4''-azido-nucleósidos como compuestos anti-VHC.

Compuesto según la fórmula I

en la que:

R1 y R2: (i) se seleccionan independientemente en cada aparición de entre el grupo que consiste de hidrógeno,

alquilcarbonilo C1-6, alcoxicarbonilo C1-6 y aminoalquilcarbonilo C1-6, o(ii) conjuntamente los grupos R1 y R2 son C(≥O),R3 es hidrógeno, alquilcarbonilo C1-6, alcoxicarbonilo C1-6 o aminoalquilcarbonilo C1-6. o

o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, con la condición de que por lo menos uno de entre R1, R2 yR3 no sea hidrógeno y con la condición de que el compuesto de conformidad con la fórmula I no sea (2R,3R,4S,5R)-4-acetoxi-5-acetoximetil-5-azido-2-(2,4-dioxo-3,4-dihidro-2H-pirimidín-1-il)-tetrahidro-furán-3-il-éster de ácido acético.

4’-azido-nucleósidos como compuestos anti-VHC

La presente invención proporciona nucleósidos acilados que son profármacos de un inhibidor de la ARN polimerasa vírica dependiente de ARN del virus de la hepatitis C (VHC) . Estos compuestos administrados oralmente resultan fácilmente absorbidos en el tracto GI y revierten eficientemente al nucleósido parental en la sangre. Estos profármacos son inhibidores de la replicación vírica del ARN dependiente de ARN, y resultan útiles como inhibidores de la polimerasa NS5B del VHC, como inhibidores de la replicación del VHC, y para el tratamiento de la infección por hepatitis C en mamíferos. En particular, la invención se refiere a la utilización de compuestos de nucleósido pirimidina acilados que proporciona una absorción mejorada del fármaco al administrar el nucleósido oralmente.

ANTECEDENTES

El virus de la hepatitis C es la causa principal de enfermedad hepática crónica en todo el mundo (Boyer N. et al., J. Hepatol. 32:98-112, 2000) . Los pacientes infectados por el VHC presentan un riesgo de desarrollar cirrosis hepática y posteriormente, carcinoma hepatocelular, y por lo tanto el VHC es la indicación principal para el trasplante hepático.

El VHC se ha clasificado como miembro de la familia de virus Flaviviridae, que incluye los géneros flavivirus, pestivirus y hapaceivirus, que incluye los virus de la hepatitis C (Rice C.M., Flaviviridae: The viruses and their replication. en: Fields Virology, Editores: B. N. Fields, D. M. Knipe y P. M. Howley, Lippincott-Raven Publishers, Philadelphia, Pa., capítulo 30, 931-959, 1996) . El VHC es un virus con cubierta que contiene un genoma de ARN monocatenario de sentido positivo de aproximadamente 9, 4 kb. El genoma vírico consiste de una región 5' no traducida altamente conservada (UTR) , un marco de lectura abierta largo codificante de un precursor poliproteína de aproximadamente 3.011 aminoácidos, y un 3' UTR corto.

El análisis genético del VHC ha identificado seis genotipos principales que divergen en más de 30% de la secuencia del ADN. Se han diferenciado más de 30 subtipos. En los Estados Unidos, aproximadamente el 70% de los individuos infectados presentan una infección de tipo 1a y de tipo 1b. El tipo 1b es el subtipo más prevalente en Asia (X. Forns and J. Bukh, Clinics in Liver Disease 1999 3:693-716; J. Bukh et al., Semin. Liv. Dis. 15:41-63, 1995) . Por desgracia, las infecciones de tipo 1 son más resistentes a la terapia que los genotipos de tipo 2 ó 3 (N.N. Zein, Clin. Microbiol. Rev. 13:223-235, 2000) .

