Procedimiento para la obtención de un extracto de arándanos, caracterizado porque a partir de las bayas de arándano,

género Vaccinium macrocarpon y/o Vaccinium oxycoccus, se obtiene un extracto de pulpa de arándano que contiene un gran porcentaje de proantocianidinas de tipo A, comprendido entre 1% y más de 20% con el método de la vainillina-ácido y entre 5% y más del 50% con el método de Bate S mith, el cual presenta propiedades antibacterianas, antivirales y antiadhesivas:

- por prensado de la baya,

- después, extracción de las proantocianidinas contenidas en la pulpa así obtenida con ayuda de una solución acuosa en caliente o a la temperatura ambiente, o de una solución hidroalcohólica a temperatura ambiente, operación que va seguida de técnicas de separación sólido-líquido conocidas,

- después, traspaso sobre una resina de adsorción de tipo sílices injertadas, la cual permite aislar las antocianinas y las proantocianidinas de las sustancias indeseables y

- recuperación a partir del eluído de estas mismas proantocianidinas en forma de polvo seco, por secado en vacío o liofilización o atomización o nebulización.

Procedimiento de obtención de un extracto de pulpa de arándanos para uso en la prevención y el tratamiento de afecciones tales como caries, gingivitis e infecciones leves de garganta.

La presente invención se refiere a un procedimiento para la obtención de un extracto preparado a partir de la pulpa de arándano (género Vaccinium macrocarpon y/o Vaccinium oxycoccus) con objeto de obtener un producto que, presentado bajo diversas formas galénicas u otras, tiene numerosas cualidades y propiedades terapéuticas explotables especialmente en el sector de los cuidados y de la prevención dentaria, de la higiene bucal, así como en el de la prevención de las infecciones virales o bacterianas de la orofaringe. Se refiere igualmente a este extracto y a sus utilizaciones.

Las cualidades terapéuticas del arándano son conocidas desde hace mucho tiempo. Atribuidas primeramente por error a su elevada acidez debida a la presencia de ácidos orgánicos contenidos en el jugo, fue utilizada sobre todo para prevenir y sanar las infecciones urinarias ligeras. Hoy día se sabe que sus cualidades terapéuticas se deben más bien a los polifenoles contenidos en el jugo y en la piel de la baya, y más precisamente, a las proantocianidinas, especialmente de tipo A (Howell et al. 2005) , las cuales según AFSSA tienen la propiedad de "contribuir a disminuir la fijación (tienen por tanto un efecto antiadhesivo) de ciertas bacterias patógenas de tipo E. coli sobre las paredes de las vías urinarias".

Hasta hoy, este tipo de preparación ha encontrado pocas aplicaciones en razón de los inconvenientes que puede presentar en ciertos casos; así, el jugo de arándano, amargo y acidulado a la vez (pH 2-3) , que se debe azucarar fuertemente, no se puede utilizar tal cual para la prevención o los cuidados dentarios porque puede contribuir a la erosión del esmalte y al desarrollo de las caries.

Según la presente invención, el procedimiento para la obtención del producto de base susceptible de ser utilizado en numerosas aplicaciones no existe en la técnica anterior.

Las patentes US 5002759 y 5362480 se refieren a preparados que se oponen a la adherencia de bacterias patógenas a nivel de las células de la pared bucal; el género Vaccinium o el arándano no se mencionan para cualificar el extracto.

La patente US 5474774 se refiere a una preparación a base de arándano, rica en polifenoles, exenta de azúcar simple y que tiene un efecto antiadhesivo, pero el procedimiento de extracción y la materia prima obtenida son muy diferentes de la presente solicitud.

La patente US 0048611 A1 describe una preparación a base de arándano utilizada para la fabricación de una goma de mascar, que posee una actividad antiadhesiva sobre las bacterias. En este caso, la materia prima utilizada es un jugo concentrado de arándano, y no la pulpa, al que se somete a una purificación por diálisis. En la presente solicitud, la materia prima es un extracto de pulpa de arándano totalmente deshidratado, y para su preparación no se utiliza la técnica de la diálisis.

