-Indol-2-il) -isopropilamino-metilen]-3-isopropil-3, 5-dihidro-imidazol-4ºna (44) , -3-Benzil-5-[benzilamino- (1H-indol-2-il) -metilen]-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (45) , -3-Ciclohexil-5-[ciclohexilamino- (1H-indol-2-il) -metilen]-3, 5-dihidro-imidazol4-ona (46) , -3- (2-Metoxietil) -5-[ (2-metoxietilamino) - (1H-pirrolo[2, 3-b]piridin-2-il) metilen]-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (47) , -3-Isopropil-5-[isopropilamino- (1H-pirrolo[2, 3-b]piridin-2-il) -metilen]-3, 5dihidro-imidazol-4-ona (48) , -3-Benzil-5-[benzilamino- (1H-pirrolo[2, 3-b]piridin-2-il) -metilen]-3, 5-dihidroimidazol-4-ona (49) -3-Ciclohexil-5-[ciclohexilamino- (1H-pirrolo[2, 3-b]piridin-2-il) -metilen]-3, 5dihidro-imidazol-4-ona (50) , -5-[ (4-Cloro-1H-pirrolo[2, 3-b]piridin-2-il) - (2-metoxi-etilamino) -metilen]-3- (2metoxi-etil) -3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (51) , -3- (2-Metoxi-etil) -5-[ (2-metoxi-etilamino) - (4-metoxi-1H-pirrolo[2, 3-b]piridin-2il) -metilen]-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (52) ,

- 5-[ (3-Bromo-1H-pirrolo[2, 3-b]piridin-2-il) - (2-metoxi-etilamino) -metilen]-3- (2

metoxi-etil) -3, 5-dihydro-imidazol-4-ona (53) ,

- 5-Benzo[b]tiofen-2-il-metilen-2-metil-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (54) ,

- (4-Benzo[b]tiofen-2-il-metilen-2-metil-5-oxo-4, 5-dihidro-imidazol-1-il) -acetato

de etilo (55) , -5- (3-Bromo-benzo[b]tiofen-2-il-metilen) -2-metil-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona (56)

- 5- (3-Bromo-benzo[b]tiofen-2-il-metilen) -3- (2-metoxi-etil) -2-metil-3, 5-dihydroimidazol-4-ona (57) y cualquiera de sus isómeros.

3. Un procedimiento de síntesis de los compuestos de fórmula I-A., definido en la reivindicación 1, caracterizado porque un aldehído se transforma en presencia de acetilglicina o ácido hipúrico, en derivados de benziliden-4H-oxazol-5-ona.

4. Un procedimiento de síntesis de los compuestos de fórmula I-A., definido en la reivindicación 1, caracterizado porque un aldehído se transforma en presencia de clorhidrato de acetamidina o benzamidina y bromoacetato de etilo, en derivados de 5-benziliden-3, 5-dihidroimidazol-4-ona.

5. Un procedimiento de síntesis de los compuestos de fórmula I-A., definido en la reivindicación 1, caracterizado porque derivados de benziliden-4H-oxazol-5-ona se transforman por apertura y reciclación, en presencia de una amina en derivados de 5-benziliden-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona 3-sustituidos.

6. Un procedimiento de síntesis de los compuestos de fórmula I-B., definido en la reivindicación 1, caracterizado porque un aldehído se transforma en presencia de clorhidrato de acetamidina o benzamidina y bromoacetato de etilo, en derivados de (1H-pirrol-2-il-metilen) o tiofen-2-il-metilen o furan-2-il-metilen-3, 5-dihidroimidazol-4-ona.

7. Un procedimiento de síntesis de los compuestos de fórmula I-B., definido en la reivindicación 1, caracterizado porque derivados de 5-tiofen-2-il-metilen-3, 5

dihidro-imidazol-4-ona se tranforman en derivados de 5-tiofen-2-il-metilen-3, 5dihidro-imidazol-4-ona-3-sustituidos.

8. Un procedimiento de síntesis de los compuestos de fórmula I-C., definido en la reivindicación 1, caracterizado porque un aldehído se transforma en presencia de acetilglicina o ácido hipúrico, en derivados de (1H-indol-2-il-metilen) -2-metil-4Hoxazol-5-ona.

9. Un procedimiento de síntesis de los compuestos de fórmula I-C., definido en la reivindicación 1, caracterizado porque un aldehído se transforma en presencia de clorhidrato de acetamidina o benzamidina y bromoacetato de etilo, en derivados de 5- (1H-indol-2-il-metilen) -3, 5-dihidro-imidazol-4-ona.

