Aparato y métodos para procesar tejidos con el fin de liberar células.

Aparato (10, 28, 44, 60, 98) para procesar tejido con el fin de liberar células del tejido,

que comprende:

una primera carcasa (12, 30, 46, 62, 100) que presenta una pared exterior (22, 32, 48, 64, 102) quetiene una forma seleccionada, estando esta primera carcasa adaptada para recibir una muestra de tejido y teniendo lapared exterior una superficie exterior (22b, 32b, 48b, 64b, 102b) y siendo lo suficientemente porosa para permitir el pasoa su través de material, incluyendo células, procedente del tejido;

una segunda carcasa (18, 36, 50, 68, 104) que encierra al menos en esencia la primera carcasa y

presenta una pared exterior (19, 37, 51, 71, 105) que tiene una forma seleccionada y una superficie interior (19a, 37a,51a, 71a, 105a) separada de la superficie exterior de la pared exterior de la primera carcasa y define un hueco (26, 38,55) entre ellas, teniendo el hueco entre la superficie exterior de la pared exterior de la primera carcasa y la superficieinterior de la pared exterior de la segunda carcasa una anchura uniforme o bien variando de manera continua enanchura; y

pudiendo moverse al menos una de las carcasas primera y segunda en relación con la otra de lascarcasas primera y segunda para ayudar a procesar tejido en la primera carcasa y al paso, a través de la pared exteriorporosa de la primera carcasa, de material, incluyendo células, procedente del tejido.

Aparato y métodos para procesar tejidos con el fin de liberar células.

Campo técnico

La presente invención se refiere en general a un aparato y a métodos para procesar tejidos con el fin de obtener células.

Antecedentes de la invención Con frecuencia en aplicaciones terapéuticas, de diagnóstico o de investigación se utiliza material biológico. Sin embargo, puede ser preferible que dicho material esté separado del tejido del que procede antes de su uso en estas aplicaciones. Por ejemplo, las células madre pueden proceder de diversos tipos de tejido, incluyendo tejido adiposo, músculo y sangre. Puede ser deseable separar las células madre del o de los tejidos antes de someterlas a un posterior procesamiento para su introducción en pacientes o para su uso en otras aplicaciones.

Para separar el material biológico del tejido, es frecuente someter el tejido a un proceso de disgregación o disociación. El proceso de disgregación tisular puede implicar medios mecánicos, tales como homogeneización y sonicación. En muchos casos, puede implicar también el uso de reactivos tales como enzimas que digieran, disuelvan o alteren la estructura del tejido para lograr la liberación del material deseado. Por ejemplo, para obtener células madre de tejido adiposo puede añadirse una solución enzimática, como de colagenasa, para digerir el componente tisular conjuntivo del tejido adiposo, liberando así las células madre deseadas. El uso de enzimas tales como la colagenasa puede requerir el control de la temperatura, del pH y de otras variables durante el proceso de disgregación del tejido.

Después o incluso durante la disgregación del tejido, el material deseado puede someterse a diversas etapas de purificación, que pueden incluir métodos de filtración, centrifugación y afinidad. Los documentos EP 0984060 A2 y EP 0512769 A2 describen dispositivos y métodos para la disgregación de tejidos y el aislamiento de células grasas o endoteliales. Sigue existiendo la necesidad de aparatos y métodos para procesar tejidos, incluyendo las etapas disgregación y purificación, para obtener materiales biológicos que incluyan células.

Sumario de la invención En un aspecto, la presente invención está dirigida a un aparato para procesar tejidos con el fin de liberar células del mismo. El aparato incluye una primera carcasa, que presenta una pared exterior de una forma determinada. La primera carcasa está adaptada para recibir una muestra de tejido. La pared exterior de la primera carcasa es lo suficientemente porosa para permitir el paso a su través de material, incluyendo células, procedente del tejido. El aparato incluye también una segunda carcasa, que encierra, al menos en esencia, la primera carcasa y presenta una pared exterior de una forma seleccionada y que está separada de la pared exterior de la primera carcasa, definiendo así un hueco entre ambas, donde el hueco entre la pared exterior de la primera carcasa y la pared exterior de la segunda carcasa tiene o bien una anchura uniforme o bien una anchura que varía de forma continua. Al menos una de las carcasas primera y segunda puede moverse en relación con la otra de las carcasas primera y segunda para ayudar al procesamiento del tejido en la primera carcasa y al paso a través de la pared exterior porosa de la primera carcasa del material, incluyendo células, procedente del tejido.

En una realización, la pared exterior tiene una forma seleccionada que, en esencia, es igual a la forma seleccionada de la pared exterior de la primera carcasa o que varía de manera continua en relación con la forma seleccionada de la pared exterior de la primera carcasa. Además, las carcasas primera y segunda están dispuestas forman un ángulo inferior a 90° con relación a un plano horizontal y la primera carcasa puede moverse en relación con la segunda carcasa para ayudar a mover un fluido sobre el tejido en la primera carcasa.

