Composiciones monovalentes para la unión a CD40L y procedimientos de uso.

Uso de un polipéptido de anticuerpo que comprende un polipéptido de dominio variable sencillo de anticuerpo enla preparación de un medicamento para el tratamiento o la prevención de un síntoma de enfermedadautoinmunitaria,

en el que dicho polipéptido de dominio variable sencillo es monovalente para unión con CD40L(gp39) y antagoniza una actividad de CD40 o CD40L o de ambos, y en el que dicho polipéptido de anticuerpo inhibela unión de un dominio variable sencillo de anticuerpo que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEC ID Nº:26 con CD40L.

Composiciones monovalentes para la unión a CD40L y procedimientos de uso

Antecedentes de la invención CD40 es una molécula de glucoproteína de superficie celular de 50 kD expresada en la superficie de linfocitos B maduros e inmaduros, macrófagos, células dendríticas foliculares, epitelio tímico, epitelio basal normal, y algunas líneas celulares derivadas de tumores. La molécula CD40 es un miembro de la familia de receptores de TNF, y tiene importantes funciones de señalización que conducen a diversos efectos posteriores en diversos tipos celulares. Estudios tempranos muestran que la reticulación de CD40 sobre la superficie de los linfocitos B con un anticuerpo da como resultado la proliferación y activación de linfocitos B. La reticulación de CD40 con anticuerpos en presencia de IL4 induce la proliferación y cambio de clase in vitro, la agregación de linfocitos B mediante LFA-1 (Gordon y col., 1988, J. Immunol. 140: 1425) , y la fosforilación de serina/treonina y tirosina de diversos sustratos intracelulares (Gordon y col., 1988, supra; Uckun y col., 1991, J. Biol. Chem. 266: 17478) . Los anticuerpos monoclonales anti-CD40 también sensibilizan los linfocitos B para que proliferen en respuesta a agentes tales como PMA (Gordon y col., 1987, Eur. J. Immunol. 17: 1535) y anticuerpos anti-CD20 (Clark y Ledbetter, 1986, Proc. Natl. Acad. Sci. Estados Unidos 83: 4494) .

La homología del receptor de CD40 y estudios de reticulación de anticuerpos muestran una función principal de CD40 en la activación de linfocitos B que estimulan la búsqueda de un ligando natural. Se descubrió un mutante de la línea de linfocitos T Jurkat que activa constitutivamente linfocitos B humanos para secretar inmunoglobulina (Yellin y col., 1991, J. Immunol. 147: 3389-3395) . Se generó un anticuerpo monoclonal, denominado 5c8, que reaccionaba específicamente con la línea mutante, pero no con la línea de células Jurkat parental. El anticuerpo 5c8 inmunoprecipita un polipéptido de la superficie celular de 30 kD (más precisamente, 29, 3 kD, 261 aminoácidos) y se descubrió que inhibía específicamente la función auxiliar de los linfocitos B en la línea celular mutante. (Lederman y col., 1992, J. Exp. Med., 175: 1091-1101; Lederman y col., 1992, J. Immunol. 149: 3817-3826; Lederman y col., 1993, Curr. Opin. Immunol. 5: 439-444) . El ligando polipeptídico de 30 kD del anticuerpo 5c8 se denominó T-BAM, por la molécula activadora de linfocitos T-B. Una segunda línea de estudios usó técnicas de clonación molecular para identificar polipéptidos que se unen específicamente a la molécula CD40. Clones de ADNc para un ligando específico de CD40 se identificaron en un ensayo de unión a CD40 y como alternativa se denominó ligando CD40 (CD40L) , gp39, CD154 o TRAP (Graf y col., 1992, Eur. J. Immunol. 22: 3191-3194; Armitage y col., 1992, Nature 357: 80-82; y Aruffo y col., 1993, Cell 72: 291-300) . Posteriormente, se descubrió que el clon CD40L tenía la misma estructura que T-BAM (Covey y col., 1994, Mol. Immunol. 31: 471-484) . La proteína CD40L humana muestra una identidad del 82, 8 % y 77, 4 % en el ácido nucleico y aminoácidos, respectivamente, con una proteína similar aislada de células de timoma EL4 murino. Ambas proteínas son ligandos del antígeno de superficie celular CD40 expresado en linfocitos B en reposo. También se ha descrito que CD40L como IMD3, una proteína implicada en el síndrome de inmunodeficiencia hiper-IgM.