La patente US 4857327 A1 utiliza una preparación a base de Vaccinium con el fin de tratar trastornos digestivos. No se utilizan las especies Vaccinium macrocarpon y Vaccinium oxycoccus: sólo se citan Vaccinium myrtillus, Vaccinium vitis ideae, Sambuccus nigra y Vitis vinefera, que no poseen proantocianidinas de tipo A, pero únicamente las de tipo B. La pulpa de arándano utilizada, exenta de jugo, se deseca y se incorpora tal cual a la preparación; en la presente solicitud se trata de un extracto preparado a partir de esta pulpa.

La patente W099/12541 se refiere a un extracto de arándanos rico en proantocianidinas, preparado a partir del fruto, las hojas, raíces o los tallos de la planta. El modo de acción fisiológico reivindicado menciona únicamente la inhibición de la adhesión de las bacterias E. coli sobre las células del tracto urinario y digestivo, mientras que la presente solicitud se refiere a una acción no específica sobre E. coli. Las bacterias referidas son de tipo Streptococcus mutans, Porphyromonas gingivalis y Fusobacterium nucleatum responsables, entre otras, de caries, gingivitis, parodontitis; se refiere igualmente a ciertos virus (Lipson et al 2007) .

Ninguna de estas solicitudes reivindica una actividad bactericida o bacteriostática.

El mérito de la presente invención es ofrecer una nueva vía de valorización de la pulpa de arándano con el fin de obtener fácilmente un extracto que comprenda proantocianidinas, especialmente de tipo A, con propiedades a la vez antibacterianas, antivirales, antioxidantes y antiadhesivas, presentado bajo diferentes formas galénicas u otras, utilizadas a título preventivo o curativo en las afecciones dentarias o de la orofaringe.

Según un modo de realización, el procedimiento de obtención apela a técnicas que no se utilizan en el estado de la técnica anterior; permite obtener un extracto de pulpa de arándano, en forma de polvo, composición no conocida hasta ahora y más rica en activos que los que se han podido obtener habitualmente.

Obtención de proantocianidinas a partir de la pulpa de arándano

Según la invención, la técnica propuesta para extraer las proantocianidinas totales a partir de bayas de arándano comprende varias etapas. La primera consiste en obtener la pulpa de arándano por prensado de la baya de Vaccinium macrocarpon y/o Vaccinium oxycoccus, lo que permite eliminar una gran parte de los hidratos de carbono y de los ácidos orgánicos contenidos en el jugo; la preparación obtenida, con un pH que varía de 3, 5 a 4, 5, se acepta mejor por este hecho.

La pulpa de arándano utilizada posee una tasa de materia seca media de 30%, pudiendo variar esta tasa entre 25 y 35% según la presión ejercida durante la operación de prensado. Se presenta en forma de bayas reventadas y las pepitas se pueden conservar porque contienen proantocianidinas. Para facilidades de transporte y almacenamiento, esta pulpa fue congelada.

En un segundo tiempo, se procede a la extracción de las proantocianidinas con ayuda de una solución acuosa o con ayuda de una solución hidroalcohólica. El traspaso de los extractos a una columna con resina de adsorción permite aislar mejor las proantocianidinas, por tanto incrementar los rendimientos de la extracción.

1er caso: la extracción se realiza con ayuda de una solución acuosa, a la temperatura ambiente o en agua previamente calentada entre 50 y 70ºC. La pulpa sufre previamente una trituración con el fin de aumentar la superficie de intercambio sólido-líquido y, por este hecho, el rendimiento de la extracción, con el material utilizado y una granulometría inferior a 2 mm, aumenta de 10 a 20%.

La extracción, por sí misma, se puede realizar sobre proporciones de pulpa del orden de 5 a 20% con relación a la del agua, siendo la proporción ideal del 10%.

