PREPARACIÓN DE APHANIZOMENÓN FLOS-AQUAE, EXTRACTOS Y COMPONENTES PURIFICADOS DE LOS MISMOS PARA EL TRATAMIENTO DE TRASTORNOS NEUROLÓGICOS, NEURODEGENERATIVOS Y DEL ÁNIMO.

Preparación de Aphanizomenon flos-aquae, extractos y componentes purificados de los mismos para el tratamiento de trastornos neurológicos, neurodegenerativos y del ánimo La presente invención se refiere a la microalga Aphanizomenon flos-aquae Aquae Ralfs ex Born. y Flah. Var. flosaquae (AFA Klamath). Más concretamente, la invención proporciona extractos de AFA Klamath útiles para la prevención o tratamiento de enfermedades o afecciones neurológicas, neurodegenerativas y del ánimo específicas. Antecedentes de la invención La feniletilamina (PEA) es una amina endógena sintetizada por descarboxilación de la fenilalanina en neuronas dopaminérgicas del sistema nigroestriado, y puede actuar como neuromodulador de la neurotransmisión de catecolamina en el cerebro (1). La acción más importante de la PEA es promover la neurotransmisión de las catecolaminas. Se sabe que la PEA estimula la liberación de acetilcolina, así como de dopamina (2). Además, la PEA aumenta la neurotransmisión de norepinefrina (NE) (6) e incluso la neurotransmisión de serotonina. Recientemente se ha demostrado que la PEA también puede funcionar como neurotransmisor autónomo con sus receptores neuronales específicos; y que actúa como un verdadero neuromodulador, siendo también capaz de deprimir la neurotransmisión si es necesario. (8) De aquí se derivan una serie completa de efectos: estimulación de la atención y de la memoria; mejora del ánimo, con actividad antidepresiva significativa; estimulación de la empatía y por tanto de la sociabilidad, incluido el comportamiento emocional y sexual; inhibición del hambre; reducción de la necesidad de abuso de sustancias y dependencia de drogas. La relación entre la PEA y el ánimo emocional se ha confirmado por estudios por los que se han descubierto niveles significativamente menores de PEA, medida como tal o a través de su metabolito PAA (ácido fenilacético) en el plasma u orina, en sujetos deprimidos. (9) Se ha observado que los pacientes con Parkinson tienen niveles significativamente menores de PEA, según se mide directamente en el plasma (12). La reducción progresiva de la neurotransmisión, particularmente dopaminérgica, en estos pacientes, está relacionada con la degeneración progresiva de las neuronas dopaminérgicas de la sustancia negra. Esta reducción en los niveles de PEA va de la mano con un aumento paralelo en los niveles de MAO-B en pacientes parkinsonianos, por lo tanto los fármacos usando en el Parkinson son inhibidores de la MAO-B tales como selegilina. (14) Además, una vez ingerida, la PEA puede atravesar fácilmente la barrera hematoencefálica y estimular la liberación de dopamina a partir del tejido nigroestriado incluso a bajas dosificaciones. Éste es un carácter distintivo importante debido a que el fármaco usado actualmente, la selegilina, al tiempo que inhibe la MAO-B y la recaptación de dopamina, no tiene ninguna acción sobre su liberación a partir del tejido nigroestriado y, por tanto, no contribuye a producir más dopamina, una limitación seria en una patología tal como el Parkinson, por lo que la misma generación de dopamina está muy comprometida. La enfermedad de Alzheimer implica una degeneración del mecanismo de producción y recaptación de dopamina y la destrucción progresiva de las neuronas del área estriada, que con el tiempo lleva a un bajo número de neuronas dopaminérgicas y, por consiguiente, de transmisión de dopamina. (15) Aunque no existen datos claros sobre el hecho de que el TDAH (trastorno de déficit de atención e hiperactividad) sea una patología neurodegenerativa, algunos estudios han intentado demostrar que la destrucción neuronal es una causa principal de TDAH tanto en niños como en adultos. (19) Lo que es más importante, existen pruebas por las que