TRATAMIENTO DE ESCLEROSIS LATERAL AMIOTRÓFICA.

VEGF165 neuronas motoras en el que dicho VEGF165 se administra continuamente durante al menos 4 semanas al sitio de aparición a un intervalo de dosis entre 0,01 µg/kg/día y 0,6 µg/kg/día

Campo de la invención

La presente invención se refiere a VEGF165 para uso en el tratamiento de enfermedades de las neuronas motoras en las que dicho VEGF165 se administra continuamente durante al menos 4 semanas al sitio de aparición a una dosis en el intervalo entre 0,01 µg/kg/día y 0,6 µg/kg/día. Más particularmente, la invención se refiere al tratamiento de esclerosis lateral amiotrófica (ELA). Se encuentra que la administración intracerebroventricular de bajas cantidades de factor de crecimiento endotelial vascular a un modelo animal de ELA preclínico induce una actividad motora significativa y prolonga el tiempo de supervivencia de dichos animales. Introducción a la invención

La esclerosis lateral amiotrófica (ELA) es un trastorno paralizante devastador que mata a los pacientes en el plazo de 3 a 5 años después de la aparición 1-4 . Los síntomas clínicos resultan principalmente de la degeneración progresiva de neuronas motoras en la médula espinal y el tronco encefálico, prescindiendo en buena parte de la actividad cognitiva. La enfermedad afecta a individuos sanos en medio de su vida, esporádicamente en >90% de los casos sin ninguna historia familiar. Aunque se ven afectados más hombres que mujeres antes de la edad de 60 años, ambos sexos están similarmente afectados a edad mayor 5. Con la población en envejecimiento, cada vez más individuos sufren ELA -el tercer trastorno neurodegenerativo más común 6. Muchos pacientes con ELA notan primero debilidad muscular en sus miembros (ELA de "aparición en los miembros"). En -25% de pacientes con ELA, las neuronas motoras se degeneran primero en los núcleos motores del tronco encefálico (ELA de "aparición bulbar"), causando disartria, disfagia y problemas respiratorios. Los pacientes con ELA de aparición bulbar generalmente presentan una progresión de la

enfermedad más rápida y más agresiva que los pacientes con aparición en los miembros, pero estos últimos eventualmente también desarrollan síntomas bulbares. La causa exacta de la degeneración de neuronas motoras en la mayoría de los casos permanece en buena parte enigmática 2,4,7. Las mutaciones SOD-1 producen degeneración de neuronas motoras en seres humanos y, cuando se sobreexpresan, también en ratones transgénicos. En realidad, los ratones SOD-1G93A se han convertido en el modelo animal de referencia para evaluar el potencial terapéutico de novedosos candidatos a fármacos 8. Las ratas SOD-1G93A desarrollan una forma agresiva de ELA, pero todavía no se han usado para la evaluación de tratamientos novedosos 9,10. Una cura eficaz no autorizada está disponible ahora para ELA. Riluzol es el único fármaco autorizado en algunos países, pero no en todos, pero tiene un mínimo beneficio en la supervivencia, es costoso, no está exento de efectos secundarios y, lo que es más importante, es ineficaz en síntomas bulbares 16. Como la ELA resulta de la degeneración de neuronas motoras, desde hace mucho tiempo se han considerado factores de crecimiento neurotróficos tales como factor neurotrófico derivado del cerebro (BDNF), factor neurotrófico ciliar (CNTF), factor de crecimiento similar a la insulina (IGF)-1, factor inhibidor de leucemia (LIF), cardiotrofina (CT)-1 y factor de crecimiento de hepatocitos (HGF) como candidatos terapéuticos para ELA. Se ha mostrado que la transferencia de genes de GDNF, pero especialmente de IGF-1 usando un vector viral retrógradamente transportado por axones, prolonga la

17,18

supervivencia de ratones SOD-1G93A . Aunque están en proceso ensayos clínicos, queda por establecer la aplicabilidad clínica de la terapia génica para ELA y cuestiones sobre su naturaleza irreversible, riesgo de efectos cromosómicos adversos, escaso control de la expresión transgénica y todavía quedan por vencer grandes necesidades de producción. Por tanto, en su lugar, la administración de factores de crecimiento neurotróficos recombinantes es una estrategia terapéutica atractiva ya que

