NIVELES AUMENTADOS DE PRODUCCIÓN DE FOLATO POR FERMENTACIÓN DE ZUMO DE MELÓN CON LACTOBACILLUS.

Método para aumentar los niveles de folato totales producidos por una especie de Lactobacillus productora de folato durante la fermentación comprendiendo las fases siguientes:

a) proporcionar un extracto de una fruta de melón de una especie de Cucumis melo;

b) usar todo o parte del extracto de fruta de melón para preparar un medio de fermentación;

c) inocular dicho medio de fermentación con una o más cepas de Lactobacillus productora de folato;

d) permitir que ocurra la fermentación;

y opcionalmente

e) usar todo o parte del medio fermentado para la preparación de un alimento, pienso o suplemento alimenticio.

Niveles aumentados de producción de folato por fermentación de zumo de melón con Lactobacillus Campo de la invención [0001] La presente invención se refiere al campo de la microbiología y de la producción de un alimento, suplemento para alimentos o piensos usando la fermentación microbiana del zumo de melón. Se proporcionan métodos de producción de niveles altos de folato por fermentación del zumo de melón, al igual que alimentos, suplementos para alimentos y piensos que comprenden o que consisten en zumo de melón fermentado y/o folato (vitamina B9/B11) obtenidos a partir de tales métodos de fermentación. También, se describe en la presente el uso de zumo de melón (o partes del mismo y/o diluciones y/o concentraciones del mismo) como un medio de fermentación o suplemento de fermentación de bacterias productoras de folato. Otra forma de realización es el uso de ácido de p-aminobenzoico o paminobenzoato (p-ABA) (en combinación con zumo de melón) para aumentar la producción de folato durante la fermentación microbiana.

DEFINICIONES GENERALES

"Bacterias del ácido láctico" (LAB) se refiere a bacterias, que producen ácido láctico u otro ácido orgánico (tal como ácido propiónico) como un producto final de fermentación, tal como, pero no limitado a, bacterias del género Lactobacillus, Streptococcus, Lactococcus, Oenococcus, Leuconostoc, Pediococcus, Carnobacterium, Propionibacterium, Enterococcus y Bifidobacterium.

"Calidad alimenticia" son componentes que pueden ser ingeridos de forma segura (p. ej. oralmente) por seres humanos o animales.

"Probióticos" o "cepa (s) probiótica (s) " se refiere a cepas de bacterias, que tienen un efecto provechoso en el huésped cuando es ingerido por un sujeto y que son generalmente considerados como seguros (GRAS) para seres humanos.

"Calidad alimenticia" se refiere a que se considera como seguro para el consumo humano y/o animal, por ejemplo por las autoridades reguladoras pertinentes tales como la Agencia Americana de Medicamentos y Alimentos (FDA, por sus siglas en inglés) .

"Bacterias del ácido láctico probióticas" son, por lo tanto, aquellas cepas de LAB que también tienen propiedades probióticas, es decir que son cepas probióticas.

"Cepas bacterianas no modificadas genéticamente" se refiere a cepas que no han no sido modificadas genéticamente por intervención humana, es decir que no comprenden secuencias de ácidos nucleicos homólogas o heterólogas introducidas en las células o genoma. Por ejemplo, que no se han introducido genes quiméricos (comprendiendo secuencias de ácidos nucleicos enlazadas operativamente, tales como un promotor, secuencia codificante y terminador) o vectores en las bacterias.

"Cepas bacterianas modificadas genéticamente" o "cepas recombinantes" son aquí cepas que han sido modificadas genéticamente por intervención humana, por ejemplo por introducción de genes homólogos o heterólogos en el genoma, tal como un gen quimérico.

"Cepas bacterianas no mutantes" se refiere aquí a cepas de tipo salvaje, es decir cepas que no han sido tratadas por agentes mutagénicos por seres humanos. Cepas de "tipo salvaje" son cepas que se encuentran en, o aisladas originalmente de, la naturaleza y que son genéticamente esencialmente las mismas que la cepa salvaje.