El gen humano que codifica CD40L mapea el cromosoma Xq26.3-q27. El gen contiene cinco exones. Se han descubierto deleciones, mutaciones puntuales y mutaciones por desplazamiento de marco agrupadas dentro de una región limitada del dominio extracelular de CD40L como la base de un síndrome raro de inmunodeficiencia asociado al cromosoma X (síndrome de inmunodeficiencia hiper-IgM, HIGM1) caracterizado por infecciones bacterianas recurrentes, niveles séricos muy bajos o ausencia de IgG, IgA e IgE y niveles séricos normales a aumentados de IgM e IgD. Se han descubierto mutaciones causalmente relacionadas que consisten en deleciones agrupadas que surgen por mutaciones donantes de corte y empalme con salto de exón, mutaciones aceptoras de corte y empalme con uso de un sitio de corte y empalme críptico y acontecimientos de deleción/inserción con la creación de un nuevo sitio de corte y empalme.

CD40L se expresa en linfocitos T CD4+ activados, pero no en reposo y se ha descubierto que desempeña una función particularmente importante en la respuesta inmunitaria humoral, que está asociada a la proliferación de linfocitos B, producción de anticuerpos y citocinas y viabilidad celular. La deleción o mutación de CD40L in vivo conduce a inmunodeficiencia grave tanto en ratones como en seres humanos, caracterizada por hipogammaglobulinemia y déficits de linfocitos T en la inmunidad mediada por células (Chess, C., 2001, in Therapeutic Immunology, 2ª edición, Austen, K.F., Burakoff, S., Rosen, F. y Strom, T., eds., Blackwell Sciences, págs. 441-456) . Los linfocitos T CD4+ humanos infectados por el VIH1, que produce grave disfunción en la inmunidad celular, pero paradójicamente da como resultado una activación policlonal intensa de los linfocitos B, no expresan CD40L. La expresión génica y en la superficie de células CD40L por linfocitos B activados se ha demostrado que está deprimida en un subgrupo de pacientes con inmunodeficiencia variable común (IVC) . Por tanto, la señalización ineficaz mediante CD40 puede ser responsable, al menos en parte, de la incorrecta diferenciación de los linfocitos B en estos pacientes.

Las consecuencias funcionales de la unión de CD40L a CD40 incluye, por ejemplo, a) rescate de linfocitos B de apoptosis inducida por Fas o reticulación de IgM, b) inducción de moléculas coestimuladoras CD80 (B7-1) y CD86 (B7-2) que interactúan con CD28 y CD152 (CTLA-4) sobre la superficie de linfocitos T activados; c) expresión aumentada de otras moléculas de activación de la superficie celular incluyendo CD23, CD54, CD95 y linfotoxina-a; y d) inducción del cambio de clase de inmunoglobulina (véase Chess, citado anteriormente, y las referencias 25, 44 y

47. 60 citadas en su dicho documento) . La unión de CD40L a CD40 también aumenta las funciones presentadoras de antígeno de las células dendríticas, inducen el mantenimiento de altos niveles de antígenos MHC de clase II y regulación positiva de moléculas accesorias incluyendo CD58 (LFA-3) . CD40L induce la producción de citocinas y la actividad tumoricida en monocitos de sangre periférica. CD40L también coestimula la proliferación de linfocitos T activados y la coestimulación viene acompañada por la producción de IFN-!, TNF-∀ e IL2. La expresión de CD40L en linfocitos T auxiliares murinos y en linfocitos T CD4+ está inhibida por IFN-!, y está inhibida en linfocitos T auxiliares de tipo 2 mediante TGF-#.

CD40L regula positivamente la expresión de CD54 por células de Hodgkin y Reed-Stemberg cultivadas. El aumento de la expresión en superficie de CD54 va acompañado del aumento en la diseminación de CD54 unido a la superficie.

