CÉLULA FELINA CAPAZ DE CULTIVARSE SIN PROTEÍNA DE ORIGEN ANIMAL, Y PROCEDIMIENTO PARA PRODUCIR UN VIRUS Y PROCEDIMIENTO PARA PRODUCIR UNA VACUNA USANDO EL MISMO.

Célula felina capaz de cultivarse sin proteína de origen animal, y procedimiento para producir un virus y procedimiento para producir una vacuna usando el mismo CAMPO TÉCNICO La presente invención se refiere a una cepa de célula felina capaz de cultivarse sin proteínas de origen animal y un procedimiento para producir la misma. La presente invención también se refiere a un procedimiento para producir un virus usando la cepa celular. TÉCNICA ANTECEDENTE Ha pasado medio siglo o más desde la creación de una técnica de cultivo de de células animales y similar en un tubo de ensayo. Junto con el progreso de la ciencia y la tecnología se ha desarrollado significativamente una técnica de este tipo. En general, cuando se usa directamente un animal vivo para estos experimentos, los resultados pueden entenderse fácilmente. Sin embargo, dicho examen directo de un animal vivo ha sido problemático tanto técnica como económicamente. Por lo tanto, se ha extirpado una parte del animal, y las células de la misma se han proliferado en un entorno artificial, tal como, en una placa de Petri o en un tubo de ensayo. Este procedimiento se denomina un procedimiento de cultivo tisular o un procedimiento de cultivo celular. Ya que no ha sido difícil una técnica de este tipo, se hace posible producir productos farmacéuticos, vacunas, antígenos de diagnóstico, etc., mediante este procedimiento. Sin embargo, para el cultivo de células animales in vitro se requiere cultivar las células casi en las mismas condiciones que en las condiciones in vivo originales. Por ejemplo, se aplican condiciones, tales como, un estado aséptico o un entorno de temperaturas que se ajuste a la misma temperatura que la del cuerpo vivo. Además, incluso si las condiciones que se han mencionado anteriormente se satisfacen, se hace necesario para la división la proliferación celular y suministrar adicionalmente un "factor de crecimiento celular" como nutriente. Los ejemplos un factor de crecimiento celular de este tipo incluyen diversos tipos de hormonas, insulina, putrescina y un factor de crecimiento de fibroblastos. Sin embargo, dichos factores de crecimiento celular no se han dilucido en todas las especies celulares. Por consiguiente, se usan sueros de animales cuyo efecto puede ser inesperado específicamente y que contienen muchos componentes "desconocidos" en lugar de factores de crecimiento celular. Entre dichos sueros animales, se selecciona suero bovino debido a una gran población bobina y también debido a que puede suministrarse de forma estable. Se ha usado con frecuencia suero fetal de ternera ya que contiene sólo una pequeña cantidad de proteína toxica. En estudios científicos, hay casos en los que puede contenerse una proteína de origen bovino en un material de ensayo, aunque el ganado bovino no es una especie animal de interés. Sin embargo, el uso de una proteína de origen bovino de este tipo como un producto farmacéutico para un ser humano u otra especie animal puede causar un problema. El primer problema está relacionado con alergias. Cuando una vacuna o fármaco que contiene suero bovino se inyecta por vía parenteral, en seres humanos o en animales no bovinos, una primera inyección puede no causar un problema en muchos casos. Sin embargo, una segunda inyección o inyecciones posteriores pueden causar un problema en relación a una reacción alérgica. Este fenómeno puede explicarse inmunológicamente. Es decir, un animal sólo reacciona ligeramente con una sustancia de alto contenido molecular (por ejemplo, una proteína que tiene un peso molecular de 10.000 daltons o más) cuando la sustancia se expone en el animal la primera vez, y por lo tanto la sustancia administrada se descompone in vivo. Sin embargo, una memoria en cuanto a la exposición permanece en el sistema inmune. Por consiguiente, cuando la misma sustancia (antígeno) se expone en el animal la segunda vez o posteriores, los inmunocitos que memorizan la primera exposición reaccionan directamente con la sustancia, y como resultado, se da una reacción vital que es más fuerte que la de primera exposición a corto plazo. Dependiendo de los tipos de seres humanos o animales, puede haber casos en los que puedan tener una reacción desfavorable con un antígeno que se expone desde el exterior. Una reacción de este tipo se denomina típicamente como una reacción alérgica. Una reacción alérgica de este tipo provoca fiebre o hinchazón en el sitio de inyección, y en el peor caso, los seres humanos o los animales mueren de disnea debido a la obstrucción respiratoria y colapso. El segundo problema se refiere a la contaminación de patógenos o anticuerpos en el suero bovino contenidos en el suero bovino. Un famoso ejemplo es la contaminación con Pestivirus, Retrovirus, Micoplasma, etc., de origen bovino. Recientemente, se ha convertido en problemático el prión que es un patógeno de la encefalopatía espongiforme bobina (BSE) conocido como la enfermedad de las vacas locas. Como se ha indicado anteriormente, aunque el uso del suero bovino puede causar la aparición de problemas, dicho suero bovino se ha usado comúnmente en todo el mundo para la producción de