Vacunas que comprenden la proteína de núcleo HBC truncado mas adyuvantes basados en saponina.

Una composición, que comprende:

i) un HBcAg1-x (HBcAg ≥ Antígeno del núcleo de hepatitis B),

en donde x es un número entero del rango de 100 a160, o una variante de este antígeno, en donde más de 5 aminoácidos del HBcAg1-x se han eliminado, insertado,sustituido o adjuntado en los extremos del terminal C y/o N,

ii) un adyuvante que comprende una saponina, en donde el adyuvante es un complejo de saponina, y

iii) un HBsAg (HBsAg ≥ Antígeno de superficie de hepatitis B) o una variante de este antígeno, en donde más de 5aminoácidos del HBsAg se han eliminado, insertado, sustituido o adjuntado en los extremos.

Vacunas que comprenden la proteína de núcleo HBC truncado más adyuvantes basados en saponina

La presente invención se relaciona con una composición, con un proceso para la producción de una composición, con la composición que se puede obtener mediante este proceso, con una formulación farmacéutica, con el uso de la composición o de la formulación farmacéutica para terapia y/o profilaxis de infecciones por el virus de hepatitis B (VHB) y enfermedades mediadas por VHB, con el uso de la composición o de la formulación farmacéutica para la producción de un farmacéutico para terapia y/o para profilaxis de infecciones por VHB y enfermedades mediadas por VHB así como también con un proceso para terapia y/o para profilaxis de infecciones VHB y enfermedades mediadas por VHB.

De acuerdo con la Organización Mundial de la Salud (OMS) se estima que, más de 2 mil millones de personas viven hoy día o se han infectado con el virus de la hepatitis B (VHB) . El VHB sin embargo pertenece a los agentes patogénicos humanos más significativos con enormes efectos en la salud humana.

Las infecciones con VHB ocurren por medio de la sangre, en particular de la madre infectada al neonato durante o brevemente después del nacimiento, por medio de productos de sangre contaminados y a través de intercurso sexual. El VHB representa un virus hepatotrófico, que puede provocar infecciones agudas y crónicas. Aunque una infección en el nacimiento o en el primer mes de vida lleva, en el 90 % de los casos, a una infección crónica, esto solo se observa en aproximadamente 10 % de los casos con infección en la adultez. En aproximadamente 2 % de los adultos infectados, puede ocurrir una hepatitis fulminante (falla aguda del hígado) , que está ligada a un alto índice de muerte.

En primer lugar, una infección crónica puede no tener síntomas clínicos, pero se puede desarrollar después de un periodo de latencia de 10 a 30 años en enfermedad aguda del hígado (hepatitis B crónica, activa) debido a la persistencia del VHB y a la interacción patológica del sistema inmune con las células infectadas del hígado. El número de portadores VHB crónicos quienes desarrollan hepatitis B crónica es alrededor de 25 %. La hepatitis B crónica puede conducir finalmente a cirrosis hepática y/o carcinoma hepatocelular primario. Ambas enfermedades están vinculadas con un alto índice de muerte. Se estima que actualmente hay alrededor de 350 millones de portadores VHB crónicamente infectados en todo el mundo. Cada año, aproximadamente un millón de personas mueren por las consecuencias de una infección por VHB crónica.

Afortunadamente, las infecciones por VHB se pueden evitar mediante vacunas profilácticas contra hepatitis B. Tales vacunas, con base en el antígeno de superficie de hepatitis B purificado (HBsAg) del plasma de portadores crónicos, estuvieron disponibles por primera vez a principios de 1980. Finalmente, estos se reemplazan por los HBsAg producidos en forma recombinante. Sin embargo, en razón a que la vacunación no se introduce rutinariamente actualmente en todos los países, el VHB continuará representando una amenaza para la salud humana. En este contexto, es significativo que los portadores VHB crónicos se consideren como infecciosos y puedan transferir el virus.