Cuando se opera en caliente, en un agua a 60ºC, la pulpa introducida a razón del 10% en una cuba provista de un sistema de agitación se somete a una velocidad de agitación constante comprendida entre 200 y 500 revoluciones/minuto, según el tipo de palas utilizadas. La extracción se puede continuar durante 2 a 8 horas, pero la experiencia muestra que un tiempo de 5 horas era lo más apropiado con el fin de no aumentar la proporción de fibras hidrosolubles que perjudican el contenido total en activos del extracto. Al final de las cinco horas, la suspensión sufre eventualmente una filtración grosera, después una separación sólido-líquido en un decantador de flujo horizontal animado con una velocidad de rotación que varía entre 2500 y 6500 revoluciones/minuto; con el material utilizado, los mejores resultados fueron obtenidos a 3500 revoluciones/minuto. Este protocolo es variable cualquiera que sea la temperatura del agua.

La clarificación de la suspensión prosigue a continuación con una centrifugación efectuada a una velocidad comprendida entre 4000 y 8000 revoluciones/minuto. El extracto líquido así obtenido sufre durante la fase siguiente una desecación, ya sea por secado en una estufa a vacío, a una temperatura inferior a 60ºC con el fin de no degradar los activos, ya sea por liofilización, o bien incluso por atomización o nebulización con el fin de obtener una fase sólida pulverulenta. Las mayores tasas de activos en el producto final se obtienen cuando el traspaso a una resina de adsorción se hace a continuación de la centrifugación.

Según la invención, cualquiera que sea el método... [Seguir leyendo]

1. Procedimiento para la obtención de un extracto de arándanos, caracterizado porque a partir de las bayas de arándano, género Vaccinium macrocarpon y/o Vaccinium oxycoccus, se obtiene un extracto de pulpa de arándano que contiene un gran porcentaje de proantocianidinas de tipo A, comprendido entre 1% y más de 20% con el método de la vainillina-ácido y entre 5% y más del 50% con el método de Bate Smith, el cual presenta propiedades antibacterianas, antivirales y antiadhesivas:

- por prensado de la baya,

- después, extracción de las proantocianidinas contenidas en la pulpa así obtenida con ayuda de una solución acuosa en caliente o a la temperatura ambiente, o de una solución hidroalcohólica a temperatura ambiente, operación que va seguida de técnicas de separación sólido-líquido conocidas,

- después, traspaso sobre una resina de adsorción de tipo sílices injertadas, la cual permite aislar las antocianinas y las proantocianidinas de las sustancias indeseables y

- recuperación a partir del eluído de estas mismas proantocianidinas en forma de polvo seco, por secado en vacío o liofilización o atomización o nebulización.

2. Procedimiento para la obtención de un extracto de arándanos según la reivindicación 1, caracterizado porque el extracto de la pulpa de arándano se obtiene por extracción acuosa de las proantocianidinas a partir de la pulpa de arándano triturada, después se mezcla con agua en una proporción de 5 a 20% a temperatura ambiente o calentada a una temperatura comprendida entre 50 y 70ºC, todo ello mantenido bajo agitación a una velocidad constante comprendida entre 200 y 500 revoluciones/minuto durante 2 a 8 horas, separándose a continuación las materias hidrosolubles que contienen las proantocianidinas de las materias insolubles, por filtración grosera, traspaso a un decantador de flujo horizontal cuya velocidad de rotación está comprendida entre 2500 y 6500 revoluciones/minuto, centrifugación y después aislamiento por traspaso sobre una resina de adsorción de tipo sílices injertadas, recuperación y desecación por secado en vacío o liofilización o atomización o nebulización, con el fin de obtener una fase sólida pulverulenta.

