Cepas de Lactobacillus plantarum como agentes hipocolesterolémicos.

Una composición que comprende una cantidad efectiva de al menos una de las cepas seleccionadas del grupoque consiste en Lactobacillus plantarum CECT 7527,

Lactobacillus plantarum CECT 7528 y Lactobacillus plantarumCECT 7529 o cepas mutantes de las mismas, donde las cepas mutantes se obtienen usando las cepas depositadascomo material de partida, y donde las cepas mutantes conservan o mejoran la actividad de disminución delcolesterol de las cepas parentales.

Cepas de Lactobacillus plantarum como agentes hipocolesterolémicos Esta solicitud reivindica el beneficio de la Solicitud de Patente Europea 09172613.3 presentada el 09.10.2009 y la Solicitud de Patente Provisional de EE. UU. Nº de Serie 61/265.095 presentada el 30.11.2009.

CAMPO DE LA INVENCIÓN

La presente invención se refiere a los campos de la medicina, la microbiología y la nutrición y, particularmente, a nuevas cepas probióticas de Lactobacillus plantarum para su uso en la reducción del colesterol.

ESTADO DE LA TÉCNICA

Los niveles anormalmente elevados de colesterol (hipercolesterolemia) están claramente asociados con enfermedad cardiovascular, ya que promueven el desarrollo de ateromas en las arterias.

Continuamente están desarrollándose potenciales productos alimenticios y agentes farmacéuticos hipocolesterolémicos para controlar el colesterol en suero en personas con niveles anormalmente elevados. Estos agentes farmacéuticos pueden basarse en la interrupción de la circulación enterohepática (EHC, del inglés enterohepatic circulation) de sales biliares. El metabolismo de las sales biliares y el metabolismo del colesterol están estrechamente relacionados. Las sales biliares son los productos finales excretados hidrosolubles de colesterol, y son esenciales para la emulsión de grasas en el tracto digestivo. Se sintetizan en el hígado, principalmente como glico-o tauro-conjugados. Las sales biliares se secretan varias veces al día (seis de promedio) en el duodeno, y pasan a través del yeyuno en el íleon. Durante el tránsito intestinal, la mayoría de las sales biliares se reabsorben para volver al hígado a través de la vena porta. Una pequeña proporción se pierde en las heces y esta pérdida se sintetiza de nuevo a partir de colesterol endógeno en el hígado. Un aumento de la cantidad de sales biliares que se pierde en las heces da como resultado una neosíntesis de colesterol aumentada, reduciendo por lo tanto eficazmente la reserva de colesterol endógeno. Un grupo de fármacos hipocolesterolémicos usados actualmente denominados resinas (Colestiramina, Colestipol, Colesevelam) son activos a través de este mecanismo de acción.

Aparte de los intentos farmacéuticos o quirúrgicos para disminuir los niveles de colesterol en suero a través de la interrupción de la EHC, se ha sugerido que la ingestión de determinadas células bacterianas también podría influir en los niveles de colesterol. Las bacterias intestinales pueden influir en los niveles de colesterol a través de la asimilación de colesterol exógeno de la dieta en la membrana bacteriana, o a través de la desconjugación de sales biliares. Durante el tránsito intestinal, las sales biliares experimentan varias transformaciones bacterianas, de las cuales la más importante es la desconjugación de sales biliares. La capacidad para desconjugar (o hidrolizar) sales biliares se encuentra en algunas especies de bacterias acidolácticas intestinales (LAB, del inglés Lactic Acid Bacteria) , pero también en otros géneros. Tras la desconjugación de sales biliares, se libera glicina o taurina del resto esteroideo de la molécula, dando como resultado la formación de sales biliares libres (desconjugadas) . Las sales biliares libres precipitan más fácilmente a bajo pH. También se reabsorben menos eficazmente que sus homólogos conjugados. Por lo tanto, las sales biliares desconjugadas se excretan más fácilmente en las heces que las sales biliares conjugadas. La desconjugación de sales biliares influye en la EHC mediante el aumento de la excreción de sales biliares, y se cree que es mucho más eficaz en la reducción de los niveles de colesterol en sangre que la simple retención de colesterol exógeno.

