FRAGMENTOS PEPTÍDICOS PARA INDUCIR LA SÍNTESIS DE PROTEÍNAS DE LA MATRIZ EXTRACELULAR.

Fragmentos peptídicos para inducir la síntesis de proteínas de la matriz extracelular Campo de la invención La invención se refiere a tetrapéptidos con el motivo de aminoácidos GxxG o PxxP, en el que se conservan la G (glicina) y la P (prolina) y x es un aminoácido variable. La invención también se refiere a tetrapéptidos activos de desplazamiento de fase que son secuencias tetrapeptídicas desplazadas una fase desde un tetrapéptido GxxG o PxxP en una proteína de la MEC. En particular, la invención se refiere a péptidos GxxG, PxxP o activos de desplazamiento de fase que estimulan la producción de proteínas de la matriz extracelular y que potencian el cierre de heridas de la monocapa celular epitelial de la piel humana lesionada por arañazos. Las composiciones peptídicas pueden usarse en formulaciones para subsanar la piel dañada o para mantener la piel sana. Antecedentes de la invención El envejecimiento cutáneo se aprecia normalmente por la formación de arrugas y problemas de cicatrización. Una herida se define como una rotura en la integridad epitelial de la piel. La cicatrización normal implica una serie de acontecimientos complejos y dinámicos magníficamente organizados que conduce a subsanar los tejidos lesionados. El mayor componente de la piel normal es la matriz extracelular (MEC), una matriz gelatinosa producida por las células que la rodean. La MEC está compuesta por dos clases principales de moléculas que incluyen proteínas estructurales fibrosas y proteoglicanos. Se sabe que los cambios en cuanto a la composición y al estado reticulado de la MEC están asociados con el envejecimiento y con una serie de trastornos cutáneos adquiridos y heredables. Se ha documentado bien que la MEC no solamente proporciona soporte estructural sino que también influye en el comportamiento celular, tal como diferenciación y proliferación. Además, cada vez más investigaciones sugieren que los componentes de la matriz pueden ser una fuente de señales celulares para facilitar la proliferación celular epitelial y la migración y por tanto potenciar la cicatrización. La clase más grande de moléculas fibrosas de la MEC es la familia del colágeno, que incluye al menos 16 tipos diferentes de colágeno. El colágeno en la matriz dérmica está compuesto principalmente de colágeno de tipo I (80- 85%) y de tipo III (8-11%), los cuales son colágenos fibrilares o con forma de varilla. La resistencia a la tracción de la piel se debe predominantemente a estas moléculas de colágeno fibrilares, que se autoensamblan en microfibrillas en una disposición lateral de cabeza a cola y de lado a lado escalonada. Las moléculas de colágeno se entrelazan a moléculas de colágeno adyacentes, creando una resistencia y estabilidad adicionales en las fibras de colágeno. Las lesiones en la red de colágeno (por ejemplo, por enzimas o destrucción física) o su colapso total hacen que se produzca la curación por restauración. Se han descrito diversos péptidos bioactivos que estimulan la producción de proteínas de la MEC tanto en la bibliografía científica como en patentes publicadas. Históricamente los péptidos se han aislado a partir de fuentes naturales y recientemente han sido objeto de estudios de relación estructura-función. Los péptidos naturales también han servido como puntos de partida para el diseño de análogos peptídicos sintéticos. Secuencias específicas dentro de las proteínas de la MEC pueden estimular elementos útiles en la piel, tales como colágeno de tipo I, colágeno de tipo III y fibronectina (Katayama et. al., J. BIOL. CHEM. 288: 9941-9944 (1983)). Katayama et al. identificaron el pentapéptido KTTKS (SEC ID Nº: 17), dentro del propéptido carboxi-terminal (restos 197-241) del colágeno de tipo I. El propétido se escinde durante la producción de la proteína de colágeno madura. El polipéptido escindido puede participar en la regulación de la producción de colágeno mediante un mecanismo de retroalimentación de biosíntesis, desempeñando el segmento KTTKS una función activa. Maquart et al. (J Soc BIOL. 193:423-28 (1999)) describieron que los péptidos GHK y CNYYSNS también estimulan la síntesis de la MEC. Estas secuencias pueden liberarse durante la renovación de la MEC, indicando así la necesidad de subsanar la MEC. Las secuencias peptídicas cortas liberadas por cualquier mecanismo normalmente se denominan matrikines (Maquart et al., J. Soc. BIOL. 193: 423-28 (1999)). Aunque existen diversos péptidos naturales y sintéticos, se necesitan péptidos mejorados biológicamente activos y métodos para su uso. Sumario de la invención Se describen tetrapéptidos que se caracterizan por el motivo de la secuencia de aminoácidos GxxG o PxxP, en el que se conservan los restos de G (glicina) y de P (prolina) y x es un aminoácido variable. Los tetrapéptidos derivan de secuencias que aparecen múltiples veces a lo largo de la secuencia primaria del colágeno de tipo IV, una proteína de la MEC. Las secuencias descritas inducen más la producción de todas las formas de colágeno que las secuencias peptídicas previamente conocidas, incluyendo el pentapéptido KTTKS, comercializado por SEDERMA SAS (Francia) con la marca registrada MATRIXYL. Adicionalmente, una composición que comprende una combinación de diversas secuencias de repetición múltiples genera una respuesta