10. Un procedimiento de síntesis de los compuestos de fórmula I-C., definido en la reivindicación 1, caracterizado porque un derivado de 5- (1H-indol-2-il-metilen) 3, 5-dihidro-imidazol-4-ona se transforma en presencia de una amina en un derivado de 5- (1H-indol-2-il-metilen) -3, 5-dihidro-imidazol-4-ona 3-sustituido.

11. Un procedimiento de síntesis de los compuestos de fórmula I-C., definido en la reivindicación 1, caracterizado porque un derivado de 5- (1H-indol-2-il-metilen) 3, 5-dihidro-imidazol-4-ona se transforma en presencia de NBS en un derivado de 5 (3-bromo-1H-indol-2-il-metilen) -3, 5-dihidroimidazol-4-ona.

12. Un procedimiento de síntesis de los compuestos de fórmula I-C., definido en la reivindicación 1, caracterizado porque un derivado de 5- (3-bromo-1H-indol-2-ilmetilen) -3, 5-dihidroimidazol-4-ona se transforma en presencia de una amina en un derivado 3, metilen-disustituido.

13. Un procedimiento de síntesis de los compuestos de fórmula I-C., definido en la reivindicación 1, caracterizado porque un derivado de 5-bromo-pirimido[1, 6a]indol-3-carboxilato de metilo, 5-bromo-pirido[3’, 2’: 4, 5]pirrolo[1, 2c]pirimidin-7-carboxilato de metilo, 5-bromo-4-cloro-pirido[3’, 2’: 4, 5]pirrolo[1, 2c]pirimidin-7-carboxilato de metilo o 5-bromo-4-metoxi-pirido[3’, 2’:

4, 5]pirrolo[1, 2-c]pirimidin-7-carboxilato de metilo se transforma en presencia de una amina en un derivado 5-desbromo 5-[ (1H-indol-2-il) -metilen]-3, 5-dihidroimidazol-4-ona o 5-desbromo - (1H-pirrolo[2, 3-b]piridin-2-il) -metilen]-3, 5-dihidroimidazol-4-ona 3, metilen-disustituido.

14. Un procedimiento de síntesis de los compuestos de fórmula I-C., definido en la reivindicación 1, caracterizado porque un aldehído se transforma en presencia de clorhidrato de acetamidina en derivados 5-benzo[b]tiofen-2-il-metilen-2-metil-3, 5dihidro-imidazol-4-ona.

15. Un procedimiento de síntesis de los compuestos de fórmula I-C., definido en la reivindicación 1, caracterizado porque un derivado de 5-benzo[b]tiofen-2-ilmetilen-2-metil-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona se transforma en presencia de NBS en un derivado de 5- (3-bromo-benzo[b]tiofen-2-il-metilen) -2-metil-3, 5-dihidroimidazol-4-ona.

16. Un procedimiento de síntesis de los compuestos de fórmula I-C., definido en la reivindicación 1, caracterizado porque un derivado de 5- (3-bromo-benzo[b]tiofen2-il-metilen) -2-metil-3, 5-dihidro-imidazol-4-ona se transforma en presencia de una amina en un derivado 3-sustituido.

17. Uso de un compuesto inhibidor de calpaina de fórmulas I-A., I-B. o I-C., definido en las reivindicaciones 1 a 16, para preparar un fármaco para el tratamiento preventivo o terapéutico de desórdenes relacionados con niveles elevados de actividad calpaina.

ES 2 395 663 Al

Compuesto 12 13 14 16 17 18 19 21 22 23 24 25 26 43, 7 27 92, 6 28 77, 4 29 90, 4 30 44, 9 31 61 32 94, 5