La hidrolasa de sales biliares (BSH, del inglés Bile Salt Hydrolase) , la enzima responsable de la desconjugación de sales biliares durante la EHC, se ha detectado en varias especies de LAB autóctonas en el tracto gastrointestinal. Tanaka et al. (véase “Screening of Lactic Acid Bacteria for Bile Salt Hydrolase Activity”, Journal of Dair y Science 1999, vol. 82, págs. 2530-35) evaluaron más de 300 cepas de LAB de los géneros Bifidobacterium y Lactobacillus, y las especies Lactococcus lactis, Leuconostoc mesenteroides y Streptococcus thermophilus. Los resultados obtenidos para 273 cepas mostraron que la actividad BSH está distribuida heterogéneamente entre las diferentes especies. De acuerdo con este estudio, casi todas las cepas bifidobacterianas tienen actividad BSH, mientras que esta actividad sólo puede encontrarse en cepas seleccionadas de lactobacilo.

Lactobacillus plantarum es una LAB aerotolerante Gram-positiva encontrada comúnmente en muchos productos alimenticios fermentados, así como en materia vegetal anaerobia. También está presente en la saliva (de la que se aisló por primera vez) . Las cepas de L. plantarum son especialmente adecuadas para la preparación industrial de productos alimenticios fermentados gracias a su buen índice de supervivencia a través del procesamiento industrial y del periodo de conservación, así como a su elevado perfil de acidificación y buenas propiedades organolépticas. Algunas cepas de L. plantarum también se consideran probióticos. Los probióticos son microorganismos vivos que, cuando se administran en cantidades adecuadas, confieren un beneficio para la salud al hospedador. Para ser denominadas probióticos, las bacterias deben satisfacer varios requisitos relacionados con su ausencia de toxicidad, viabilidad para alcanzar el tracto gastrointestinal inferior (GIT, del inglés gastrointestinal tract) y adhesión a la mucosa intestinal, entre otros. La mayoría de las bacterias probióticas pertenecen al grupo de las LAB pero, no obstante, en general se sabe que las características y beneficios de los probióticos son extremadamente dependientes de cada cepa, incluso entre LAB de la misma especie.

La cepa comercial L. plantarum 299v se considera generalmente un probiótico y se ha descrito que disminuye los niveles de fibrinógeno y colesterol en suero cuando se ingiere en forma de una bebida probiótica (véase Bukowska et al., “Decrease in fibrinogen and LDL-cholesterol levels upon supplementation of diet with Lactobacillus plantarum in subjects with moderately elevated cholesterol” Atherosclerosis 1998, vol. 137, págs. 437-38) . Sin embargo, la reducción del colesterol-LDL era muy moderada en estos estudios y estaba acompañada de una reducción leve similar del colesterol-HDL. No se han publicado datos relacionados con la BSHA de L. plantarum 299v.

Por lo tanto, es deseable proporcionar nuevas cepas de probióticos mejoradas para ser usadas como agentes hipocolesterolémicos.

SUMARIO DE LA INVENCIÓN

La presente invención proporciona nuevas cepas probióticas mejoradas para la reducción del colesterol en sangre y, por consiguiente, para la prevención y el tratamiento de trastornos cardiovasculares.

Los presentes inventores proporcionan tres nuevas cepas probióticas de Lactobacillus plantarum aisladas a partir de heces humanas.Se encontró sorprendentemente que las cepas tenían una elevada actividad BSH. Como se ha mencionado anteriormente, la estrecha relación existente entre la elevada actividad BSH bacteriana y la reducción de colesterol condiciona que las presentes cepas sean útiles como agentes hipocolesterolémicos. Los ejemplos a continuación demuestran que estas cepas tienen una actividad BSH significativamente superior en comparación con cepas de L. plantarum relevantes disponibles en el mercado, tales como L. plantarum 299v o la cepa de L. plantarum que está presente en la mezcla de probióticos comercial VSL#3. También se muestra que las cepas de la invención son eficaces en la reducción de colesterol del cultivo de medios que contienen colesterol soluble. Aunque cada una de las nuevas cepas demuestra por sí misma ventajas con respecto a cepas conocidas, estas ventajas se ven magnificadas cuando las tres cepas se usan juntas, mostrando por lo tanto un comportamiento sinérgico.

