Utilización de fracciones celulares del tejido adiposo para la regeneración tisular post-irradiación.

Utilización de células procedentes de la fracción del estroma vascular del tejido adiposo extramedular,

para la preparación de un medicamento destinado a favorecer la regeneración de la piel tras unas lesiones causadas por irradiación.

Utilización de fracciones celulares del tejido adiposo para la regeneración tisular post-irradiación.

La presente invención se refiere a la utilización de células que resultan de la fracción del estroma vascular del tejido adiposo extramedular, para favorecer la regeneración de la piel tras lesiones causadas por irradiación.

El proceso cicatricial necesita la utilización de mecanismos biológicos y moleculares complejos y perfectamente organizados, tales como la migración celular, la proliferación celular, o el depósito de matriz extracelular. Una lesión inducida constituye el punto de partida de una cascada de acontecimientos que comprenden unas interacciones entre factores de crecimiento locales, regionales y sistémicos, así como la participación a nivel celular de diferentes agentes tales como las células cepas de la médula ósea. Una perturbación en estos mecanismos complejos tiene consecuencias incapacitantes para los sujetos afectados, en particular unas consecuencias físicas o en su calidad de vida y pueden incluso provocar la muerte. Es el caso cuando aparecen infecciones y conducen, en los casos más graves, a amputaciones de miembros, o más generalmente a intervenciones quirúrgicas graves.

En el campo de las lesiones cutáneas, una herida provoca una destrucción más o menos profunda de los tejidos, y una hipoxia que conduce a una regulación de factores de crecimiento, una activación de la degradación de la matriz y una estimulación de la angiogénesis. Después de solamente algunas horas, la migración y la proliferación de células epidérmicas y dérmicas constituyen los factores que activan la re-epitelialización. La formación de una nueva red vascular es asimismo necesaria para sostener los tejidos nuevamente formados. Sin embargo, se ha demostrado que numerosas situaciones patológicas conducen a disfuncionamientos en la angiogénesis, a la pérdida de queratinocitos y deterioran así la regeneración de la piel.

Las terapias utilizadas actualmente recurren esencialmente a la cirugía, acompañadas a veces de la administración de medicamentos adaptados tales como antibióticos. También se han previsto unas terapias que recurren a unos factores de crecimiento, en particular con la administración de PDGF-BB y de bFGF, o también el recurso a terapias celulares. Éstas permiten favorecer la reparación de las heridas y se pueden utilizar solas o como complemento de otras terapias o cirugías. Unas técnicas que aplican unas células regeneradoras han experimentado un éxito relativo. Consisten en utilizar la habilidad de las células cepas para auto-renovarse indefinidamente, y para diferenciarse en células y tejidos maduros especializados. Sin embargo, estos métodos requieren unas tecnologías punta y generan costes muy importantes debido a la disponibilidad de las materias primas, a su obtención y a su purificación. Son asimismo muy dependientes de eventuales fenómenos de contaminación por microorganismos y de plazos relativamente importantes para la preparación de las materias primas. Estas terapias celulares parecen ser las más prometedoras.

Así, la solicitud US 2003/0082152 (1) describe de manera bastante general unos procedimientos de preparación de células cepas derivadas del tejido adiposo, así como su carácter pluripotente y el interés de estas células para la ingeniería tisular, la reparación de las heridas y la regeneración tisular in vivo y ex vivo. Los tipos de heridas para las cuales se pueden utilizar estas células para favorecer la cicatrización comprenden sólo unas heridas de origen mecánico. Este documento no indica en ningún sitio que también se puedan tratar unas lesiones inducidas por irradiación.

Asimismo, de Vries et al. 1995 (2) describe el ensayo de sustitutos dérmicos sembrados con diferentes tipos de poblaciones celulares sobre la cicatrización de lesiones cutáneas inducidas de manera mecánica. Las poblaciones celulares ensayadas incluyen unos fibroblastos autólogos, una población denominada fracción del estroma vascular (SVF) derivada del tejido adiposo, así como esta misma fracción estromal vascular en la que los fragmentos vasculares han sido retirados (SF) . Los resultados obtenidos en este artículo muestran que los sustitutos dérmicos sembrados con la población SF, al igual que los sustitutos sembrados con unos fibroblastos autólogos, permiten mejorar la cicatrización de la herida cutánea inducida de manera mecánica. También en este caso, no se describe ni se sugiere que se pudieran tratar de la misma manera unas lesiones inducidas por irradiaciones mucho más complejas.

Tal como se ha indicado anteriormente, diferentes estados patológicos perturban los fenómenos de reparación de las lesiones. Es el caso de las irradiaciones que modifican la angiogénesis y la re-epitelialización. Varios estudios han mostrado así que unas radiaciones podían conducir a una descamación seca asociada a una queratinización atípica de la piel, o bien a una pérdida de epidermis acompañada de ulceración. Se producen asimismo unos cambios vasculares, incluyendo unas oclusiones, unos edemas, unas trombosis, o unas pérdidas de vasos. Por ejemplo, a nivel cutáneo, las lesiones son de naturalezas diferentes de las que se observan en el caso de heridas u otras lesiones patológicas. Estos fenómenos se traducen por una ralentización del proceso de cicatrización.