La invención está dirigida también a métodos para procesar tejidos. En un ejemplo, el procesamiento del tejido puede incluir la liberación de células del mismo. En este ejemplo, una muestra de tejido que contiene células se introduce en una primera carcasa. La primera carcasa presenta una pared exterior, que tiene una forma seleccionada y es lo suficientemente porosa para permitir el paso a su través de material, incluyendo células, procedente de la muestra de tejido. La primera carcasa está encerrada, al menos en esencia, en una segunda carcasa que presenta una pared exterior de una forma seleccionada que es esencialmente similar a la forma seleccionada de la pared exterior de la primera carcasa o que varía de manera continua en relación con la forma seleccionada de la pared exterior de la primera carcasa. El procesamiento incluye además la introducción de agentes de liberación de tejido en al menos una de las carcasas. El procesamiento incluye también mover al menos una de las carcasas primera y segunda en relación con la otra de las carcasas primera y segunda para procesar la muestra de tejido y para hacer pasar, a través de la pared exterior porosa de la primera carcasa, el material, incluyendo células, procedente de la muestra de tejido.

Breve descripción de las figuras

Fig. 1: vista esquemática en sección trasversal de un ejemplo de aparato para procesar tejido;

Fig. 2a: vista en perspectiva de un ejemplo de aparato para procesar tejido;

Fig. 2b: vista en perspectiva con un corte transversal parcial del ejemplo mostrado en la Fig. 2a; Fig. 2c: despiece del aparato de la Fig. 2a; Fig. 3a: vista en perspectiva de otro ejemplo de aparato para procesar tejido; Fig. 3b: vista en perspectiva con un corte transversal parcial del ejemplo mostrado en la Fig. 3a; Fig. 3c: despiece del aparato mostrado en la Fig. 3a; Fig. 4a: vista en perspectiva de otro ejemplo de un aparato para procesar tejido; Fig. 4b: despiece del aparato mostrado en la Fig. 4a;

Fig. 5: vista en sección transversal parcial del aparato para procesar tejido de la Fig. 4a;

Fig. 6: diagrama de flujo esquemático de ejemplos de etapas para procesar tejido;

Fig. 7: vista esquemática en sección transversal de otro ejemplo de un aparato para procesar tejido que emplea un

agitador.

Descripción detallada de la invención Aunque aquí se describen ejemplos detallados, debe entenderse que estos ejemplos tienen sólo fines ilustrativos y que diversos aspectos y características aquí descritos pueden tener utilidad solos o en combinación con otras características o aspectos de una manera distinta a la mostrada explícitamente, que será evidente para el técnico medio en la materia.

El objeto de la presente solicitud está dirigido, en general, a un aparato y a un método para procesar tejido con el fin de obtener material biológico. En un ejemplo preferente, el aparato se usa para procesar tejido adiposo con el fin de liberar células, en particular células madre.

En la figura 1 se muestra, en una vista esquemática en sección transversal, con la referencia global 10, un aparato para procesar tejidos conforme a la presente descripción. El aparato incluye una primera carcasa 12 con una pared exterior

22. La pared exterior tiene una superficie interior 22a y una superficie exterior 22b. La primera carcasa 12 está adaptada para recibir una muestra de tejido 16. El aparato 10 incluye también una segunda carcasa 18, con un tamaño tal que la primera carcasa 12 queda en esencia situada dentro de o encerrada por la segunda carcasa 18. La segunda carcasa 18 incluye una pared exterior 19 con una superficie interior 19a y una superficie exterior 19b.

Al menos una parte de la pared exterior 22 de la primera carcasa 12 es porosa. La parte porosa de la pared exterior 22 de la primera carcasa 12 permite que el material deseado pase a su través, mientras que otros materiales no deseado quedan retenidos en la primera carcasa. Por ejemplo, durante un proceso de disgregación, pueden liberarse células 20 de la muestra de tejido 16 y éstas pueden pasar desde el interior de la primera carcasa 12 a través de los poros de la pared exterior 22 de la primera carcasa 12, mientras que los fragmentos de tejido de mayor tamaño 24 pueden quedar retenidos en la primera carcasa 12. Las células 20 que pasan a través de la parte porosa de la pared exterior de la primera carcasa 12 pueden entrar en un espacio o hueco 26 entre las carcasas primera y segunda 12, 18.