ofrece un control flexible de la dosis y la duración de la proteína administrada. Sin embargo, la infusión intratecal de BDNF 19, la administración intracerebroventricular de GDNF o la administración sistémica de BDNF o CNTF 20 no ha dado resultado hasta la fecha en la mejora clínica sustancial en pacientes con ELA, excepto una reducción del 26% de progresión de la enfermedad después de la administración de IGF-1 en un estudio, pero no en el otro 21,22. Al menos parte del fracaso puede atribuirse a la corta semivida, inmunogenicidad, efecto dual dependiente de la dosis sobre la supervivencia neuronal frente a apoptosis, toxicidad no deseada y capacidad limitada para cruzar la barrera hematoencefálica después de la administración sistémica de estas proteínas 23-25. Otro motivo posible puede referirse al hecho de que varios de estos factores, incluso a la vez que promueven la supervivencia de neuronas motoras agudamente dañadas cuando se suministran exógenamente, pueden no desempeñar una función crítica tal en el control endógeno de la supervivencia de neuronas motoras en adultos en una enfermedad crónica tal como ELA. Los inventores descubrieron recientemente que bajos niveles de VEGF son superfluos para el desarrollo de neuronas motoras que producen degeneración de neuronas motoras similar a ELA de aparición en adultos en ratones genéticamente modificados (documento WO0176620) y también aumentan el riesgo de ELA esporádica y familiar en seres humanos 13-15. El VEGF es un factor angiogénico prototipo que participa en el crecimiento de vasos en individuos sanos y con enfermedad 11,12. Para evitar problemas inmunitarios y efectos secundarios sistémicos, para vencer la capacidad limitada de VEGF para cruzar la barrera hematoencefálica y para lograr los máximos niveles de proteína VEGF en el parénquima de la médula espinal, los inventores desarrollaron una estrategia nunca previamente usada para examinar el potencial terapéutico de una proteína recombinante en estudios de ELA preclínicos, es decir, para administrar, intracerebroventricularmente, VEGF recombinante durante periodos prolongados usando un modelo

de rata SOD-1G93A transgénica de ELA. Sorprendentemente, los inventores han encontrado que niveles extremadamente bajos de VEGF165 no sólo mejoran significativamente la actividad motora, sino que también prolongan el tiempo de supervivencia en un modelo de ELA preclínico de rata con un tiempo inesperadamente largo. Los resultados muestran que bajos niveles de VEGF165 pueden ralentizar la progresión de la enfermedad de pacientes que padecen ELA cuando se administra intracerebroventricularmente. Descripción detallada de la invención

La presente invención muestra que la administración intracerebroventricular (ICV) de bajas cantidades de VEGF retrasa la aparición, mejora la actividad motora y prolonga la supervivencia de una estirpe de rata que padece una forma agresiva de ELA. Este es el primer estudio que muestra un efecto terapéutico significativo de un factor de crecimiento recombinante sobre las características de enfermedad en un modelo de ELA preclínico. Se han evaluado varios factores de crecimiento recombinantes con actividad neurotrófica conocida que incluyen BDNF, IGF-1, CNTF, LIF y GDNF en pacientes con ELA o ratones SOD1G93A, pero ningún factor de crecimiento recombinante individual proporcionó consistentemente un beneficio sustancial 19-22,35, por tanto,

19-22

desde el fracaso de los ensayos clínicos previos la administración de factores de crecimiento recombinantes ha perdido mucho de su atractivo. Como muestran aquí los inventores, el VEGF165 tiene efectos directos sobre las neuronas motoras in vivo. Aunque se sabe que el VEGF afecta diversos procedimientos neuronales in vivo 15, nunca se ha establecido si el VEGF ejerció sus efectos directamente sobre las neuronas o indirectamente por otros tipos de células o mediante otros productos intermedios moleculares. Por tanto, el VEGF165 tiene un espectro pleótropo de actividades que puede haber contribuido a su notable beneficio terapéutico en esta invención.

La presente invención proporciona la isoforma de VEGF165 para uso para el tratamiento de trastornos de neuronas

motoras y más específicamente para el tratamiento de esclerosis lateral amiotrófica y enfermedades similares a la esclerosis lateral amiotrófica, en el que dicho VEGF se administra continuamente próximo al sitio de aparición durante al menos 4 semanas a una dosis en el intervalo entre 0,01 µg/kg/día y 0,6 µg/kg/día. El VEGF165 es una proteína de 165 aminoácidos que se denomina normalmente VEGF...

para uso para tratar una enfermedad de las

1. VEGF165 neuronas motoras en el que dicho VEGF165 se administra continuamente durante al menos 4 semanas al sitio de aparición a un intervalo de dosis entre 0,01 µg/kg/día y 0,6 µg/kg/día.

2. VEG165 para uso según la reivindicación 1, en el que dicho intervalo está entre 0,01 µg/kg/día y 0,2 µg/kg/día.

3. VEGF165 para uso según la reivindicación 1, en el que dicho intervalo está entre 0,01 µg/kg/día y 0,1 µg/kg/día.

4. VEGF165 para uso según la reivindicación 1, en el que dicho intervalo está entre 0,01 µg/kg/día y 0,08 µg/kg/día.

5. VEGF165 para uso según la reivindicación 1, en el que dicho intervalo está entre 0,01 µg/kg/día y 0,06 µg/kg/día.

6. VEGF165 para uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que dicha administración es intratecal.

7. VEGF165 para uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que dicha administración es intracerebroventricular.

8. VEGF165 para uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en el que dicha administración continua de VEGF165 se produce por una minibomba osmótica implantada.

9. VEGF165 para uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en el que dicha enfermedad de las neuronas motoras es esclerosis lateral amiotrófica.