productora de colágeno aún mayor. De las combinaciones peptídicas presentes en una diversidad de proteínas de la MEC pueden esperarse 2 E07796001 11-01-2012   beneficios adicionales. La producción de una combinación específica de tetrapéptidos para la reconstrucción de la MEC puede ser muy costosa desde el punto de vista comercial. Se describe un medio relativamente sencillo y rentable para producir una combinación diversa de tetrapéptidos biológicamente activos. Produciendo una biblioteca combinatoria de tetrapéptidos con el motivo GxxG o PxxP, puede generarse una diversidad de tetrapéptidos biológicamente activos en el mismo proceso de fabricación (por ejemplo, GEPG, GPEG, GPPG y GEEG). La combinación de tetrapéptidos puede inducir más formación de proteínas MEC que los péptidos sencillos. Las composiciones que comprenden los tetrapéptidos descritos, en solitario o en combinación, son útiles en el mercado del cuidado de la piel incluyendo, pero sin limitación, las composiciones que tratan arrugas, tonifican, dan firmeza o tratan la flacidez de la piel. La estimulación del colágeno mediante los tetrapéptidos descritos puede mejorar significativamente la salud y el aspecto de la piel dañada y envejecida. Breve descripción de las figuras La Figura 1 es la SEC ID Nº: 45 que es la secuencia de aminoácidos del Colágeno IV que ilustra la aparición de los tetrapéptidos GxxG. Todas las secuencias en negrita están subrayadas y las secuencias de solapamiento están subrayadas con dos líneas. La Figura 2 es la SEC ID Nº: 46 que es la secuencia de aminoácidos del Colágeno III que ilustra la aparición de los PGPR y GAGP activos de desplazamiento de fase. Todas las secuencias activas de desplazamiento de fase se indican en negrita y están subrayadas y las secuencias GxxG que aparecen separadas un desplazamiento de fase están subrayadas con dos líneas. La Figura 3 es también la SEC ID Nº: 45, la secuencia de aminoácidos del Colágeno IV, que ilustra la aparición del tetrapéptido PGPP. Descripción detallada de la invención La invención se refiere, en líneas generales, a tetrapéptidos que estimulan la producción de proteínas de la MEC y que modulan la cicatrización y a los usos de dichos tetrapéptidos. Péptidos Una realización de la presente invención descrita se refiere a tetrapéptidos aislados que comprenden el motivo GxxG o PxxP. En la presente realización la G (glicina) o la P (prolina) se conservan y x es un aminoácido variable. El péptido puede ser generalmente cualquier péptido que se incluya dentro de la descripción anterior y más preferiblemente es la SEC ID Nº: 1, SEC ID Nº: 2, SEC ID Nº: 3, SEC ID Nº: 5, SEC ID Nº: 7, SEC ID Nº: 8, SEC ID Nº: 9, SEC ID Nº: 10, SEC ID Nº: 11, SEC ID Nº: 12, SEC ID Nº: 13, SEC ID Nº: 14, SEC ID Nº: 15 o SEC ID Nº: 16. De acuerdo con un aspecto de la presente invención, se proporciona un tetrapéptido que comprende la SEC ID Nº: 8 o la SEC ID Nº: 5 o la SEC ID Nº: 11. En otro aspecto la invención proporciona una composición que comprende un tetrapéptido de la invención y un vehículo farmacéuticamente aceptable. En un aspecto adicional, la invención proporciona una composición que comprende una mezcla de tetrapéptidos de la SEC ID Nº: 5 y de la SEC ID Nº: 8. La invención también proporciona una composición de la invención para su uso en el cuidado de la piel o para su uso en el tratamiento de una herida en la piel. En un aspecto adicional, se proporciona un método in vitro... [Seguir leyendo]

4. El tetrapéptido de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que el tetrapéptido está amidado en el extremo carboxi. 5. Una composición que comprende un tetrapéptido de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, y un vehículo farmacéuticamente aceptable. 6. La composición de la reivindicación 5, en la que el tetrapéptido está presente en una concentración eficaz que varía de aproximadamente 0,1 g/ml a aproximadamente 100 g/ml. 7. La composición de la reivindicación 5, en la que la composición está en forma de un aerosol, una emulsión, un líquido, una loción, una crema, una pasta, una pomada o una espuma. 8. Una composición que comprende una mezcla de los tetrapéptidos de la SEC ID Nº: 5 y SEC ID Nº: 8. 9. Una composición de una cualquiera de las reivindicaciones 5 a 8 para su uso en el cuidado de la piel. 10. Un método in vitro para estimular la producción de colágeno por una célula, comprendiendo el método la exposición de una célula a un tetrapéptido, de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, o a una mezcla de los mismos, induciendo así la producción de colágeno por la célula. 11. Un método in vitro para estimular la producción de colágeno por una célula, comprendiendo el método la exposición de una célula a una composición que comprenda una mezcla de los tetrapéptidos de la SEC ID Nº: 5 y de la SEC ID Nº: 8, induciendo así la producción de colágeno por la célula. 12. El método de una cualquiera de las reivindicaciones 10 u 11, en el que la célula es una célula de fibroblasto. 13. La composición de una cualquiera de las reivindicaciones 5 a 8 para su uso en el tratamiento de una herida cutánea. 14. La composición de la reivindicación 13, en la que dicha herida cutánea es un resultado de envejecimiento, enfermedad, lesión, traumatismo o cirugía. 36 E07796001 11-01-2012   37 E07796001 11-01-2012   38 E07796001 11-01-2012   39 E07796001 11-01-2012