La hepatitis B crónica es una enfermedad muy dinámica con un número de formas de aparición. En las etapas tempranas de infección crónica, uno habla de fase inmunotolerante, que se caracteriza por la presencia de marcadores víricos en el suero (VHB-ADN, HBsAg, HBeAg) así como también la carencia de problemas hepáticos. Alrededor de 25 % de los portadores VHB se transfieren en una fase inmunoactiva, en el curso en el cual aparecen los primeros síntomas del hígado y llega a ser necesaria una terapia. Durante esta fase inmunoactiva, el VHB-ADN en el suero se reduce de manera general y las transaminasas en suero aumentan en forma de tanda. Aunque el HBsAg continúa estando presente en el suero, existe un porcentaje pequeño (alrededor de 1 %) de los pacientes, que experimentan espontáneamente una conversión de suero de HBeAg positivo a HBeAg negativo. Esta conversión de suero es un signo para la entrada en la etapa de portador inactivo, que se caracteriza por una baja actividad del virus. En pocos casos, se observa adicionalmente una seroconversión de HBsAg positivo a anti-HBsAg positivo, lo que se considera un signo de una infección curada. La hepatitis B crónica activa se caracteriza por necroinflamación y fibrosis de los tejidos hepáticos, que conduce en el curso del tiempo a cirrosis y enfermedad hepática descompensada. Como complicación adicional, la cirrosis puede conducir a carcinoma hepatocelular primario, por lo tanto algunos portadores VHB crónicos también pueden desarrollar cáncer de hígado sin signos de cirrosis.

Las posibilidades de tratamiento para la hepatitis B crónica activa son muy limitadas. Actualmente, puede tener lugar un tratamiento con Interferón-a (por ejemplo Intrón A® o Roferón A®) o sustancias antivíricas (Lamivudina, Adefovir, Entecavir) . Se utiliza preferiblemente interferón- a con pacientes HBeAg positivos, alrededor de 30 % reaccionan con una conversión de suero HBeAg, que se correlaciona con un estado de portador inactivo. Como resultado, unos pocos pacientes (alrededor de 3 %) también muestran una seroconversión de HBsAg como signo de una curación completa. Sin embargo, el tratamiento con Interferón-a, está vinculado con efectos colaterales severos, que necesitan frecuentemente una detención temprana de la terapia. En pacientes HBeAg negativos, el Interferón-a muestra índices de respuesta bajos comparados con pacientes HBeAg positivos. Como alternativas, se puedenutilizar aquí las sustancias antivíricas, que pertenecen a la clase de inhibidores de transcriptasa inversa de nucleósido/nucleótido. Estas sustancias antivíricas inhiben la replicación del virus y, como resultado, evitan el avance de la enfermedad del hígado. Los índices de conversión de suero para pacientes HBeAg positivos son menores, comparado con Interferón-a, y no son mayores que la remisión de ocurrencia espontánea. El objetivo de la terapia antivírica es sin embargo retrasar la enfermedad mediante la reducción de la actividad vírica durante un tiempo no limitado. El uso a largo plazo de las sustancias antivíricas, sin embargo, se ve perjudicado mediante la aparición de mutantes resistentes al virus. En el caso de la sustancia más frecuentemente utilizada, Lamivudina, se ha observado un índice de resistencia de hasta 68 % dentro de cuatro años. La introducida más recientemente, Adefovir, parece provocar resistencia con menos frecuencia. El problema básico de resistencia al virus representa, sin embargo, una amenaza inherente para tratamiento a largo plazo, aún si las sustancias antivíricas se deben utilizar en combinación. Existe, por lo tanto, una necesidad urgente de medios terapéuticos adicionales para tratar la hepatitis B crónica. Particularmente son deseables agentes inmunomoduladores con pocos efectos colaterales y con la perspectiva de una terapia corta para los pacientes.

Tal alternativa es la inmunoterapia específica en la forma de una vacuna terapéutica. El concepto de una vacuna terapéutica es estimular específicamente el sistema inmune de un paciente con hepatitis B crónica en tal forma que se inicie una respuesta inmune adecuada contra el virus, que conduce finalmente al control del virus y frena el avance de la enfermedad hepática. Uno de los efectos obvios que debe mostrar una vacuna terapéutica es la ruptura a través de la inmunotolerancia que se encuentra en la presencia de grandes cantidades de antígenos víricos. La terapia, en particular, debe generar respuestas de célula T específicas de virus, en particular linfocitos T citotóxicos (CTL) contra diversos antígenos de VHB. Comparado con la situación para infección aguda, en pacientes con hepatitis B crónica, exactamente estas respuestas inmunes solo se pueden mostrar en un grado muy pequeño,

o no mostrar en lo absoluto. Las respuestas CTL específicas de virus fuerte se ven de manera general como representantes del control de infecciones víricas. El desarrollo de una vacuna terapéutica tiene, por lo tanto, como objetivo principal, la inducción de respuestas CTL antivíricas fuertes.