También se ha sugerido que CD40L es importante en la inducción de tolerancia a CD80 y CD86, que está regulada positivamente por CD40L, interacciona con CD28 para proporcionar coestimulación esencial de linfocitos T en concierto con la activación de receptores de linfocitos T que da como resultado la activación completa de linfocitos T. En ausencia de CD80 y de la activación de CD28 desencadenada por CD86, la anergia o tolerancia se produce como consecuencia de la estimulación antigénica (Linsley y Ledbetter, 1993, Ann. Rev. Immunol. 11: 191-212; Jenkins y col., 1993, Curr Opin. Immunol. 5: 361-367; y Boussiotis y col., 1996, Immunol. Rev. 153: 5-26) .

La ruta de CD40L/CD40 se ha implicado en la sensibilización in vivo de linfocitos T citotóxicos CD8+ (CTS) por linfocitos T CD4+. Como se observa, CD40L expresado en la superficie de linfocitos T CD4+ activados interacciona con CD40 expresada en células dendríticas, induciendo a las células dendríticas a expresar más MHC y la señalización a través de CD40 puede sustituir la necesidad de linfocitos T auxiliares CD4+ en la sensibilización de respuestas CTL CD8+. El bloqueo de CD40L inhibe la sensibilización de CTL, resaltando la función vital de las interacciones CD40L/CD40 en la sensibilización de CTL por linfocitos T auxiliares (Ridge y col., 1998, Nature 393: 474-478; Schoenberger y col., 1998, Nature 393: 480-483; Bennett y col., 1998, Nature 393: 478-480) .

CD40L también puede mediar interacciones funcionales de linfocitos T CD4+ con otras células que expresan CD40, tales como fibroblastos, células sinoviales y células endoteliales (Yellin y col., 1995, J. Leuko. Biol. 58: 209-216; Yellin... [Seguir leyendo]

1. Uso de un polipéptido de anticuerpo que comprende un polipéptido de dominio variable sencillo de anticuerpo en la preparación de un medicamento para el tratamiento o la prevención de un síntoma de enfermedad autoinmunitaria, en el que dicho polipéptido de dominio variable sencillo es monovalente para unión con CD40L (gp39) y antagoniza una actividad de CD40 o CD40L o de ambos, y en el que dicho polipéptido de anticuerpo inhibe la unión de un dominio variable sencillo de anticuerpo que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEC ID Nº: 26 con CD40L.

2. El uso de acuerdo con la reivindicación 1 en el que dicha enfermedad autoinmunitaria es una enfermedad seleccionada del grupo que consiste en lupus eritematoso sistémico, esclerosis múltiple, artritis reumatoide, diabetes, rechazo de aloinjerto, trasplante y rechazo de xenoinjertos.

3. El uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2 en el que dicho polipéptido de anticuerpo inhibe la unión de CD40L con CD40.

4. El uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que dicho polipéptido de anticuerpo consiste en el polipéptido de dominio variable sencillo.

5. El uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 en el que dicho polipéptido de dominio variable sencillo es un polipéptido de dominio variable sencillo de anticuerpo humano.

6. El uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 en el que dicho polipéptido de dominio variable sencillo es un dominio VH o VL.

7. El uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en el que dicho polipéptido de anticuerpo es humano e inhibe la unión de CD40L con CD40 con una CI50 en el intervalo de 20 pM a 1, 5 %M

8. El uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 en el que dicho polipéptido de dominio variable sencillo comprende la secuencia de aminoácidos de CDR1, CDR2 y CDR3 de la SEC ID Nº: 26.

9. El uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 en el que dicho polipéptido de anticuerpo tiene una secuencia de aminoácidos que es al menos un 80 % homóloga a la SEC ID Nº: 26.

10. El uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 en el que dicho polipéptido de anticuerpo tiene una secuencia de aminoácidos que es idéntica a la SEC ID Nº: 26.

11. El uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10 en el que la unión de dicho polipéptido de anticuerpo con CD40L no agoniza sustanciamente la actividad de CD40 y/o CD40L.

12. El uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11 en el que la presencia de dicho polipéptido de anticuerpo en un ensayo de agregación plaquetaria convencional no da como resultado la agregación de más del 25 % sobre la agregación observada en un ensayo de control negativo.

13. El uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12 en el que el polipéptido de dominio variable sencillo está presente como un homo-o heteromultímero con dominios VH o VL adicionales, en el que el polipéptido de dominio variable sencillo se une a CD40L independientemente de los dominios VH o VL adicionales.

