Un agente para su uso en la terapia y/o la prevención de las enfermedades renales,

que comprende como ingrediente eficaz una molécula de ácido nucleico que inhibe la expresión de la caseína cinasa 2.

Remedio o agente preventivo para una enfermedad renal y procedimiento para diagnosticar una enfermedad renal Campo de la técnica La presente invención se refiere a un agente para su uso en el tratamiento y/o la prevención de las enfermedades renales y a un procedimiento para el diagnóstico de las enfermedades renales.

Antecedentes de la técnica

El riñón es un órgano urinario par ubicado en la parte posterior de la cavidad del cuerpo, que sirve para mantener la homeostasis a través de: 1) la excreción de agua, 2) la excreción de metabolitos, en especial los componentes con nitrógeno, 3) la excreción de electrolitos, 4) la excreción de materias extrañas y 5) el ajuste de la presión osmótica de la sangre, la cantidad de líquido corporal y el equilibrio ácido-base, por medio de la generación de orina. El riñón es un órgano con importantes funciones fisiológicas tales como el ajuste de la tensión arterial a través de la producción y secreción de renina y prostaglandinas, el ajuste de la diferenciación y maduración de los eritrocitos en la médula ósea a través de la producción de eritropoyetina, y la activación de la 25-hidroxivitamina D, que es un precursor de la vitamina D (Blood, 68 (Supl.) , 170a, 1986, Proc Natl Acad Sci USA, 28, 1199, 1981) . El riñón es un agregado de aproximadamente 1.000.000 de unidades funcionales, llamadas nefronas, y cada nefrona comprende el glomérulo, la cápsula de Bowman, el túbulo renal proximal, el asa de Henle y el túbulo renal distal. Las nefronas se unen y forman un conducto colector y el conducto colector se abre en la pelvis renal. El glomérulo filtra la sangre a través de un conglomerado de capilares sanguíneos de forma esférica para producir la orina primitiva. La orina primitiva es sometida a reabsorción y secreción en los túbulos renales, lo que produce la orina final. Por lo general, los glomérulos tienen controles de manera tal que las sustancias que resultan necesarias en la sangre, en especial las proteínas del suero, no se escapan durante la etapa de filtración. Sin embargo, cuando existen trastornos en los glomérulos, se produce la proliferación de células mesangiales, un tipo de células constitutivas, y el aumento de la matriz periférica, de manera que la cantidad de proteínas excretadas en la orina aumenta. Las proteínas per se dañan los túbulos renales, por lo que al aumentar la cantidad de proteínas excretadas en la orina, se agrava el daño de los glomérulos. Este círculo vicioso disminuye rápidamente la función renal.