vacunas, particularmente para su uso en el campo veterinario dirigido a animales. Sin embargo, actualmente se ha divulgado un intento de no usar suero bovino en el procedimiento de cultivo celular (un medio libre de suero (SFM) y un procedimiento de cultivo celular libre de suero) y la producción de una vacuna experimental para ganado bovino usando un medio libre se suero de este tipo y un procedimiento de cultivo celular libre de suero de este tipo (Makoschey y col., Serum-free produced bovine herpesvirus type 1 and bovine parainfluenza type 3 virus vaccines are efficacious and safe. Cytotechnology, 39: 139-145, 2002). En lugar del crecimiento de células en un medio de cultivo celular a partir del cual se eliminaron los componentes de suero, se describe el crecimiento de las células en un medio existente, o un medio previsto recientemente, al que se le añadieron diversas hormonas y factores de crecimiento celular en las siguientes referencias bibliográficas: Froud, S. J. The development, benefits and disadvantages of serum-free media. Brown, F., Cartwright, T., Horaud, F., Spieser, J. M. (eds): Animal sera, animal sera derivatives and substitutes used in the manufacture of 2   pharmaceuticals; Viral safety and regulatory aspects. Dev. Biol. Stand., Basel, Karger, 1999, vol. 99, págs. 157-166; Merten, O.-W. Safety issues of animal products used in serum-freemedia. Brown, F., Cartwright, T., Horaud, F., Spieser, J. M. (eds): Animal sera, anima sera derivatives and substitutes used in the manufacture of pharmaceuticals: Viral safety and regulatory aspects. Dev. Biol. Stand., Basel, Karger, 1999, vol. 99, págs. 167-180; y Merten, O.-W. Development of serum-free media for cell growth and production of viruses/viral vaccines - Safety issues of animal products used in serum-free media. Brown, F., Hendriksen, C, Sesardic, D., Cussler, K. (eds): Advancing science and elimination of the use of laboratory animals for development and control of vaccines and hormones. Dev. Biol. Stand., Basel, Karger, 2002, vol. 111, págs. 233-257. Adicionalmente, se describe el uso de componentes de origen vegetal como aditivo del medio en las siguientes referencias bibliográficas. Noe et al., Fed-batch strategies for mammalian cell cultures. In, Spier, R.E., Griffiths, J.B., Berthold, W. (eds): Animal Cell Technology: products of Today, prospects for tomorrow, Oxford, Butterworth-Heinemann, 1994, págs. 413-418. Kazushi Shibuya y col.: Serum-free medium for animal cell culture, Traducción japonesa publicada de la publicación internacional PCT para la solicitud de patente (A), Publicación de Solicitud de Patente Japonesa Nº P2002-520014A (fecha de publicación: 9 de julio de 2002). Esta bibliografía describe que se cultivaron células de ovario de hámster Chino en un medio preparado añadiendo hidrolizados de proteína de semilla de soja, un extracto de levadura y opcionalmente hidrolizados de proteína de trigo a un medio preparado excepcionalmente. Al igual que los hidrolizados de proteína de soja, se describen diversos hidrolizados, tales como polipéptidos solubles obtenidos por hidrólisis parcial con una enzima digestiva. Kwon, S.M. y col. Use of plant-derived protein hydrolysates for enhancing growth of Bombyx mori (silkworm) insect cells in suspension culture. Biotechnol. Appl. Biochem., 42: 1-7, 2005. Esta bibliografía describe que pueden usarse hidrolizados de proteína de origen vegetal (nombre comercial: HyPep 1510; Difco Co., Detroit, Ml, Estados Unidos) como sustituto para el suero bovino convencional en el cultivo de células de insecto procedentes del gusano de seda, pero no describe la composición de un medio usado en el mismo. Chun, B.-H. y col. Use of plant hydrolysates for varicella virus... [Seguir leyendo]

1. Una cepa celular depositada con el Nº de Acceso FERM ABP-10594. 2.Un procedimiento para producir un virus, que comprende: infectar la cepa celular de la reivindicación 1 con un virus, y cultivar la cepa celular infectada para multiplicar el virus. 3. El procedimiento para producir un virus de acuerdo con la reivindicación 2, en el que el medio en el cultivo de la cepa celular infectada es un medio libre de proteína de origen animal que contiene una pluralidad de peptonas procedentes de semilla de soja en una mezcla 1:1 de un medio de Eagle modificado por Dulbecco y mezcla de nutrientes (F-12 de Ham). 4. El procedimiento para producir un virus de acuerdo con la reivindicación 2 ó 3, en el que se usa un procedimiento de cultivo en suspensión en el cultivo de la cepa celular infectada. 5. El procedimiento para producir un virus de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 2 a 4, en el que el virus se selecciona entre el grupo viral que constituido por Coronaviridae, Caliciviridae, Herpesviridae y Parvoviridae. 6. El procedimiento para producir un virus de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 2 a 4, en el que el virus se selecciona entre calicivirus felino, coronavirus entérico felino, herpesvirus-1 felino, parvovirus felino, parvovirus canino tipo 2, coronavirus felino, virus de la peritonitis infecciosa felina, coronavirus canino, coronavirus respiratorio canino, virus de la gastroenteritis transmisible del cerdo, virus de la diarrea epidémica porcina y coronavirus bovino. 13   14     16   17   18