14. Un polipéptido de anticuerpo que comprende o consiste en un dominio variable sencillo de anticuerpo que se une de forma específica y monovalente a CD40L, en el que dicho polipéptido inhibe sustancialmente la unión de CD40L con CD40, y en el que dicho polipéptido de anticuerpo inhibe la unión de un dominio variable sencillo de anticuerpo que comprende la secuencia de aminoácidos de SEC ID Nº: 26 a CD40L.

15. El polipéptido de anticuerpo de la reivindicación 14 en el que dicho polipéptido de anticuerpo es humano e inhibe la unión de CD40L con CD40 con una CI50 en el intervalo de 20 pM a 1, 5 %M.

16. El polipéptido de anticuerpo de la reivindicación 14 o 15 en el que dicho polipéptido de anticuerpo inhibe la unión de CD40 con CD40L, y no agoniza sustancialmente la señalización por CD40.

17. El polipéptido de anticuerpo de la reivindicación 14 o 15 en el que la unión de dicho polipéptido de anticuerpo con CD40L no induce sustancialmente fosforilación de JNK en linfocitos T Jurkat.

18. El polipéptido de anticuerpo de la reivindicación 14 o 15 en el que la unión de dicho polipéptido de anticuerpo con CD40L no induce sustancialmente secreción de IFN-! por linfocitos T Jurkat coestimulados con anticuerpo anti-CD3.

19. El polipéptido de anticuerpo de la reivindicación 14 o 15 en el que la presencia de dicho polipéptido de anticuerpo en un ensayo de agregación plaquetaria convencional no da como resultado la agregación de más del 25 % sobre la agregación observada en un ensayo de control negativo.

20. El polipéptido de anticuerpo de la reivindicación 14 o 15 que es monovalente para unión con CD40L (gp39) , en el que la presencia de dicho polipéptido de anticuerpo en un ensayo de agregación plaquetaria convencional no da como resultado la agregación de más del 25 % sobre la agregación observada en un ensayo de control negativo.

21. El polipéptido de anticuerpo de la reivindicación 14 o 15 en el que el polipéptido es humano y está ligado a PEG.

22. El polipéptido de anticuerpo unido a PEG de la reivindicación 21 que tiene un tamaño hidrodinámico de al menos 24 kD.

23. El polipéptido de anticuerpo ligado a PEG de la reivindicación 21 en el que dicho PEG está ligado a dicho anticuerpo en un resto de cisteína o de lisina.

24. El polipéptido de anticuerpo ligado a PEG de la reivindicación 21 en el que el tamaño de PEG total es de 20 a 60 kD, inclusives.

25. El polipéptido de anticuerpo ligado a PEG de la reivindicación 21 que tiene un tamaño hidrodinámico de al menos 200 kD.

26. El polipéptido de anticuerpo ligado a PEG de la reivindicación 21 que tiene una semivida in vivo aumentada en relación con la misma composición polipeptídica que carece de polietilenglicol ligado.

27. El polipéptido de anticuerpo ligado a PEG de la reivindicación 26 en el que la semivida ta de la composición polipeptídica aumenta en el 10 % o más.

28. El polipéptido de anticuerpo ligado a PEG de la reivindicación 26 en el que la semivida ta de la composición polipeptídica está en el intervalo de 0, 25 minutos a 12 horas.

29. El polipéptido de anticuerpo ligado a PEG de la reivindicación 26 en el que la semivida t# de la composición polipeptídica aumenta en el 10 % o más.

30. El polipéptido de anticuerpo ligado a PEG de la reivindicación 26 en el que la semivida t# está en el intervalo de 12 a 48 horas.

31. El polipéptido de anticuerpo de la reivindicación 14 o 15 que es humano y carece de un dominio Fc.

32. El polipéptido de anticuerpo de la reivindicación 31 en el que la presencia de dicho polipéptido de anticuerpo en un ensayo de agregación plaquetaria convencional no da como resultado la agregación de más del 25 % sobre la agregación observada en un ensayo de control negativo.