Las enfermedades renales representativas incluyen la nefritis glomerular y tubulointersticial y la nefropatía diabética. También se conoce el síndrome nefrítico agudo, el síndrome glomerulonefrítico de progresión rápida, el síndrome de hematuria recurrente o sostenida, el síndrome nefrítico crónico, la nefropatía diabética, la nefritis lúpica, la nefropatía por IgA, la pielitis crónica, la nefroesclerosis, la hipertensión renal, el riñón gotoso, la insuficiencia renal aguda o crónica, etcétera. Aunque las enfermedades del riñón presentan una gran variedad de patosis y complicaciones, cualquiera de ellas podrá seguir un curso grave hasta llegar a la insuficiencia renal. Los usos terapéuticos conocidos para las enfermedades renales realizados en función de la gravedad incluyen terapias para conservar la función renal, tales como la cura de reposo, la cura de dieta y el tratamiento farmacológico, la terapia de hemodiálisis y el trasplante renal. Una vez alcanzada la insuficiencia renal, es necesario realizar la terapia de diálisis, tal como la hemodiálisis o la diálisis peritoneal, o el trasplante de riñón. Aunque se considera que la terapia de hemodiálisis es la terapia final de las enfermedades renales, simplemente elimina los desechos acumulados en el cuerpo como consecuencia de los trastornos de la función renal, pero la función del riñón gravemente dañado no se recupera, de manera que el paciente tiene que seguir soportando el dolor y los problemas que conlleva el tratamiento de diálisis, que a su vez requiere equipos y costes, a lo largo de toda su vida. Además, eventualmente, en la mayoría de los casos, se presenta insuficiencia cardiaca, una enfermedad infecciosa o similar que llevan a la muerte. Recientemente, el número de pacientes que inician la terapia de diálisis está aumentando año tras año, lo que representa un problema desde el punto de vista económico y social. Aunque el único tratamiento radical de la insuficiencia renal es el trasplante de riñón, puesto que tiene una serie de problemas, entre ellos la escasez de donantes, las dificultades en la compatibilidad de los tejidos y la necesidad de evitar la reacción de rechazo, el número de casos es bajo. Por consiguiente, existe una demanda para el desarrollo de un tratamiento radical o de un agente terapéutico radical. Aunque hay una serie de enfermedades y patosis que causan insuficiencia renal, las enfermedades causales más frecuentes son la nefritis y la nefropatía diabética. Por lo tanto, proporcionar tratamiento y prevención de estas enfermedades de los riñones es una de las tareas más importantes en el campo de las enfermedades renales. La nefritis incluye la glomerulonefritis de inicio a partir de daños de los glomérulos y la nefritis tubular de inicio a partir de los túbulos renales. En el primer caso, el deterioro de los túbulos renales se produce tras el daño de los glomérulos, mientras que en el segundo, el deterioro se limita a los túbulos renales. La nefritis lúpica clínicamente importante, la nefritis por IgA y similares se incluyen dentro de las glomerulonefritis, y se cree que su mecanismo de aparición incluye un mecanismo inmunológico y un mecanismo no inmunológico. Como ejemplo del anterior, se conoce el depósito de un complejo inmune formado entre un antígeno de origen bacteriano tal como el estafilococo o el estreptococo hemolítico, o de origen viral tal como el virus de la hepatitis B o el sarampión, y un anticuerpo contra el mismo. Sin embargo, en la actualidad se cree que hay una diversidad de causas y muchos problemas sin resolver. Por el retardo de la excreción de desechos en los fluidos corporales debido a la nefritis crónica sostenida, se produce un aumento de la carga en el riñón, lo que agrava aún más el progreso de la nefritis, con lo que avanza el deterioro. El riñón en el que los glomérulos y los túbulos renales se deterioran por completo hasta llegar a la insuficiencia renal no se puede recuperar por sí mismo, y aún no se ha llegado a completar un procedimiento terapéutico o un fármaco terapéutico que pueda recuperar el riñón. A pesar del uso de fármacos antiinflamatorios esteroideos contra la nefritis aguda y la nefritis crónica leve, no hay procedimientos terapéuticos radicales contra la insuficiencia renal alcanzada después del agravamiento de la nefritis crónica, y no existe otro camino que continuar con la terapia de diálisis. Sin embargo, también es muy importante la función de secreción de hormonas y similares de los riñones. En especial, si se reduce la cantidad de eritropoyetina producida en los túbulos renales proximales debido al deterioro de los túbulos renales proximales, se produce anemia grave. Por lo tanto, es necesario realizar el diagnóstico preciso y el tratamiento en una etapa temprana.

En la actualidad, para el tratamiento farmacológico contra la nefritis, se utilizan principalmente fármacos antiinflamatorios esteroideos, así como inmunosupresores, agentes antiplaquetarios, agentes antihipertensivos, fármacos diuréticos y similares, dependiendo de la causa o patología. Para la nefropatía diabética, junto con el estricto control de la glucemia, se utilizan agentes antihipertensivos tales como los inhibidores de la enzima convertidora de angiotensina, bloqueadores del receptor de ATII y bloqueadores del calcio. Sin embargo, con estos agentes terapéuticos conocidos contra las enfermedades del riñón, es difícil detener suficientemente el progreso hacia la insuficiencia renal, y la situación actual dista mucho de ser la terapia radical (Hiroshi OKA y Osamu WADA editores responsables, "Medical Science Unabridged Dictionar y ", Suplemento 5, Latest Information of Therapies, pág. 218, Kodansha, 1988) . Por lo tanto, el agente terapéutico satisfactorio contra las enfermedades riñón no existe. Además, los efectos secundarios acompañados por el uso continuo a largo plazo de los fármacos también son problemáticos. Por consiguiente, en la actualidad, la terapia y la prevención de las enfermedades renales se realizan básicamente por medio de cura de reposo y/o cura de dieta. La farmacoterapia de las enfermedades del riñón se encuentra todavía en el proceso de ensayo y error, y existe una... [Seguir leyendo]

1. Un agente para su uso en la terapia y/o la prevención de las enfermedades renales, que comprende como ingrediente eficaz una molécula de ácido nucleico que inhibe la expresión de la caseína cinasa 2.