Entre las proteínas estructurales víricas se incluyen una proteína nuclear de nucleocápside (C) y dos glucoproteínas de cubierta, E1 y E2. El VHC también codifica dos proteasas, una metaloproteinasa dependiente de zinc codificada por la región NS2-NS3 y una serina proteasa codificada en la región NS3. Estas proteasas resultan necesarias para el corte de regiones específicas del precursor poliproteína en péptidos maduros. La mitad carboxilo de la proteína no estructural 5, NS5B, contiene la ARN polimerasa dependiente de ARN. La función de las proteínas no estructurales restantes, NS4A y NS4B, y la de NS5A (la mitad aminoterminal de la proteína no estructural 5) sigue sin conocerse. Se cree que la mayoría de las proteínas no estructurales codificadas por el genoma ARN del VHC se encuentran implicadas en la replicación del ARN.

En la actualidad se dispone de un número limitado de terapias aprobadas para el tratamiento de la infección por VHC. Se ha realizado una revisión de los enfoques terapéuticos nuevos y ya existentes para el tratamiento de la infección por VHC y la inhibición de la actividad de la polimerasa NS5B del VHC. R. G. Gish, Sem. Liver. Dis. 19:5, 1999; Di Besceglie, A. M. and Bacon, B. R., Scientific American, Octubre: 80-85, 1999; G. Lake-Bakaar, Current and Future Therapy for Chronic Hepatitis C Virus Liver Disease, Curr. Drug Targ. Infect Dis. 3 (3) :247-253, 2003; P. Hoffmann et al., Recent patent on experimental therapy for hepatitis C virus infection (1999-2002) , Exp. Opin. Ther. Patents 13 (11) :1707-1723, 2003; M. P. Walker et al., Promising Candidates for the treatment of chronic hepatitis C, Exp. Opin. Investing. Drugs 12 (8) :1269-1280, 2003; S. L. Tan et al., Hepatitis C Therapeutics: Current Status and Emerging Strategies, Nature Rev. Drug Discov. 1:867-881, 2002; J. Z. Wu and Z. Hong, Targeting NS5B RNA-Dependent RNA Polymerase for Anti-HCV Chemotherapy, Curr. Drug Targ. - Infect. Dis. 3 (3) :207-219, 2003.

En la actualidad se dispone de un número limitado de terapias aprobadas para el tratamiento de la infección por VHC. Se ha realizado una revisión de los enfoques terapéuticos nuevos y ya existentes para el tratamiento de la infección por VHC y la inhibición de la actividad de la polimerasa NS5B del VHC. R. G. Gish, Sem. Liver. Dis. 19:5, 1999; Di Besceglie, A. M. and Bacon, B. R., Scientific American, Octubre: 80-85, 1999; G. Lake-Bakaar, Current and Future Therapy for Chronic Hepatitis C Virus Liver Disease, Curr. Drug Targ. Infect Dis. 3 (3) :247-253, 2003; P. Hoffmann et al., Recent patents on experimental therapy for hepatitis C virus infection (1999-2002) , Exp. Opin. Ther. Patents 2003 13 (11) :1707-1723; F. F. Poordad et al. Developments in Hepatitis C therapy during 2000-2002, Exp. Opin. Emerging Drugs 8 (1) :9-25, 2003; M. P. Walker et al., Promising Candidates for the treatment of chronic hepatitis C, Exp. Opin. Investig. Drugs 12 (8) :1269-1280, 2003; S. L. Tan et al., Hepatitis C Therapeutics: Current Status and Emerging Strategies, Nature Rev. Drug Discov. 1:867-881, 2002; R. De Francesco et al. Approaching a new era for hepatitis C virus therapy: inhibitors of the NS3-4A serine protease and the NS5B RNA-dependent RNA polymerase, Antiviral Res. 58:1-16, 2003; Q. M. Wang et al. Hepatitis C virus encoded proteins: targets for antiviral

therapy, Drugs of the Future 25 (9) :933-8-944, 2000; J. A. Wu and Z. Hong, Targeting NS5B-Dependent RNA Polymerase for Anti-HCV Chemotherapy Cur. Drug Targ. Inf. Dis . 3:207-219, 2003. Las revisiones citan compuestos que en la actualidad se encuentran en diversas fases del proceso de desarrollo. La terapia de combinación con dos o tres agentes dirigidos contra la misma diana o dianas diferentes se ha convertido en una terapia estándar para evitar o enlentecer el desarrollo de cepas resistentes de un virus, y los compuestos dados a conocer en las revisiones anteriormente indicadas podrían utilizarse en terapia de combinación con compuestos de la presente invención, y estas revisiones se incorporan como referencia en su totalidad en la presente memoria.