33. Un polipéptido de la reivindicación 14 o 15, en el que el polipéptido de anticuerpo comprende una o más regiones marco conservadas que comprenden una secuencia de aminoácidos que es la misma que la secuencia de aminoácidos de una región marco conservada correspondiente codificada por un segmento génico de anticuerpo de línea germinal humana, o la secuencia de aminoácidos de una o más de dichas regiones marco conservadas comprende conjuntamente hasta 5 diferencias de aminoácidos en relación con la secuencia de aminoácidos de dicha región marco conservada correspondiente codificada por un segmento génico de anticuerpo de línea germinal humana.

34. Un polipéptido de la reivindicación 14 o 15, en el que las secuencias de aminoácidos de FW1, FW2, FW3 y FW4 del polipéptido de anticuerpo son las mismas que las secuencias de aminoácidos de las regiones marco conservadas correspondientes codificadas por un segmento génico de anticuerpo de línea germinal humana, o las secuencias de aminoácidos de FW1, FW2, FW3 y FW4 contienen conjuntamente hasta 10 diferencias de aminoácidos en relación con las secuencias de aminoácidos de las regiones marco conservadas correspondientes codificadas por dicho segmento génico de anticuerpo de línea germinal humana.

35. El polipéptido de acuerdo con la reivindicación 34, en el que las secuencias de aminoácidos de dichas FW1, FW2 y FW3 del polipéptido de anticuerpo son las mismas que las secuencias de aminoácidos de regiones marco conservadas correspondientes codificadas por segmentos génicos de anticuerpo de línea germinal humana.

36. El polipéptido de acuerdo con la reivindicación 34, en el que dicho segmento génico de anticuerpo de línea germinal humana se selecciona del grupo que consiste en DP47, DP45, DP48 y DPK9.

37. Un polipéptido de anticuerpo de la reivindicación 14 o 15 en el que dicho polipéptido de dominio variable sencillo comprende la secuencia de aminoácidos de CDR1, CDR2 y CDR3 de la SEC ID Nº: 26.

38. Un polipéptido de anticuerpo de la reivindicación 14 o 15 en el que el polipéptido de dominio variable sencillo que se une a CD40L comprende la secuencia de la SEC ID Nº: 26.

39. Un polipéptido de anticuerpo de la reivindicación 14 o 15 en el que el polipéptido de dominio variable sencillo está presente como un homo-o heteromultímero con dominios VH o VL adicionales, en el que el polipéptido de

dominio variable sencillo se une a CD40L independientemente de los dominios VH o VL adicionales.

40. Una composición que comprende el polipéptido de anticuerpo de la reivindicación 14 o 15 y un segundo polipéptido de anticuerpo que se une a un ligando distinto de CD40L, en el que dicho polipéptido de anticuerpo que se une a un ligando distinto de CD40L se une a un ligando seleccionado del grupo que consiste en HSA, TNF∀, IL1, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, IL-12, IL-18, IFN-!, CD2, CD4, CD8, LFA1, LFA3, VLA4, CD80, B7-1, CD28, CD86.

8. 2, CTLA-4, CD28, molécula coestimuladora inducible (ICOS) , CD27, CD30, OX40, CD45, CD69, CD3, CD70, ligando de molécula coestimuladora inducible (ICOSL) , OX40L, HVEM (mediador de entrada del herpesvirus) , UGHT.

41. Una formulación farmacéutica de liberación prolongada que comprende un polipéptido de anticuerpo monovalente anti-CD40L de una cualquiera de las reivindicaciones 14 o 15.

42. Un ligando específico doble que comprende un polipéptido de dominio variable sencillo de anticuerpo de la reivindicación 14 que tiene una especificidad de unión con un primer antígeno y un segundo dominio variable sencillo que tiene una actividad de unión con un segundo antígeno, en el que el primer antígeno es CD40L y el segundo dominio variable sencillo es un antígeno de superficie de célula presentadora de antígenos o un antígeno de superficie de linfocito T.

43. Un ligando de acuerdo con la reivindicación 42 en el que el antígeno de superficie de célula presentadora de antígenos se selecciona del grupo que consiste en antígenos de superficie de macrófagos activados, antígenos de superficie de linfocitos B activados, antígenos de superficie de rutas de señalización co-estimuladoras y MHC.

