Procedimiento para obtener una población de células progenitoras estrómicas.
Un procedimiento in vitro para obtener una población de células progenitoras estromales a partir de una primera cantidad seleccionada de tejido adiposo que contiene células adiposas,
comprendiendo el procedimiento las etapas de:
- digerir dicha primera cantidad con una segunda cantidad de tampón enzimático del tipo usado en la disociación de tejidos orgánicos y biológicos para obtener una población de células libres;
- sembrar esta población de células libres en medios de cultivo necesarios para su expansión;
caracterizado porque dicho tejido adiposo es tejido adiposo blanco de procedencia subcutánea y dicha primera cantidad está entre 0,004 ml y 0,036 ml y esa segunda cantidad está entre 0,9 ml y 1,1 ml, y porque dicha segunda cantidad comprende medios disolventes y solubles que comprenden:
medio de Eagle modificado por Dulbecco (DMEM)
penicilina (1U/ml) y estreptomicina (1 mg/ml)
piruvato de sodio (1 mM) aminoácidos no esenciales que comprenden: L-alanina (0,89 mg/dl); L-asparagina H20 (1,5 mg/dl); ácido L-aspártico (1,33 mg/dl); ácido L-glutámico (1,47 mg/dl); glicina (0,75 mg/dl); L-prolina (1,15 mg/dl); L-serina (1,05 mg/dl) y en donde dichos medios solubles comprenden:
- mezcla de colagenasa de clase I y II; y porque
- dicha mezcla de colagenasa de clase I y II tiene una actividad enzimática entre 0,1 U/mg y 5,5 U/mg de producto liofilizado, que tiene una concentración enzimática entre 1,74 y 1,78 U/ml de dicho medio disolvente y en el que
dichos medios solubles comprenden:
- clostripaína a una concentración entre 0 U/mg y 7,6 U/mg de producto liofilizado;
- proteasas a una concentración entre 0,05 U/mg y 164 U/mg de producto liofilizado;
- tripsina a una concentración entre 0,23 U/mg y 2,3 U/mg de producto liofilizado en una forma seleccionada entre agentes individuales o en combinación.
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/IB2011/051614.
Solicitante: Rigenerand S.r.l.
Nacionalidad solicitante: Italia.
Dirección: Via Maestri del Lavoro, 4 41036 Medolla (MO) ITALIA.
Inventor/es: DOMINICI,MASSIMO, CAFARELLI,LUIGI, VERONESI,ELENA, PICCINNO,MARIA SERENA, PAOLUCCI,PAOLO, DE SANTIS,GIORGIO, PIERFRANCO,CONTE.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- C12M1/02 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12M EQUIPOS PARA ENZIMOLOGIA O MICROBIOLOGIA (instalaciones para la fermentación de estiércoles A01C 3/02; conservación de partes vivas de cuerpos humanos o animales A01N 1/02; aparatos de cervecería C12C; equipos para la fermentación del vino C12G; aparatos para preparar el vinagre C12J 1/10). › C12M 1/00 Equipos para enzimología o microbiología. › con medios de agitación; con medios de intercambio de calor.
- C12M3/08 C12M […] › C12M 3/00 Equipos para el cultivo de tejidos, de células humanas, animales o vegetales, o de virus. › Aparatos para la disgregación de tejidos.
- C12N5/00 C12 […] › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › Células no diferenciadas humanas, animales o vegetales, p. ej. líneas celulares; Tejidos; Su cultivo o conservación; Medios de cultivo para este fin (reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00).
- C12N5/0775 C12N […] › C12N 5/00 Células no diferenciadas humanas, animales o vegetales, p. ej. líneas celulares; Tejidos; Su cultivo o conservación; Medios de cultivo para este fin (reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00). › Células madre mesenquimales; Células madre derivadas de tejido adiposo.
PDF original: ES-2706376_T3.pdf
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