Tabla 1 y Figura 1

Compuesto % Inhibición 34 43, 3

14, 4 57 13

Tabla 2 y Figura 2

ES 2 395 663 Al

O

O

OO CH3

O

CH3O NH

NNN N

N CH3 O O

CH3 CH3 CH3

12, 17% 13, 69.2% 14, 67.7% 16, 82.4%

O OO O N N

HO N

CH3

N

N

O

NNHO NH

CH3

CH3 CH3 H3C

17, 89.4% 18, 86.8% 19, 25.1% 21, 90.2%

Br

N

S HO

O

N S N N

O N S O

N H3C NH

H3C N O

NHOO O

H3C

H3C

CH3 CH3 22, 26% 23, 122% 24, 96.2% 25, 24.9%

OS

OSO O O NN ONNN

NH N

H3CNHH3C O OH3CO

H3C CH3

26, 43.7% 27, 92.6% 28, 77.4% 29, 90.4%

O OO

O N

N N NH H

N

N

NHH

NN

NO

NH H3C O CH3

OCH3 CH3 O

CH3

CH3

30, 44.9% 31, 61% 32, 94.5% 34, 43.3%

Figura 3

ES 2 395 663 Al

CH3 CH3 O

O N N

HH O O N NO O HH

N N NO NN

HH

N

NH N

N

CH3 CH3

O CH3

36, 80.4% 37, 93% 38, 93.3% 39, 15.3%

CH3Br OH

H CH3N

N O H

CH3N NO ON

N

H O H N

H

NHN

ONN

N

N

N N O CH3

CH3 O H3C 40, 36.8% 41, 21.5% 42, 73.7% 43, 14%

H CH3

CH3H3C

H

CH3

N

N

H3C

N

O

N

NH

NH

N

H

O

H

N

O

N

O

H ON

N

N N

N N

H

CH3

N

CH3

N

N CH3

O CH3

H3C 44, 57.8% 45, 28.2% 47, 99.4% 48, 37.2%

CH3 Cl O

Br

HH

CH3

H

NH

N

CH3

ON CH3N N NN O ON

N

H O

H O

H

O ON N

N N N H NN

N N N O

OO

H3C

H3C H3C

49, 11.7% 51, 45.8% 52, 54.2% 53, 87.7%

Br Br O S

O

O SN

O S

N

S

N

NN NH N

NHH3C OO CH3CH3 O

CH3

CH3 CH354, 34.8% 55, 27.6% 56, 14.4% 57, 13%

Figura 3 (continuación)

R1

W

ON

X R2 I

R5 R4

R4

R1

R1 R1 R3 OO O YY Z

NN

N

X X R2 R2 R2

I-C.

I-A. I-B. Figura 4

OFICINA ESºAAOLA DE ºATENTES Y MARCASº N"O solicitud: º

ESºAAAº

Fecha de presentación de la solicitud: ºº" "ººº

Fecha de prioridad: INFORME SOBRE EL ESTADO DE LA TECNICA

5º Int. Cl. : Ver Hoja Adicional

DOCUMENTOS RELEVANTES

Categoría 56 Documentos citados Reivindicaciones afectadas

x WO ºººº4 º9 584 Aº ( CORNELL U NIVERSITY) ºººº8ºº ººº reivindicaciones º4 f igura ºA

pagina 84 ejemplo º

x S KOJIMA et al Tetrahedron Letters 998 vol 9 pags 5ºº 9º5º 4º" "Fluorescent properties of

model chromophores of tyrosineº ºº substituted mutants of Aequorea green fluorescent proteon

(GFº) " pags 5º4º 5 4 compuestos 5

x K M KHAN et al Bioorganic & Medicinal Chemistr y ºº vol º4 pags º" "Oxazolones: ºººº

new tyrosinase inhibitors; synthesis and their structureºactivity relationships" pag ººº8 esquema

º apartado 4" parte experimental

x x G ONG et al O rganic Letters º vo l ºº pags 8 ºº" " Simple a nd efficient co pper º º

catalyzed approach to º 4º disubstituted imidazolones" pag ººº9 figura º pag ºº tabla

x G KERNEUR et al Synthesis º99º pags º8ºº º89" "Convenient preparation of 4 ºalkilideneººH º º

imidazolº 5 (4H) ºone derivatives from imidate and aldehy des" pag º8

A US ºººº4ºº 844 Aº (ABBOTT LABORATORIES) ºººº8ºº ºº

Categoria de los documentos citados x: de particular relevancia Y: de particular relevancia combinado con otro4s de la misma categoria A: refleja el estado de la tecnica O: referido a divulgación no escrita º: publicado entre la fecha de prioridad y la de presentación de la solicitud E: documento anterior pero publicado despues de la fecha de presentación de la solicitud

El presente informe ha sido realizado • para todas las reivindicaciones • para las reivindicaciones nO:

Fecha de realización del informe º4"ºº"º Examinador M. P. Fernández Fernández Página º44

INFORME DEL ESTADO DE LA TECNICA

NO de solicitud:

CLASIFICACION OBJETO DE LA SOLICITUD

C07D233/96 (ºººº"ºº) C07D263/42 (ºººº"ºº) A61K31/4166 (ºººº"ºº) A61K31/421 (ºººº"ºº)

Documentación minima buscada (sistema de clasificación seguido de los simbolos de clasificación)

CººD A ºK

Bases de datos electrónicas consultadas durante la busqueda (nombre de la base de datos y si es posible terminos de busqueda utilizados)

INVENES EºODOC WºI CAS REGISTRY

Informe del Estado de la Tecnica agina º44

OPINIÓN ESCRITA

NO de solicitud: ººººººººº

Fecha de Realización de la Opinión Escrita: º4"ºº"º

Declaración Novedad (Art. 6.1 LP 11/1986) Reivindicaciones SI Reivindicaciones NO

Actividad inventiva (Art. 8.1 LP11/1986) Reivindicaciones SI Reivindicaciones NO

Se considera que la solicitud cumple con el requisito de aplicación industrial" Este requisito fue evaluado durante la fase de examen formal y tecnico de la solicitud (Articulo ºº"º Ley º4º98 º) "

Base de la Opinión.