la: R = C (=O) NH2 lb: R = C (=NH+) NH2

La ribavirina (1a, amida de ácido 1- ( (2R, 3R, 4S, 5R) -3, 4-dihidroxi-5-hidroximetil-tetrahidrofurán-2-il) -1H-[1, 2, 4]triazol3-carboxílico, VIRAZOLE®) es un análogo sintético de nucleósido antivírico de amplio espectro no inductor de interferón. La ribavirina presenta actividad in vitro contra varios virus ADN y ARN, incluyendo Flaviviridae (Gar y L. Davis, Gastroenterology 118:S104-S114, 2000) . En monoterapia, la ribavirina reduce los niveles de aminotransferasa sérica a niveles normales en 40% de los pacientes, pero no reduce los niveles séricos de ARN del VHC. La ribavirina también muestra toxicidad significativa y es conocido que induce anemia. La ribavirina es un inhibidor de la inosina monofosfato deshidrogenasa. La ribovirina no se encuentra aprobada para la monoterapia contra el VHC, aunque el compuesto ha sido aprobado para la terapia de combinación con interferón a-2a e interferón a-2b. La viramidina 1b es un profármaco convertido en 1a en los hepatocitos.

Los interferones (IFNs) se han encontrado disponibles para el tratamiento de la hepatitis crónica desde hace aproximadamente una década. Los IFNs son glucoproteínas producidas por células inmunológicas en respuesta a la infección vírica. Se reconocen dos tipos diferenciados de interferón: el tipo 1 incluye varios interferones alfa y un interferón º; el tipo 2 incluye el interferón y. El interferón de tipo 1 es producido principalmente por las células infectadas y protege a las células vecinas de la infección de novo. Los IFNs inhiben la replicación vírica de muchos virus, incluyendo el VHC, y utilizados como tratamiento único para la infección de hepatitis C, el IFN suprime el ARN del VHC sérico a niveles indetectables. Además, el IFN normaliza los niveles séricos de aminotransferasa. Por desgracia, los efectos del IFN son temporales. El cese de la terapia resulta en una tasa de recaída del 70% y únicamente 10% a 10% muestran una respuesta virológica sostenica con niveles séricos normales de alanina transferasa (L. B. Davis, supra)

Una limitación de los primeros intentos... [Seguir leyendo]

1. Compuesto según la fórmula I

(I)

en la que:

R1 y R2: (i) se seleccionan independientemente en cada aparición de entre el grupo que consiste de hidrógeno, alquilcarbonilo C1-6, alcoxicarbonilo C1-6 y aminoalquilcarbonilo C1-6, o (ii) conjuntamente los grupos R1 y R2 son C (=O) ,

R3 es hidrógeno, alquilcarbonilo C1-6, alcoxicarbonilo C1-6 o aminoalquilcarbonilo C1-6. o o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, con la condición de que por lo menos uno de entre R1, R2 y R3 no sea hidrógeno y con la condición de que el compuesto de conformidad con la fórmula I no sea (2R, 3R, 4S, 5R) 4-acetoxi-5-acetoximetil-5-azido-2- (2, 4-dioxo-3, 4-dihidro-2H-pirimidín-1-il) -tetrahidro-furán-3-il-éster de ácido acético,

2. Compuesto según la reivindicación 1, en el que R1, R2 y R3 son alquilcarbonilo C1-6.

3. Compuesto según la reivindicación 1, en el que R1 y R2 son alquilcarbonilo C1-6 y R3 es hidrógeno.

4. Compuesto según la reivindicación 1, en el que R1 y R2 son hidrógeno y R3 es alquilcarbonilo C1-6 o aminoalquilcarbonilo C1-6.