2. El agente para su uso en la terapia y/o la prevención de las enfermedades renales según la reivindicación 1, en el que dicha caseína cinasa 2 tiene como origen las células que constituyen el riñón.

3. El agente para su uso en la terapia y/o la prevención de las enfermedades renales según la reivindicación 1 o 2, en el que dicha molécula de ácido nucleico es una molécula de ácido nucleico que inhibe la expresión de la subunidad a y/o la subunidad a' de la caseína cinasa 2.

4. El agente para su uso en la terapia y/o la prevención de las enfermedades renales según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que dicha molécula de ácido nucleico que inhibe la expresión de la caseína cinasa 2 es un oligonucleótido antisentido que está dirigido contra el ARNm que codifica la caseína cinasa 2, y que puede inhibir la expresión de la caseína cinasa 2.

5. El agente para su uso en la terapia y/o la prevención de las enfermedades renales según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que dicho oligonucleótido antisentido tiene de 12 a 50 bases que tienen una secuencia seleccionada del grupo constituido por regiones codificadoras, regiones 3' no traducidas, regiones 5' no traducidas, remate 5' y uniones intrón/exón del ARNm que codifica la caseína cinasa 2.

6. El agente para su uso en la terapia y/o la prevención de las enfermedades renales según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que dicha molécula de ácido nucleico de dicho oligonucleótido antisentido contra la caseína cinasa 2 es un S-oligonucleótido.

7. El agente para su uso en la terapia y/o la prevención de las enfermedades renales según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en el que dicha molécula de ácido nucleico que forma dicho oligonucleótido antisentido contra la caseína cinasa 2 tiene una secuencia que se muestra en cualquiera de las ID. SEC. Nº 1 a 10.

8. El agente para su uso en la terapia y/o la prevención de las enfermedades renales según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en el que dicho oligonucleótido antisentido contra la caseína cinasa 2 tiene una secuencia que se muestra en ID. SEC. Nº 1.

9. El agente para su uso en la terapia y/o la prevención de las enfermedades renales según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en el que dicha enfermedad renal es la nefritis glomerular, la nefritis intersticial, la nefroesclerosis, la nefropatía diabética o la insuficiencia renal crónica o aguda.

10. El agente para su uso en la terapia y/o la prevención de las enfermedades renales según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en el que dicha enfermedad renal es una nefritis diferente de la nefritis causada por la diabetes, o dicha enfermedad renal está caracterizada por el aumento de la expresión de la caseína cinasa 2 o el aumento de la actividad enzimática de la caseína cinasa 2.

11. Un procedimiento para diagnosticar las enfermedades renales, que comprende medir la actividad y/o el contenido de la caseína cinasa 2, y/o medir la cantidad de expresión del gen de la caseína cinasa 2 en una muestra separada del cuerpo.

12. El procedimiento de la reivindicación 11, en el que dicha muestra son células que constituyen el riñón.

13. El procedimiento según la reivindicación 11 o 12, en el que dicha caseína cinasa 2 es la subunidad a y/o la subunidad a'.

14. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 11 a 13, en el que dicha enfermedad renal es la nefritis glomerular, la nefritis intersticial, la nefroesclerosis, la nefropatía diabética o la insuficiencia renal crónica o aguda.

15. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 11 a 13, en el que dicha enfermedad renal es una nefritis diferente de la nefritis causada por la diabetes, o dicha enfermedad renal está caracterizada por el aumento de la expresión de la caseína cinasa 2 o el aumento de la actividad enzimática de la caseína cinasa 2.

16. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 11 a 15, que comprende la medición de la cantidad de expresión del gen de la caseína cinasa 2.

17. Un oligonucleótido que tiene una secuencia de nucleótidos complementaria con una región en la cadena sentido

o la cadena antisentido del gen de la caseína cinasa 2, que se utiliza para el procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 11 a 16.

18. El oligonucleótido según la reivindicación 17, que es un cebador para la amplificación del gen o una sonda para detectar el gen.