La presente opinión se ha realizado sobre la base de la solicitud de patente tal y como se publica"

Informe del Estado de la Tecnica agina º44

OPINIÓN ESCRITA

NO de solicitud: ººººººººº

1. Documentos considerados.

A co ntinuación se r elacionan l os doc umentos pertenecientes al est ado de la t ecnica t omados en c onsideración para l a realización de esta opinión"

Documento Número Publicación o Identificación Fecha Publicación

Dºº WO ºººº4 º9 º584 Aº (CORNELL UNIVERSITY) ºº"º8"º

Dºº S Kojima et al Tetrahedron Letters 998 vol º9 pags 5 9 º5º 4º" "Fluorescent properties of model chromophores of tyrosineº substituted m utants of A equorea green f luorescent proteon (GFº) " pags 5º4º 5 4 compuestos 5 º998

Dºº K M Khan et al Bioorganic & Medicinal Chemistr y vol 4 pags ººº" " Oxazolones: ne w t yrosinase inhibitors; synthesis an d t heir st ructureºactivity relationships" pag 8 esquema º apartado 4" parte experimental

Dº4 US ºººº4ºº 844 A (ABBOTT LABORATORIES) ºº"º8"º

2. Declaración motivada según los artículos 29.6 y 29.7 del Reglamento de ejecución de la Ley 11/1986, de 20 de marzo, de Patentes sobre la novedad y la actividad inventiva; citas y explicaciones en apoyo de esta declaración La solicitud se refiere a los compuestos de fórmula (I) de las reivindicaciones ººº al procedimiento para su obtención en las reivindicaciones y a su uso farmaceutico como inhibidores de calpaina (reivindicación ºº) "

El doc umento Dº d ivulga ( ver r eivindicaciones 4 f igura ºA pagina 84 ejemplo º) co mpuestos de f 6rmula ( I) ( ver reivindicaciónº de D º) que coinciden con los de fórmula (I) de la solicitud por tanto las reivindicaciones º º de la solicitud carecen de novedad" El documento Dº divulga estructuras de 5 azolona ver compuestos 5 en la pagina 5 º4º de Dº como las descritas en la solicitud" A demas divulga e l pr ocedimiento par a s u si ntesis ve r pag ina 5 º4º p or r eacción d e l os correspondientes aldehidos aromaticos y N ºacetilglicina como se describe en las reivindicaciones y 8 de la solicitud; otras secuencias sinteticas descritas en la solicitud tal como las reivindicaciones 4 y 9 para obtener las imidazolonas y oxazolonas de la reivindicación de la solicitud son evidentes para un tecnico en la materia pues este optara por el procedimiento mas adecuado dependiendo de los sustituyentes seleccionados en el producto final sin que ello suponga una actividad inventiva ya que se trata de reacciones usuales en sintesis organica" En consecuencia las reivindicaciones de la solicitud carecen de novedad y actividad inventiva" El documento Dº divulga oxazolonas como las representadas en la fórmula (I) de la solicitud y el procedimiento para su preparación por reacción del aldehido con el derivado adecuado de acilglicina (ver esquema º pagina ººº8 y apartado 4" de la parte experimental de D º) por las mismas razones expuestas para Dº el documento Dº anula la novedad y actividad inventiva de las reivindicaciones "

Respecto a la reivindicación se considera que el documento D4 es el mas próximo del estado de la tecnica en D4 se divulga la utilidad farmaceutica de l os compuestos de carboxamidas heterociclicas de fórmula (I) (ver resumen) no se ha encontrado divulgada la actividad como inhibidores de calpaina de los compuestos de fórmula (I) de la solicitud por lo que se co nsidera que la r eivindicación ºº t iene nov edad y actividad i nventiva ya que un t ecnico en l a m ateria no pod ria presuponer la citada actividad sin disponer de los correspondientes datos experimentales"

En consecuencia las reivindicaciones carecen de novedad y actividad inventiva y la reivindicación ºº cumple con los criterios establecidos en los Art" º"º y 8"º de la Ley de ºatentes ºº4º 98º"

Informe del Estado de la Tecnica agina 444