44. Un ligando de acuerdo con la reivindicación 43 en el que el MHC es de clase II.

45. Un ligando de acuerdo con la reivindicación 44 en el que el MHC de clase II es alfa.

46. Un ligando de acuerdo con la reivindicación 44 en el que el MHC de clase II es beta.

47. Un ligando de acuerdo con la reivindicación 43 en el que el antígeno de superficie de célula presentadora de antígenos se selecciona del grupo que consiste en CD28, molécula coestimuladora inducible (ICOS) , CD27, CD30, OX40, CD45, CD69, CD3, CD70, ligando de molécula coestimuladora inducible (ICOSL) , OX40L, CD80, CD86, HVEM (mediador de entrada del herpesvirus) y LIGHT.

48. Un ligando de acuerdo con la reivindicación 43 en el que el antígeno de superficie de célula presentadora de antígenos se selecciona del grupo que consiste en CD28, molécula coestimuladora inducible (ICOS) , CD27, CD30, OX40, CD45, CD69 y CD3.

49. Un ligando de acuerdo con la reivindicación 43 en el que el antígeno de superficie es un antígeno de superficie de gen B7.

50. Un ligando de acuerdo con la reivindicación 49 en el que el antígeno de superficie de gen B7 es B7-2 o B7-1.

51. Un polipéptido de anticuerpo que comprende un polipéptido de dominio variable sencillo de anticuerpo para tratar

o prevenir un síntoma de enfermedad autoinmunitaria, en el que dicho polipéptido de dominio variable sencillo es monovalente para unión con CD40L (gp39) y antagoniza una actividad de CD40 o CD40L o ambas, y en el que dicho polipéptido de anticuerpo inhibe la unión de un dominio variable sencillo de anticuerpo que comprende la secuencia de aminoácidos de SEC ID Nº: 26 con CD40L.

52. El polipéptido de anticuerpo de acuerdo con la reivindicación 51 en el que dicha enfermedad autoinmunitarias es una enfermedad seleccionada del grupo que consiste en lupus eritematoso sistémico, esclerosis múltiple, artritis reumatoide, diabetes, rechazo de aloinjertos, trasplante y rechazo de xenoinjertos.

53. El polipéptido de anticuerpo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 51 o 52 en el que dicho polipéptido de anticuerpo inhibe la unión de CD40L con CD40.

54. El polipéptido de anticuerpo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 51 a 53 en el que dicho polipéptido de anticuerpo consiste en el polipéptido de dominio variable sencillo.

55. El polipéptido de anticuerpo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 51 a 54 en el que dicho polipéptido de dominio variable sencillo es un polipéptido de dominio variable sencillo de anticuerpo humano.

56. El polipéptido de anticuerpo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 51 a 55 en el que dicho polipéptido de dominio variable sencillo es un dominio VH o VL.

57. El polipéptido de anticuerpo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 51 a 56 en el que dicho polipéptido de anticuerpo es humano e inhibe la unión de CD40L con CD40 con una CI50 en el intervalo de 20 pM a 1, 5 %M.

58. El polipéptido de anticuerpo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 51 a 57 en el que dicho polipéptido de dominio variable sencillo comprende la secuencia de aminoácidos de CDR1, CDR2 y CDR3 de SEC ID Nº: 26.

59. El polipéptido de anticuerpo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 51 a 58 en el que dicho 5 polipéptido de anticuerpo tiene una secuencia de aminoácidos que es al menos un 80 % homóloga a la SEC ID Nº:

26.

60. El polipéptido de anticuerpo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 51 a 59, en el que dicho polipéptido de anticuerpo tiene una secuencia de aminoácidos que es idéntica a la SEC ID Nº: 26.

61. El polipéptido de anticuerpo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 51 a 60 en el que la unión de 10 dicho polipéptido de anticuerpo con CD40L no agoniza sustancialmente la actividad de CD40 y/o CD40L.

62. Un polipéptido de anticuerpo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 51 a 61 en el que la presencia de dicho polipéptido de anticuerpo en un ensayo de agregación plaquetaria convencional no da como resultado la agregación de más del 25 % sobre la agregación observada en un ensayo de control negativo.

63. El polipéptido de anticuerpo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 51 a 62 en el que el

polipéptido de dominio variable sencillo está presente como un homo-o heteromultímero con dominios VH o VL adicionales, en el que el polipéptido de dominio variable sencillo se une a CD40L independientemente de los dominios VH o VL adicionales.