5. Compuesto según la reivindicación 1, que se selecciona de entre el grupo que consiste de:

(2R, 3S, 4R, 5R) -5-azido-2- (2, 4-dioxo-3, 4-dihidro-2H-pirimidín-1-il) -5-hidroximetil-4-propioniloxi-tetrahidro-furán-3-iléster de ácido propiónico, (2R, 3R, 4S, 5R) -5-azido-2- (2, 4-dioxo-3, 4-dihidro-2H-pirimidín-1-il) -4-isobutiriloxi-5-isobutiriloximetil-tetrahidro-furán-3il-éster de ácido isobutírico, (2R, 3S, 4R, 5R) -2-azido-2- (2, 4-dioxo-3, 4-dihidro-2H-pirimidín-1-il) -3, 4-bis-propioniloxi-tetrahidro-furán-2-ilmetil-éster

de ácido propiónico, (2R, 3S, 4R, 5R) -2-azido-5- (2, 4-dioxo-3, 4-dihidro-2H-pirimidín-1-il) -3, 4-bis-pentanoiloxi-tetrahidro-furán-2-ilmetil-éster de ácido pentanoico, y (2R, 3S, 4R, 5R) -2-azido-5- (2, 4-dioxo-3, 4-dihidro-2H-pirimidín-1-il) -3, 4-dihidroxi-tetrahidro-furán-2-ilmetil-éster de ácido propiónico,

6. Compuesto según la reivindicación 1, para uso en el tratamiento de una infección por virus de la hepatitis C (VHC) .

7. Compuesto según la reivindicación 6, en el que R1, R2 y R3 son alquilcarbonilo C1-6. 40

8. Compuesto según la reivindicación 6, en el que R1 y R2 son alquilcarbonilo C1-6 y R3 es hidrógeno.

9. Compuesto según la reivindicación 6, en el que R1 y R2 son hidrógenos y R3 es alquilcarbonilo C1-6 o

aminoalquilcarbonilo C1-6. 45

10. Compuesto según la reivindicación 7, en donde el tratamiento comprende además administrar por lo menos un modulador del sistema inmunológico y/o por lo menos un agente antiviral que inhibe la replicación del VHC.

11. Compuesto según la reivindicación 10, en el que el modulador del sistema inmunológico se selecciona de entre

el grupo que consiste de un interferón, una interleuquina, un factor de necrosis tumoral y un factor estimulante de colonias.

12. Compuesto según la reivindicación 11, en el que el modulador del sistema inmunológico es un interferón o un interferón derivatizado químicamente. 55

13. Compuesto según la reivindicación 10, que comprende además administrar por lo menos un agente antiviral adicional.

14. Compuesto según la reivindicación 13, en el que el compuesto antiviral se selecciona de entre el grupo que consiste de un inhibidor de proteasa de VHC, otro inhibidor de nucleósido polimerasa de VHC, un inhibidor de polimerasa de VHC no de nucleósidos, un inhibidor de helicasa de VHC, un inhibidor de primasa de VHC y un inhibidor de fusión de VHC.

15. Una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto según la reivindicación 1 mezclado con por lo menos un portador, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable.

Figura 1a Fosforilación de la 4’-AU (4’-azido-uridina) en células 2209-23 con replicón de VHC (incubación de 48 horas)

Figura 1b Fosforilación d.

4. AU (4’-azido-uridina) en hepatocitos primarios humanos ( incubación de 48 h ) Fosforilación d.

4. AC (4’-azido-uridina) en PBMCs humanas ( incubación de 1 hora )

Figura 2c Fosforilación d.

4. AC (4’-azido-citidina) en PBMCs humanas ( incubación de 120 h ) Figura 3a Fosforilación de l.

4. AU en hepatocitos primarios humanos ( incubación de 48 h )

Figura 3b Fosforilación d.

4. AU (4’-azido-uridina) en células de médula óseqa humana (BMCs) ( incubación de 48 h )