Procedimiento de purificación de 3,4-dihidroxifenilglicol (DHFG) a partir de productos vegetales.

Procedimiento de purificación de 3,4-dihidroxifenilglicol (DHFG) a partir de cualquier parte de la planta, productos o subproductos derivados del olivo o cualquier otro producto vegetal de la familia Oleaceae, Orobanchaceae, Plantaginaceae, Compositae, Lamiaceae, Acanthaceae y/o Scrophulariaceae, y que comprende 1 o más etapas en las que se introduce el producto inicial en al menos una columna de resina iónica, en posibles posteriores etapas se introduce el producto eluido en la columna anterior en una columna de resina iónica y/o de resina de adsorción no iónica. Además, se refiere al extracto de DHFG obtenible mediante el procedimiento descrito y a sus aplicaciones

Procedimiento de purificación de 3,4-dihidroxifenilglicol (DHFG) a partir de productos vegetales.

La presente invención se refiere a procedimiento de purificación de 3,4-dihidroxifenilglicol (DHFG) a partir de cualquier parte de la planta, productos ó subproductos derivados del olivo o cualquier otro producto vegetal de la familia Oleaceae, Orobanchaceae, Plantaginaceae, Compositae, Lamiaceae, Acanthaceae, y/o Scrophulariaceae. Dada las diferentes aplicaciones del DHFG, la presente invención se engloba al sector de la alimentación, farmacéutico o de la cosmética.

Estado de la técnica anterior

Estudios epidemiológicos indican que la dieta Mediterránea está asociada a una menor incidencia de enfermedades cardiovasculares, ateroesclerosis y ciertos tipos de cánceres (piel, pecho, próstata, tracto digestivo). Se trata de una dieta rica en frutas y vegetales frescos, con una relativa baja proporción de grasa animal y teniendo al aceite de oliva como principal fuente de grasa. Estos efectos beneficiosos se los han atribuido no solo a una baja proporción ácidos grasos saturados/monoinsaturados del aceite de oliva, sino también a otras moléculas adicionales presentes en menor concentración, en particular a los compuestos fenólicos antioxidantes.

El interés en los antioxidantes naturales se está incrementando hoy en día porque crecen las evidencias que indican que son capaces de contrarrestar los efectos geno y citotóxicos de los radicales libres y especies reactivas de oxígeno, que se producen en casos de estrés oxidativo y, que están implicadas en varios procesos patológicos, tales como enfermedades renales y hepáticas y en procesos inflamatorios. Es por eso que a partir de la aceituna se aislan varios de ellos destacando entre todos el hidroxitirosol (HT).

Según la "European Olive Oil Medical Information Library", el HT es un compuesto fenólico de una reconocida especial eficacia antioxidante. Sus propiedades antioxidantes se atribuyen especialmente a la presencia de dos grupos hidroxilo en posición orto, es decir un grupo ortodifenol, característico de los biofenoles.

Además de su capacidad de donar electrones y de neutralizar radicales libres, su elevada eficacia antioxidante radica en su capacidad de secuestro o quelación de iones metálicos como Fe o Cu, responsables de la formación de radicales libres durante el proceso de la oxidación. En los últimos años, se ha comprobado que este antioxidante natural posee además importantes propiedades biológicas. Mediante ensayos in vitro e in vivo se ha demostrado su capacidad para actuar como antiagregante plaquetario y como inhibidor de la oxidación de lipoproteínas de baja densidad (LDL) ricas en colesterol, lo que ayudarían a reducir la aterosclerosis. El HT es también capaz de modular la ciclooxigenasa, lipoxigenasa y óxido nítrico o NO-sintetasa, contribuyendo, por tanto, a paliar los procesos trombogénicos e inflamatorios. Además, es capaz de reducir la producción de radicales libres como el anión superóxido, y por tanto, presenta efecto inhibidor sobre la iniciación de procesos mutagénicos y carcinogénicos, e induce la apoptosis en células HL-60. Se ha demostrado también su capacidad para actuar sobre bacterias Gram-negativa y Gram-positiva y sobre el virus VIH. En estudios in vivo de biodisponibilidad en humanos, se han detectado en el plasma conjugados de dicho compuesto y su metabolito, el 3-O-metil-hidroxitirosol, siendo la cantidad absorbida dependiente de la dosis ingerida.

Actualmente, son, por tanto, numerosas las investigaciones que intentan demostrar la actuación de este compuesto en la prevención y tratamiento de gran número de enfermedades. Protege contra enfermedades neurodegenerativas, previene contra el ictus cerebral isquémico e incluye el tratamiento de la piel. Todos estos antecedentes sugieren además el uso del HT como componente funcional en alimentos, así como su empleo para la prevención del deterioro de los mismos debido a su demostrada capacidad para inhibir la oxidación de los lípidos.