3. Procedimiento para la obtención de un extracto de arándanos según la reivindicación 1, caracterizado porque el extracto de la pulpa de arándano se obtiene por extracción hidroalcohólica de las proantocianidinas a partir de la pulpa de arándano triturada, después se mezcla a razón de 5 a 20% con la solución acuosa que contiene 20 a 80% de etanol, todo ello mantenido bajo agitación a una velocidad constante comprendida entre 200 a 500 revoluciones/minuto, a temperatura ambiente, durante 2 a 8 horas, separándose entonces las materias solubles que contienen las proantocianidinas de las materias insolubles por filtración grosera, traspaso a un decantador de flujo horizontal cuya velocidad de rotación está comprendida entre 2500 y 6500 revoluciones/minuto, centrifugación y después aislamiento por traspaso sobre una resina de adsorción de tipo sílices injertadas, después de la eliminación del alcohol, recuperación y desecación por secado en vacío, liofilización, atomización o nebulización, con el fin de obtener una fase sólida pulverulenta.

4. Procedimiento para la obtención de un extracto de arándanos según la reivindicación 2, caracterizado porque el extracto de arándanos obtenido por extracción acuosa de las proantocianidinas a partir de la pulpa de arándanos triturada, se mezcla en una proporción de 10% de agua a temperatura ambiente o calentada a una temperatura de 60ºC, todo ello mantenido bajo agitación a una velocidad constante comprendida entre 200 y 500 revoluciones/minuto durante un tiempo de cinco horas, separándose a continuación las materias hidrosolubles que contienen las proantocianidinas de las materias insolubles por filtración grosera, traspaso a un decantador de flujo horizontal cuya velocidad de rotación es de 3500 revoluciones/minuto, centrifugación, después aislamiento por traspaso sobre una resina de adsorción de tipo sílices injertadas, recuperación y desecación por secado en vacío o liofilización o atomización o nebulización, con el fin de obtener una fase sólida pulverulenta.

5. Procedimiento para la obtención de un extracto de arándanos según la reivindicación 3, caracterizado porque el extracto de arándanos se obtiene por extracción hidroalcohólica de las proantocianidinas a partir de la pulpa de arándano triturada, después se mezcla en la proporción de 10% con la solución acuosa que contiene 70% de etanol, todo ello mantenido bajo agitación a una velocidad constante comprendida entre 200 a 500 revoluciones/minuto, a temperatura ambiente, durante un tiempo de 5 horas, separándose entonces las materias solubles que contienen las proantocianidinas de las materias insolubles por filtración grosera, traspaso a un decantador de flujo horizontal cuya velocidad de rotación es de 3500 revoluciones/minuto, centrifugación y después aislamiento por traspaso sobre una resina de adsorción de tipo sílices injertadas después de la eliminación del alcohol, recuperación y desecación por secado en vacío, liofilización, atomización o nebulización, con el fin de obtener una fase sólida pulverulenta.

6. Procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque después de pasar sobre la reina de adsorción de tipo sílices injertadas, el rendimiento de la extracción obtenido por medio de una solución acuosa o por medio de una solución hidroalcohólica es superior al 10% en relación a la cantidad de materia seca de partida, y la tasa de materia seca en el producto final es superior al 90%.

7. Procedimiento según la reivindicación 6, caracterizado porque la tasa de materia seca en el producto final está comprendida entre 94 y 97%.

8. Extracto de arándano caracterizado porque se obtiene a partir de la pulpa de arándano según las reivindicaciones 1, 2 o 3, y comprende proantocianidinas de tipo A, con propiedades antibacterianas, antivirales y antiadherentes, para ser utilizado, asociado con excipientes farmacéuticos y en formas galénicas u otras, tales como comprimidos, tabletas de goma de mascar, dentífricos, colutorios de boca, a título preventivo o curativo, para el tratamiento de afecciones dentarias o de la orofaringe, en el caso del ser humano o animal.

Ensayos antibacterianos

Número de bacterias expresadas en log10 UFC/ml

Concentración de los productos: 2 mg/ml

Concentración de los productos: 5 mg/ml

Concentración de los productos: 10 mg/ml