En particular, la irradiación local cutánea afecta en gran medida al proceso cicatricial. Unas lesiones precoces, consideradas como procedentes del trastorno de la capa basal proliferante de la epidermis, y tardías, relacionadas con los trastorno de la dermis y de los tejidos subyacentes se manifestarán después de la exposición a fuertes dosis. El primer síntoma que se puede observar es la radiodermitis, definida como una reacción inflamatoria de la piel, equivalente a una quemadura de primer grado, y después la depilación. La dilatación de los capilares provoca

asimismo un eritema agudo. Por último, puede aparecer una descamación seca y húmeda algunos días después de una irradiación de 10 a 20 Gray y se caracteriza, por un lado, por una degeneración de los queratinocitos a nivel de la epidermis que conduce a su adelgazamiento y al aplanamiento de las papilas dérmicas y, por otro lado, por el hinchamiento y la proliferación del endotelio vascular. Los efectos tardíos se traducen por una isquemia que procede, probablemente, de la hiperproliferación de las células epiteliales supervivientes que provocan la oclusión localizada o parcial de las arteriolas y por una fibrosis mayor. Estos fenómenos fisiológicos no están presentes en las lesiones cutáneas de tipo herida infligida de manera mecánica, que son, por lo tanto, de un tipo diferente de las causadas por irradiación.

En particular, el hecho de que un medicamento sea eficaz para mejorar la cicatrización de una herida inducida de manera mecánica no implica necesariamente que este medicamento sea eficaz para el tratamiento de las lesiones, en particular cutáneas, relacionadas con una irradiación, haciendo intervenir la curación de una lesión postirradiación unos mecanismos mucho más complejos.

En este contexto post-irradiación, ya sea accidental o provocado por una radioterapia, es por lo tanto muy importante poder utilizar unos mecanismos eficaces de reparación de las lesiones, en particular cutáneas.

Para la utilización de terapias celulares, se han considerado diferentes fuentes de células cepas. Inicialmente, las células cepas se han aislado a partir de tejidos embrionarios, pero recientemente se ha demostrado la presencia de células cepas pluripotentes en diferentes tejidos adultos tales como la médula ósea, la piel, el cerebro, los músculos y el tejido adiposo. Dichas células cepas están así disponibles más fácilmente que unas células embrionarias, y su utilización no incluye los mismos problemas éticos. La utilización de células cepas está limitada por su bajo número en la mayoría de los tejidos adultos, y por la dificultad de extraerlas y purificarlas. Se han propuesto nuevas vías de acceso (3) para obtener células cepas, en particular a partir del tejido adiposo.

El tejido adiposo puede constituir en efecto un depósito importante, en el que las células cepas son comparativamente fáciles de aislar, y en unas cantidades relativamente importantes. Permiten además librarse de la existencia de un donante compatible, como es el caso durante la utilización de células que proceden de la médula ósea. Permiten asimismo considerar unos "auto-injertos", evitando así los fracasos... [Seguir leyendo]

1. Utilización de células procedentes de la fracción del estroma vascular del tejido adiposo extramedular, para la preparación de un medicamento destinado a favorecer la regeneración de la piel tras unas lesiones causadas por 5 irradiación.

2. Utilización según la reivindicación 1, caracterizada porque el medicamento está destinado a favorecer la regeneración de los queratinocitos.

3. Utilización según una de las reivindicaciones 1 a 2, caracterizada porque las lesiones son unas heridas cutáneas causadas por irradiación.

4. Utilización según una de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizada porque las lesiones están causadas por irradiación consecutiva a una radioterapia. 15

5. Utilización según una de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizada porque las lesiones están causadas por irradiación accidental.

6. Utilización según una de las reivindicaciones 1 a 5, caracterizada porque el medicamento se administra a título 20 preventivo, antes de la irradiación.

7. Utilización según una de las reivindicaciones 1 a 5, caracterizada porque el medicamento se administra a título curativo, después de la irradiación.

8. Utilización según la reivindicación 4, caracterizada porque el medicamento está destinado a ser administrado a pacientes que padecen cáncer.

9. Utilización según una de las reivindicaciones 1 a 8, caracterizada porque el medicamento se presenta en forma de una crema, de una pomada, de un pulverizador, de un gel, de ampollas y/o de solutos inyectables. 30

10. Utilización según una de las reivindicaciones 1 a 8, caracterizada porque el medicamento se presenta en forma de dermis equivalente.

11. Utilización según la reivindicación 10, caracterizada porque la dermis equivalente está destinada al tratamiento 35 de las quemaduras causadas por irradiación.