Por otro lado, el 3,4-dihidroxifenilglicol (DHFG) es un compuesto muy similar al HT pero con un grupo hidroxilo adicional. Esta sustancia ha sido descrita en la aceituna, alpechín y aceite de oliva.

El DHPG presenta además una elevada actividad antioxidante superior incluso al HT, siendo su eficacia antioxidante en agua 2-3 veces más alta que el ácido ascórbico o el HT mientras que en medio lipídico es el doble que el HT y similar a la vitamina E (Rodríguez, G., Rodríguez, R., Fernández-Bolaños, J., Guillen, R., & Jiménez, A. (2007), European Food Research and Technology. 224, 733-741.) También es importante destacar que tanto el HT como el DHFG forman parte de la misma familia, los glucósidos fenilpropanoides, también llamados acteósidos o hidroxiacteósidos, dependiendo si es el HT o el DHFG los que forman parte de la molécula. La molécula está además formada por el ácido caféico y un di- o trisacárido, y están ampliamente distribuidas como metabolitos secundarios en muchas especies de plantas, muy utilizadas en la medicina tradicional oriental (china, japonesa y coreana) (Nishibe, S. (2002). Yakuqaku Zasshi. 122, 363-379), por su amplia variedad de actividades biológicas (antiproliferativas, antiinflamatorias, neurodegenerativas, etc), todas ellas explicables por su elevado poder antioxi- dante.

Debido a su similitud con el HT y al formar parte de los glucósidos de fenilpropanoides, es deseable desarrollar un método que produzca esta sustancia, DHFG, ya sea pura o en extracto acuoso, con alto porcentaje de pureza.

Descripción de la invención

La presente invención proporciona un procedimiento para la obtención de un concentrado natural, bioactivo, a partir de productos y/o subproductos derivados del olivo y o cualquier otro producto vegetal de la familia Oleaceae, Orobanchaceae, Plantaginaceae, Compositae, Lamiaceae, Acanthaceae, y/o Scrophulariaceae, que contienen DHFG, así como la obtención del DHFG de alta pureza.

El compuesto que se obtiene mediante el procedimiento de la presente invención es un extracto fenólico muy rico en DHFG.

El DHFG está presente, sobre todo, en la aceituna y el aceite de oliva virgen. También se encuentra en el organismo humano al ser un metabolito de la hormona simpático mimética noradrenalina. Posee mayor capacidad antioxidante que su acompañante en la aceituna como es el HT.

Mediante el procedimiento de la invención se obtiene el DHFG con una elevada pureza mediante técnicas cromatográficas sencillas en donde la ausencia de disolventes orgánicos simplifica y reduce sustancialmente los costos, llegándose a un sistema sencillo y muy económico, y haciéndolo totalmente compatible con los productos alimenticios.

El procedimiento de obtención de DHFG purificado de la presente invención es a partir de productos y subproductos derivados del olivo y o cualquier otro producto vegetal de la familia Oleaceae, Orobanchaceae, Plantaginaceae, Compositae, Lamiaceae, Acanthaceae, y/o Scrophulariaceae. El sistema de purificación se basa en el uso y combinación de diversos sistemas cromatográficos. Se emplean resinas de adsorción y de resinas iónicas, preferentemente resinas iónicas fuertes o débiles. Combinando columnas en serie de estas resinas se llega a obtener una disolución rica en DHFG.

La fuente de DHFG se introduce en dichas columnas obteniéndose, en función a la combinación usada, una disolución tras su elución con agua que contiene un DHFG con una pureza en peso de entre el 10-100%, acompañado de otros compuestos como el tirosol o el HT entre otros.

El procedimiento de la invención utiliza un sistema cromatográfico en una, dos, tres o más fases para la obtención de un producto natural no aislado hasta ahora. El número de fases que se van a utilizar en este procedimiento de la invención dependerá de la pureza con la que se desee obtener el producto final, DHFG.

Por tanto, un primer aspecto de la presente invención se refiere a un procedimiento de obtención de DHFG purificado (a partir de productos y subproductos derivados del olivo y o cualquier otro producto vegetal de la familia) a partir de un producto inicial procedente de especies vegetales seleccionadas de la familia de las Oleaceae, Orobanchaceae, Plantaginaceae, Compositae, Lamiaceae, Acanthaceae, Scrophulariaceae, o cualquiera de sus combinaciones, caracterizado porque comprende (a partir de... [Seguir leyendo]

1. Procedimiento de obtención de DHFG purificado a partir de un producto inicial procedente de especies vegetales seleccionada de la familia Oleaceae, Orobanchaceae, Plantaginaceae, Compositae, Lamiaceae, Acanthaceae, Scrophulariaceae o sus combinaciones, caracterizado porque comprende: