Anticuerpos antagonistas dirigidos contra un péptido relacionado con el gen de la calcitonina y procedimientos que utilizan los mismos.

Un anticuerpo antagonista anti-CGRP que es un anticuerpo humano o un anticuerpo humanizado con una afinidad de unión (KD) al α

-CGRP humano de 50 nM o menos cuando se mide por resonancia de plamón superficial a 37 ºC.

Anticuerpos antagonistas dirigidos contra un péptido relacionado con el gen de la calcitonina y procedimientos que utilizan los mismos.

Campo de la invención La presente invención se refiere al uso de anticuerpos antagonistas anti-CGRP para la prevención, mejoría, o tratamiento de los síntomas vasomotores, tales como los dolores de cabeza (por ejemplo, migraña) y sofocos relacionados con el CGRP.

Antecedente de la invención El CGRP (péptido relacionado con el gen de la calcitonina) es un neuropéptido de 37 aminoácidos, que pertenece a una familia de péptidos que incluye la calcitonina, adrenomedulina y amilina. En los seres humanos, existen dos formas de CGRP (a-CGRP y 1-CGRP) y tienen actividades similares. Varían en tres aminoácidos y muestran una distribución diferente. Hay al menos dos subtipos de receptores CGRP que también podrían indicar diferentes funciones. El CGRP es un neurotransmisor del sistema nervioso central, y se ha demostrado que es un potente vasodilatador en la periferia, donde las neuronas que contienen CGRP están estrechamente asociadas con los vasos sanguíneos. La vasodilatación mediada por el CGRP también se asocia con inflamación neurogénica, como parte de una cascada de acontecimientos que dan como resultado la extravasación de plasma y la vasodilatación del sistema microvascular y que está presente en la migraña.

El CGRP se ha destacado por su posible conexión con los síntomas vasomotores (Wyon y col. Scand. J. Urol. Nephrol. 35: 92-96 (2.001) ; Wyon y col. Menopause 7 (1) :25-30 (2.000) ) . Los síntomas vasomotores (VMS) , tales como los sofocos y la sudoración nocturna, son los síntomas más comunes que se asocian con la menopausia, que se presentan en el 60% al 80% de todas las mujeres después de la menopausia natural o inducida quirúrgicamente. Los sofocos probablemente son una respuesta adaptativa del sistema nervioso central (CNS) al declive de los esteroides sexuales (Freedman Am. J. Human Biol. 13:453-464 (2.001) ) . Hasta la fecha, las terapias más eficaces para los sofocos son los tratamientos basados en hormonas, incluyendo los estrógenos y algunas progestinas. Los tratamientos hormonales pueden ser eficaces para aliviar los sofocos, pero no son apropiados para todas las mujeres. Los síntomas psicológicos y emocionales que se observan, tales como nerviosismo, fatiga, irritabilidad, insomnio, depresión, pérdida de memoria, dolores de cabeza, ansiedad, nerviosismo o incapacidad para concentrarse se consideran como la causa de la falta de sueño que sigue a los sofocos y la sudoración nocturna (Kramer y col., En: Murphy y col., 3.sup.rd Int’l Symposium on Recent Advances in Urological Cancer Diagnosis and Treatment-Proceedings, París, Francia: SCI: 3-7 (1.992) ) .

Los hombres también experimentan sofocos después de la retirada de las hormonas esteroides (andrógenos) . Esto es cierto en casos de declive de andrógenos asociado a la edad (Katovich, y col., Proceedings of the Society for Experimental Biology & Medicine, 1.990, 193 (2) : 129-35) , así como en los casos extremos de supresión hormonal asociada con los tratamientos de cáncer de próstata (Berendsen, y col., European Journal of Pharmacology, 2.001, 419 (1) : 47-54) . Hasta un tercio de estos pacientes experimentarán síntomas frecuentes y persistentes, suficientemente graves para causar molestias significativas e incomodidad.

El CGRP es un potente vasodilatador que se ha implicado en la patología de otros síntomas vasodilatadores, tales como todas las formas de dolor de cabeza vascular, incluyendo migrañas (con o sin aura) y cefalea en racimos. Durham, N. Engl. J. Med. 350:1073-1075, 2.004. Los niveles de CRGP en el suero en la vena yugular externa están elevados en pacientes durante la migraña. Goadsbyetal., Ann. Neurol. 28:183-7, 1.990. La administración intravenosa de a-CGRP humano induce dolor de cabeza y migraña en pacientes que padecen migrañas sin aura, sugiriendo que el CGRP tiene un papel causante en la migraña. Lassen y col., Cephalalgia 22:54-61, 2.002.

La posible implicación del CGRP en la migraña ha sido la base para el desarrollo y ensayo de varios compuestos que inhiben la liberación de CGRP (por ejemplo, sumatriptano) , antagonicen el receptor del CGRP (por ejemplo, el dipéptido derivado BIBN409BS (Boehringer Ingelheim) ; CGRP (8 – 37) ) , o interactúen con una o más de las proteínas asociadas al receptor tales como, la proteína de membrana de actividad del receptor (RAMP) o la proteína componente del receptor (RCP) , las cuales afectan la unión del CGRP a sus receptores. Brain, S. y col., Trends in Pharmacological Sciences 23: 51- 53, 2.002. Los subtipos de adrenoceptores alfa-2 y los receptores de la adenosina A1 también controlan (inhiben) la liberación de CGRP y la activación del trigémino (Goadsby y col., Brain 125:1392401, 2.002) . El agonista del receptor de adenosina A1 GR79236 (metafradil) , que se ha demostrado que inhibe la vasodilatación neurogénica y la nocicepción del trigémino en seres humanos, también pueden tener una actividad anti-migrañas (Arulmani y col., Cephalalgia 25: 1082-1090, 2.005; Giffin y col., Cephalalgia 23: 287- 292, 2.003) .

Lo desconcertante en esta teoría es la observación de que el tratamiento con compuestos que inhiben exclusivamente la inflamación neurogénica (por ejemplo, antagonistas del receptor NK1 de la taquiquinina) o la activación trigémina (por ejemplo, los agonistas del receptor 5HT1D) han demostrado ser relativamente ineficaces en los tratamientos agudos de migraña, llevando a algunos investigadores a cuestionarse si la inhibición de la liberación de CGRP es el mecanismo de acción de primera elección en los tratamientos eficaces anti-migraña. Arulmani y col., Eur. J. Pharmacol. 500:315-330, 2.004.

La migraña es una afección neurológica compleja común que se caracteriza por ataques episódicos graves de dolor de cabeza y características asociadas, que pueden incluir náuseas, vómitos, sensibilidad a la luz, el ruido o movimiento. En algunos pacientes, el dolor de cabeza está precedido o acompañado por un aura. El dolor de cabeza puede ser intenso y también puede ser unilateral en ciertos pacientes.

Los ataques de migraña perturban la rutina diaria. En EE.UU. y Europa occidental, la prevalencia total de personas que sufren migrañas es del 11% de la población general (el 6% masculina; el 15-18% femenina) . Además, la frecuencia media de los ataques en un individuo es de 1, 5/mes. Aunque hay varios tratamientos disponibles para aliviar o reducir los síntomas, se recomienda la terapia preventiva para aquellos pacientes que tienen más de 3-4 ataques de migraña al mes. Goadsby y col. New Engl. J. Med. 346 (4) : 257-275, 2.002.

La variedad de intervenciones farmacológicas que han venido utilizándose para tratar la migraña y la variabilidad en la respuesta entre los pacientes son el testimonio de la naturaleza diversa de este trastorno. Por tanto, se han utilizado drogas relativamente no selectivas tales como los alcaloides del cornezuelo (por ejemplo, ergotamina, dihidroergotamina, metisergida) , que muestran actividad serotoninérgica, así como adrenérgica, noradrenérgica y dopaminérgica, durante más de ochenta años para tratar la migraña. Otros tratamientos incluyen opiáceos (por ejemplo, oxicodona) y antagonistas 1-adrenérgicos (por ejemplo, propanolol) . Algunos pacientes, habitualmente los que tienen síntomas más suaves, son capaces de controlar sus síntomas con remedios que no necesitan prescripción tales como uno o más agentes antiinflamatorios no esteroideos (AINE) , tales como una combinación de aspirina, paracetamol y cafeína (por ejemplo, Excedrin® Migraña) .

Más recientemente, algunos pacientes de migraña se han tratado con topiramato, un anticonvulsivante que bloquea los canales de sodio dependientes del voltaje y ciertos receptores de glutamato (AMPA-kainato) , potencia la actividad del receptor GABA-A y bloquea la anhidrasa carbónica. El éxito relativamente reciente de los receptores agonistas de la serotonina 5HT-1B/1D y/o 5HT-1a, tal como sumatriptano, en algunos pacientes ha llevado a los investigadores a proponer una etiología serotoninérgica del trastorno. Desafortunadamente, aunque algunos pacientes responden bien a este tratamiento, otros son relativamente resistentes a sus efectos.

Se ha postulado que el trastorno tiene su origen en una disfunción de un canal iónico en los núcleos aminérgicos del tronco encefálico, sin embargo, la patofisiología precisa de la migraña, aún no se comprende bien. Se ha demostrado que una forma de migraña, la migraña hemipléjica familiar, se asocia con mutaciones contrasentido en la subunidad a1 del canal del calcio tipo P/Q con apertura por voltaje, y se piensa... [Seguir leyendo]

1. Un anticuerpo antagonista anti-CGRP que es un anticuerpo humano o un anticuerpo humanizado con una afinidad de unión (KD) al a-CGRP humano de 50 nM o menos cuando se mide por resonancia de plamón superficial a 37 ºC.

2. El anticuerpo antagonista anti-CGRP de la reivindicación 1 en el que el anticuerpo antagonista anti-CGRP se une al fragmento del extremo C que tiene los aminoácido.

2. 37 del CGRP.

3. El anticuerpo antagonista anti-CGRP de la reivindicación 2, en el que el anticuerpo antagonista anti-CGRP se une a un epítopo del extremo C dentro de los aminoácido.

2. 37 del CGRP.

4. El anticuerpo de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 3, que comprende:

a. Una CDR3 VH como se expone en la SEC. ID Nº: 5, o una secuencia que se diferencia de la SEC. ID Nº: 5 por 1 o 2 sustituciones conservadoras de aminoácidos; y

b. Una CDR3 VL como se expone en la SEC. ID Nº: 8, o una secuencia que se diferencia de la SEC. ID Nº: 8 por 1 o 2 sustituciones conservadoras de aminoácidos.

5. Un anticuerpo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes que comprende un dominio VH que es al menos un 90% idéntico en la secuencia de aminoácidos a la SEC. ID Nº: 1 y un dominio VL que es al menos un 90% idéntico en la secuencia de aminoácidos a la SEC. ID Nº: 2.

6. El anticuerpo de acuerdo con la reivindicación 5, en el que el resto aminoacídico en la posición 99 de la SEC. ID Nº: 1 es L o está sustituido por A, N, S, T, V o R, y en el que el resto aminoacídico en la posición 100 de la SEC. ID Nº: 1 es A, o está sustituido por L, R, S, V, Y, C G, T, K o P.

7. Un anticuerpo de acuerdo con la reivindicación 1 que comprende un VH que comprende la SEC. ID Nº: 1 y un dominio VL que comprende la SEC. ID Nº: 2.

8. El anticuerpo de acuerdo con cualquier reivindicación precedente, en el que el anticuerpo es una molécula IgG, una IgM, una IgE, una IgA o una IgD, o se deriva a partir de estas.

9. El anticuerpo de acuerdo con cualquier reivindicación precedente, que comprende una cadena pesada producida por el vector de expresión con Nº de registro de ATCC PTA-6867.

10. El anticuerpo de acuerdo con cualquier reivindicación precedente, que comprende una cadena ligera producida por el vector de expresión con el Nº de registro de ATCC PTA-6866

11. El anticuerpo de acuerdo con cualquier reivindicación precedente, que consiste en una secuencia de cadena pesada de la SEC. ID Nº: 11 y una secuencia de cadena ligera de la SEC. ID Nº: 12.

12. El anticuerpo antagonista anti-CGRP de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-11, que comprende una región Fc con una función efectora defectuosa.

13. El anticuerpo antagonista anti-CGRP de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que el anticuerpo es un anticuerpo humanizado.

14. Una composición farmacéutica que comprende el anticuerpo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13 y un excipiente farmacéuticamente aceptable.

15. Un anticuerpo antagonista anti-CGRP de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13 para su uso en la prevención o tratamiento de al menos un síntoma vasomotor en un individuo.

16. El anticuerpo para su uso de acuerdo con la reivindicación 15, en el que dicho síntoma vasomotor es una migraña con o sin aura, migraña hemipléjica, cefalea en racimo, neuralgia migrañosa, cefalea crónica, o cefalea por tensión.

17. El anticuerpo para su uso de acuerdo con la reivindicación 15, en el que dicho síntoma vasomotor es el sofoco.

18. El anticuerpo para su uso de acuerdo con la reivindicación 15, en el que el anticuerpo se formula para su administración sistémica.