En un ejemplo, las paredes exteriores 22, 19 de las carcasas primera y segunda 12, 18 tienen en esencia la misma forma. Más en concreto, la superficie interior 19a de la pared exterior 19 de la segunda carcasa 18 (en la realización mostrada) es en esencia cilíndrica y la superficie exterior 22b de la pared exterior 22 de la primera... [Seguir leyendo]

1. Aparato (10, 28, 44, 60, 98) para procesar tejido con el fin de liberar células del tejido, que comprende:

una primera carcasa (12, 30, 46, 62, 100) que presenta una pared exterior (22, 32, 48, 64, 102) que tiene una forma seleccionada, estando esta primera carcasa adaptada para recibir una muestra de tejido y teniendo la pared exterior una superficie exterior (22b, 32b, 48b, 64b, 102b) y siendo lo suficientemente porosa para permitir el paso a su través de material, incluyendo células, procedente del tejido;

una segunda carcasa (18, 36, 50, 68, 104) que encierra al menos en esencia la primera carcasa y presenta una pared exterior (19, 37, 51, 71, 105) que tiene una forma seleccionada y una superficie interior (19a, 37a, 51a, 71a, 105a) separada de la superficie exterior de la pared exterior de la primera carcasa y define un hueco (26, 38, 55) entre ellas, teniendo el hueco entre la superficie exterior de la pared exterior de la primera carcasa y la superficie interior de la pared exterior de la segunda carcasa una anchura uniforme o bien variando de manera continua en anchura; y

pudiendo moverse al menos una de las carcasas primera y segunda en relación con la otra de las carcasas primera y segunda para ayudar a procesar tejido en la primera carcasa y al paso, a través de la pared exterior porosa de la primera carcasa, de material, incluyendo células, procedente del tejido.

2. Aparato según la reivindicación 1, caracterizado porque las carcasas (30, 36, 46, 50, 62, 68) están adaptadas para encajar en una base (42, 56, 70) .

3. Aparato según la reivindicación 2, caracterizado porque la base (42, 56, 70) está adaptada para mover la primera carcasa (30, 46, 62) en relación con la segunda carcasa (36, 50, 68) .

4. Aparato según la reivindicación 3, caracterizado porque la base (42, 56, 70) está adaptada para hacer girar la primera carcasa (30, 46, 62) en relación con la segunda carcasa (36, 50, 68) .

5. Aparato según la reivindicación 2, caracterizado porque la base (70) está adaptada para sostener las carcasas primera y segunda (62, 68) en un ángulo inferior a 90° en relación con la superficie sobre la que descansa la base durante el procesamiento.

6. Aparato según la reivindicación 1, caracterizado porque la pared exterior (19, 37, 51, 71) de la segunda carcasa es esencialmente rígida.

7. Aparato según la reivindicación 1, caracterizado porque la pared exterior (22, 32, 48, 64) de la primera carcasa (12, 30, 46, 62) es lo suficientemente porosa para permitir el paso a su través de material, incluyendo células, con un diámetro de entre aproximadamente 5 y aproximadamente 3.000 μm.

8. Aparato según la reivindicación 1, caracterizado porque la pared exterior (22, 32, 48, 64) de la primera carcasa comprende además un panel de malla.

9. Aparato según la reivindicación 1, caracterizado porque las carcasas (12, 30, 46, 62, 18, 36, 50, 68) están adaptadas para recibir un agente de liberación de tejido en contacto con la muestra de tejido.

10. Aparato según la reivindicación 1, caracterizado porque comprende además un agitador (106) dispuesto con posibilidad de movimiento dentro de la primera carcasa (100) .

11. Método para procesar tejido con el fin de liberar células del tejido, que comprende:

a. introducir una muestra de tejido que contiene células en una primera carcasa (12, 30, 46, 62, 100) , presentando la primera carcasa una pared exterior (22, 32, 48, 64, 102) que tiene una forma seleccionada y es lo suficientemente porosa para permitir el paso a su través de material, incluyendo células, procedente de la muestra de tejido y estando la primera carcasa encerrada al menos en esencia en una segunda carcasa (18, 36, 50, 68, 104) , que presenta una pared exterior (19, 37, 51, 71, 105) con una forma seleccionada que esencialmente es similar a la forma seleccionada de la pared exterior de la primera carcasa o varía de manera continua en relación con la forma seleccionada de la pared exterior de la primera carcasa;

b. introducir agentes de liberación de tejido en al menos una de las carcasas; y

c. mover al menos una de las carcasas primera y segunda en relación con la otra de las carcasas primera y segunda para procesar la muestra de tejido y hacer pasar, a través de la pared exterior porosa de la primera carcasa, el material, incluyendo células, procedente de la muestra de tejido.

12. Método según la reivindicación 11, caracterizado porque el agente de liberación de tejido se añade a la primera carcasa (12, 30, 46, 62, 100) .

13. Método según la reivindicación 11, caracterizado porque el agente de liberación de tejido se añade a la segunda carcasa (18, 36, 50, 68, 104) .

14. Método según la reivindicación 11, caracterizado porque además comprende el vaciado de las células procedentes de la muestra de tejido a un aparato para su procesamiento posterior.

15. Método según la reivindicación 11, caracterizado porque el movimiento de al menos una de las carcasas primera y segunda comprende además el movimiento de la primera carcasa (12, 30, 46, 62) en relación con la segunda carcasa (18, 36, 50, 68) .

16. Método según la reivindicación 11, caracterizado porque la muestra de tejido es tejido adiposo.

17. Método según la reivindicación 11, caracterizado porque el material que incluye células comprende células 10 madre.

18. Método según la reivindicación 11, caracterizado porque el agente de liberación de tejido es colagenasa.