"Extracto de melón" se refiere aquí al extracto de fruta de melón de plantas de la especie Cucumis melo, por ejemplo (C.melo var. reticulans, melón de Galia) , melón Musk, Cantalupo, melón de Hami, melón Honey dew (Cucumis melo var.inodorus) , melón Piel de Sapo, y melón dulce, Cucumis melo subesp. agrestis; Cucumis melo subesp. melo.; Cucumis melo var. cantalupensis; Cucumis melo var. conomon, y otros.

"Zumo de melón" se refiere a la fase no sólida (fase líquida) obtenida después de liquidificación del extracto de melón.

"Folato" y "ácido fólico" [ácido N-[4-{[2-amino-1, 4-dihidro-4-oxo-6-pteridinil) metil] amino } benzoil] -L-glutámico] son usados aquí de forma intercambiable para referirse al ácido fólico y derivados del ácido fólico, que por ejemplo difieren en el estado de oxidación, sustituciones de mono-carbono o número de residuos de glutamato. Nombres alternativos son vitamina B9, vitamina B10, vitamina B11, vitamina B9/B11 o vitamina M. Ejemplos de derivados son tetrahidrofolato, 5-formiltetrahidrofolato, 5, 10-metilentetrahidrofolato, 10-formiltetrahidrofolato, 5-metiltetrahidrofolato, 5, 10-meteniltetrahidrofolato, etc. Están comprendidos aquí por ejemplo poliglutamilfolato y/o productos de hidrólisis más corta tales como di-, tri-y/o monoglutamilfolato.

"p-ABA" se refiere a ácido para-aminobenzoico o para-aminobenzoato o ácido 4-aminobenzoico y es un bloque de construcción de folato en la vía biosintética de folato. GTP, p-ABA y glutamato forman los precursores de folato.

"Fermentación" o "cultivo por fermentación" se refiere a cultivos de crecimiento usados para el crecimiento de bacterias que convierten los carbohidratos en alcohol y/o ácidos, normalmente (pero no necesariamente) bajo condiciones anaeróbicas.

"Medio de fermentación" se refiere al medio de crecimiento que se usa para crear el cultivo de fermentación, mientras "caldo de fermentación" es generalmente usado para referirse al medio fermentado (es decir, durante y/o después de la fermentación) . No obstante, ambos términos se pueden utilizar de forma intercambiable aquí y el significado estará claro en el contexto.

"Alimento" o "producto alimenticio" se refiere a productos alimenticios líquidos, semisólidos y/o sólidos (composiciones nutritivas) , adecuados para el consumo humano y/o animal.

"Suplemento alimenticio" se refiere a una composición ingerida por seres humanos además de la ingesta diaria de alimentos normal. Generalmente, los suplementos alimenticios están en la forma de comprimidos, polvos, sobres, píldoras, etc.

"Ingrediente de producto alimenticio" o "ingrediente de suplemento alimenticio" se refiere a un producto que es conveniente para ser añadido a un producto alimenticio final, o suplemento alimenticio, o durante el proceso de producción de un producto alimenticio, o suplemento alimenticio.

El término "comprendiendo" debe ser interpretado como que especifica la presencia de las partes, fases o componentes establecidos, pero no excluye la presencia de una o más partes, fases o componentes adicionales.

Además, la referencia a un elemento por el artículo indefinido "un" o "una" no excluye la posibilidad de que más de un elemento esté presente, a menos que el contexto requiera claramente que allí haya uno y sólo uno de los elementos. El artículo indefinido "un" o "una" por lo tanto significa "al menos uno".

"Fase de crecimiento" se refiere a las fases de crecimiento comúnmente conocidas de microorganismos, por ejemplo en los cultivos de fermentación por lotes, tales como la fase lag, fase de crecimiento exponencial y la fase estacionaria posterior, seguido de la fase de muerte.