La actividad de disminución de los niveles de colesterol de las cepas de la invención también se ha demostrado in vivo. El ejemplo a continuación demuestra que un producto que contiene las cepas probióticas de la invención es particularmente efectivo en la reducción de colesterol cuando se administra a sujetos hipercolesterolémicos.

Por consiguiente, un primer aspecto de la invención se refiere a una composición que comprende una cantidad efectiva de al menos una de las cepas seleccionadas del grupo que consiste en Lactobacillus plantarum CECT 7527, Lactobacillus plantarum CECT 7528 y Lactobacillus plantarum CECT 7529, o cepas mutantes de las mismas, donde las cepas mutantes se obtienen usando las... [Seguir leyendo]

1. Una composición que comprende una cantidad efectiva de al menos una de las cepas seleccionadas del grupo que consiste en Lactobacillus plantarum CECT 7527, Lactobacillus plantarum CECT 7528 y Lactobacillus plantarum CECT 7529 o cepas mutantes de las mismas, donde las cepas mutantes se obtienen usando las cepas depositadas como material de partida, y donde las cepas mutantes conservan o mejoran la actividad de disminución del colesterol de las cepas parentales.

2. La composición según la reivindicación 1, que comprende una cantidad efectiva de al menos una de las cepas seleccionadas del grupo que consiste en Lactobacillus plantarum CECT 7527, Lactobacillus plantarum CECT 7528 y Lactobacillus plantarum CECT 7529.

3. La composición según la reivindicación 1, que comprende una cantidad efectiva de las cepas Lactobacillus plantarum CECT 7527, Lactobacillus plantarum CECT 7528 y Lactobacillus plantarum CECT 7529, o cepas mutantes de las mismas, donde las cepas mutantes se obtienen usando las cepas depositadas como material de partida, y donde las cepas mutantes conservan o mejoran la actividad de disminución del colesterol de las cepas parentales.

4. La composición según la reivindicación 3, que comprende una cantidad efectiva de las cepas Lactobacillus plantarum CECT 7527, Lactobacillus plantarum CECT 7528 y Lactobacillus plantarum CECT 7529.

5. La composición como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1-4, para su uso como probiótico.

6. La composición como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1-4, para su uso como agente de prevención y/o terapéutico.

7. La composición según la reivindicación 6, para su uso en la prevención y/o tratamiento de trastornos cardiovasculares.

8. La composición según cualquiera de las reivindicaciones 5-7, para su uso como un agente hipocolesterolémico.

9. La composición según cualquiera de las reivindicaciones 5-8, para su uso en combinación con estatinas.

10. La composición según cualquiera de las reivindicaciones 5-9, para su uso en sujetos que hiperabsorben esterol.

11. Un producto farmacéutico y/o veterinario que comprende una cantidad efectiva de la composición como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1-4, junto con cantidades apropiadas de excipientes farmacéuticamente o veterinariamente aceptables.

12. Un producto comestible que comprende una cantidad efectiva de la composición como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1-4, junto con cantidades apropiadas de otros ingredientes comestibles.

13. Un producto comestible según la reivindicación 12, que es un complemento dietético.

14. Un producto comestible según la reivindicación 13, que es un nutracéutico.

15. Un producto comestible según cualquiera de las reivindicaciones 13-14, que está en forma de un comprimido, cápsula, jarabe o píldora.

16. Un producto comestible según la reivindicación 12, que es un producto lácteo o un producto cárnico.

17. Una cepa de Lactobacillus plantarum seleccionada del grupo que consiste en Lactobacillus plantarum CECT 7527, Lactobacillus plantarum CECT 7528 y Lactobacillus plantarum CECT 7529.

FIG. 1

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