Las vacunas subunitarias recombinantes no son de manera general capaces de provocar respuestas CTL. En modelos de animal (ratón) , las respuestas CTL significativas con vacunas de ADN, en particular se pueden lograr vacunas de ADN con base en un vector de plásmido que codifica un antígeno del... [Seguir leyendo]

1. Una composición, que comprende:

i) un HBcAg1-x (HBcAg = Antígeno del núcleo de hepatitis B) , en donde x es un número entero del rango de 100 a 160, o una variante de este antígeno, en donde más de 5 aminoácidos del HBcAg1-x se han eliminado, insertado, sustituido o adjuntado en los extremos del terminal C y/o N,

ii) un adyuvante que comprende una saponina, en donde el adyuvante es un complejo de saponina, y

iii) un HBsAg (HBsAg = Antígeno de superficie de hepatitis B) o una variante de este antígeno, en donde más de 5 aminoácidos del HBsAg se han eliminado, insertado, sustituido o adjuntado en los extremos.

2. La composición de acuerdo con la reivindicación 1, en donde x es un número entero del rango de 140 a

149.

3. La composición de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en donde x es un número entero del rango de 144 a 146.

4. La composición de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde el adyuvante comprende componentes que son diferentes al agua o las soluciones salinas acuosas (a1) 0 a 95 % en peso de un fosfolípido, (a2) 0 a 95 % en peso de un esteroide, (a3) 5 a 100 % en peso de la saponina o el derivado de saponina, y

(a4) 0 a 20 % en peso de aditivos adicionales, en donde las cantidades en peso se basan respectivamente en el peso total del complejo de saponina, con la excepción de su porción de agua o sus porciones de soluciones salinas acuosa y la suma de los componentes (a1) a (a4) es 100 % en peso.

5. La composición de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde la relación de cantidad relativa entre los componentes de antígeno i) y iii) a adyuvante ii) subyace dentro de un rango de 1 : 20 a

: 1.

6. La composición de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde la concentración total de los componentes i) , ii) y iii) en la composición subyace dentro de un rango de 0.1 a 2, 000 μg/ml.

7. La composición de acuerdo con la reivindicación 1, que comprende

i) un HBcAg1-145,

ii) un complejo de saponina, y iii) un HBsAg.

8. La composición de acuerdo con la reivindicación 1, que comprende

i) un HBcAg1-144+I,

ii) un complejo de saponina, y iii) un HBsAg.

9. Un proceso para la preparación de una composición, que comprende las etapas del proceso I) -IV) :

I) provisión de un HBcAg1-x, en donde x es un número entero del rango de 100 a 160, o de una variante de este antígeno, en donde más de 5 aminoácidos del HBcAg1-x se han eliminado, insertado, sustituido o adjuntado en los extremos de terminal C y/o N,

II) provisión de un adyuvante que comprende una saponina, en donde el adyuvante es un complejo de saponina,

III) provisión de un HBsAg o de una variante de este antígeno, en donde más de 5 aminoácidos del HBsAg se han eliminado, insertado, sustituido o adjuntado en los extremos, y

IV) poner en contacto del HBcAg1-x, del adyuvante y del HBsAg.

10. El proceso de acuerdo con la reivindicación 9, en donde x es un número entero del rango de 140 a 149.

11. El proceso de acuerdo con la reivindicación 9 o 1 0, en donde x es un número entero del rango de 144 a

146.

12. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 9 a 11, en donde el adyuvante comprende, como componentes que son diferentes al agua o las soluciones salinas acuosas (a1) 0 a 95 % en peso de un fosfolípido, (a2) 0 a 95 % en peso de un esteroide,

(a3) 5 a 100 % en peso de la saponina o el derivado de saponina, y (a4) 0 a 20 % en peso aditivos adicionales, en donde las cantidades en peso se basan respectivamente en el peso total del complejo de saponina, con la excepción de su porción de agua o sus porciones de soluciones salinas acuosa y la suma de los componentes (a1) a (a4) es 100 % en peso.

13. Una composición que se puede obtener mediante un proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 9 a 12.

14. Una formulación farmacéutica, que comprende la composición de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 o 13 y aditivos adecuados.

15. El uso de la composición de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 o 13 para la producción de una formulación farmacéutica para terapia y/o para profilaxis de infecciones VHB y enfermedades mediadas por VHB.

16. El uso de la composición de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 o 13 para la preparación de una formulación farmacéutica para el tratamiento de infecciones VHB crónicas.

17. El uso de acuerdo con la reivindicación 15 o 16, en donde la infección VHB o la enfermedad mediada por VHB se ha originado por un virus HB cuyo genotipo o subtipo difiere del genotipo o subtipo del HBsAg comprendido en la composición.