"Porcentajes (%) de identidad de secuencias" se refiere a los porcentajes de nucleótidos o aminoácidos idénticos entre dos secuencias y pueden ser determinados usando por ejemplo herramientas de alineamiento locales de parejas tales como el programa "water" de EmbossWIN (versión 2.10.0) usando parámetros por defecto, (penalización por abertura de espacio 10.0 y penalización por extensión de espacio 0.5, usando Blosum62 para proteínas y matrices DNAFULL para ácidos nucleicos) o "Bestfit" del GCG Wisconsin Package, disponible de Accelr y s Inc., 9685 Scranton Road, San Diego, CA 92121-3752 EEUU, usando los parámetros por defecto. Alternativamente, se puede usar también el análisis BLAST usando los ajustes por defecto, tales como Blast de proteínas de NCIMB (http: //www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/Blast.cgi) , con una penalización por creación de espacio de 11 y penalización por extensión de espacio de 1.

Antecedentes de la invención [0023] El folato es esencial para la dieta humana y animal y su deficiencia puede resultar en un intervalo de enfermedades y trastornos, tales como defectos del tubo neural en recién nacidos. Muchas plantas, hongos y bacterias sintetizan el folato, incluso las bacterias lácticas (LAB) , por lo cual las concentraciones de folato en productos lácteos fermentados son superiores que en el producto lácteo no fermentado. La secuencia de genoma anotada de Lactococcus lactis subesp. lactis IL1403 muestra los genes del clúster... [Seguir leyendo]

1. Método para aumentar los niveles de folato totales producidos por una especie de Lactobacillus productora de folato durante la fermentación comprendiendo las fases siguientes: a) proporcionar un extracto de una fruta de melón de una especie de Cucumis melo; b) usar todo o parte del extracto de fruta de melón para preparar un medio de fermentación; c) inocular dicho medio de fermentación con una o más cepas de Lactobacillus productora de folato;

d) permitir que ocurra la fermentación; y opcionalmente e) usar todo o parte del medio fermentado para la preparación de un alimento, pienso o suplemento alimenticio.

2. Método según la reivindicación 1, donde dicha cepa de Lactobacillus es una cepa de tipo salvaje, cepa mutante

o cepa recombinante.

3. Método según la reivindicación 1 o 2, donde dicha cepa de Lactobacillus es una cepa probiótica.

4. Método según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, donde dicha cepa de Lactobacillus pertenece a las especies de L. reuteri o L. plantarum.

5. Método según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, que comprende además la fase de añadir ácido para-aminobenzoico (p-ABA) al medio de fermentación durante las fases b) , c) y/o d) .

6. Método según cualquiera de las reivindicaciones precedentes donde dicho extracto de fruta de melón es zumo de melón.

7. Medio de fermentación de Lactobacillus que comprende o que consiste en extracto de fruta de melón de una fruta de las especies Cucumis melo y además comprendiendo p-ABA, donde dicho medio de fermentación no comprende extractos de frutas de otra especie vegetal.

8. Medio de fermentación según la reivindicación 7, donde dicho extracto de fruta de melón es zumo de melón y donde al menos 50% del medio consiste en dicho zumo de melón.

9. Caldo de fermentación obtenido del método según las reivindicaciones 1-6.

10. Composición de alimento, pienso o de suplemento alimenticio que comprende o que consiste en el caldo de fermentación según la reivindicación 9.

11. Composición de alimento, pienso o de suplemento alimenticio según la reivindicación 10, siendo seleccionada de una bebida de fruta, una barra de caramelo, una bebida de yogur, un producto lácteo fermentado, un sustituto de comida, helado, queso y un batido.

12. Uso de un caldo de fermentación según las reivindicaciones 9 para la preparación de una composición de alimento , pienso o de suplemento alimenticio que comprende folato y opcionalmente vitamina B 12.

13. Uso según la reivindicación 12, donde dicho extracto de fruta de melón es zumo de melón.