los niños afectados por TDAH y discapacidades del aprendizaje tienen niveles significativamente menores de PEA (21), y por tanto una reducción en la neuromodulación de la atención (dopamina) y la sedación (serotonina). Es por eso que el fármaco de elección para el TDAH es el metilfenidato, un derivado sintético de la PEA, que también actúa estimulando una mayor producción de PEA (22) y, por tanto, de dopamina y norepinefrina, dos neurotransmisores directamente implicados en la etiología del TDAH. Es bien conocido el uso de anfetaminas para controlar el hambre y, por consiguiente, el peso. Su uso en esta área ha sido siempre controvertido debido a sus efectos secundarios que, dada también su tolerancia, tienden a convertirse en potencialmente muy graves con el tiempo. Esto se confirma por el hecho de que los fármacos principales actualmente usados para el control del hambre y del peso son antidepresivos dopaminérgicos de tipo anfetaminas tales como venlafaxina y bupropión. Estas moléculas, como todas las anfetaminas, son derivados sintéticos de la PEA. La última actúa como un potente supresor del apetito en la medida en que se impide su degradación por enzimas MAO-B. La monoaminoxidasa (MAO) A y B catalizan la degradación de aminas neuroactivas y vasoactivas en el SNC y en tejidos periféricos. La MAO-B en particular, dada su importancia directa e indirecta para la transmisión 2 E07764849 26-10-2011   dopaminérgica, está implicada en trastornos neurológicos en los que la dopamina es esencial, tales como una depresión y trastornos del ánimo, enfermedades de Parkinson y de Alzheimer. Por esta razón, se usan inhibidores de la MAO-B en el tratamiento de dichos trastornos neurológicos. (26) Descripción de la invención La invención se basa en la identificación, en la microalga Aphanizomenon flos-aquae Aquae Ralfs ex Born. y Flah. Var. flos-aquae (AFA Klamath), de sustancias que, en combinación, ejercen efectos beneficiosos sobre diversas enfermedades, afecciones, disfunciones o trastornos neurológicos, incluyendo enfermedades neurodegenerativas, en concreto sobre Alzheimer y Parkinson, esclerosis múltiple, trastornos de déficit de atención e hiperactividad (TDAH), autismo, depresión, déficit de memoria y alteraciones del ánimo. En particular, se ha descubierto que la microalga AFA Klamath contiene, aparte de feniletilamina, que es un neuromodulador caracterizado por actividad dopaminérgica y noradrenérgica, moléculas específicas que bastante sorprendentemente demostraron ser inhibidores muy eficaces de la enzima monoaminoxidasa B (MAO-B), en concreto: a) el fitocromo de AFA específico; b) el complejo de ficobiliproteína de AFA, que contiene un ficobilisoma formado por C-ficocianina (C-PC) y ficoeritrocianina (PEC, incluyendo su cromóforo ficoviolobilina o PVB) (ficocianinas de AFA); c) aminoácidos de tipo micosporina o MAA. Este descubrimiento es muy importante puesto que la PEA contenida en las algas, a menos que esté protegida por inhibidores de la MAO-B, se destruiría rápidamente tras la ingestión por la enzima MAO-B. Las mismas moléculas que actúan como inhibidores selectivos de la MAO-B también realizan un potente papel neuroprotector, por tanto aumentan significativamente la capacidad del extracto para promover la salud neurológica. Por consiguiente, la invención proporciona un uso para la fabricación de una composición para prevenir, controlar o tratar las enfermedades, afecciones, disfunciones o trastornos neurológicos mencionados anteriormente, de un extracto de AFA Klamath enriquecido en dichos componentes activos, que se prepara mediante las etapas siguientes: a) congelar el alga AFA recién recogida y descongelarla o, si el material de partida es polvo de AFA seco, sonicar el polvo de AFA diluido en agua para romper las células; b) centrifugar el producto de la etapa a) para separar el sobrenadante (que conserva la mayor parte de la porción citoplasmática) del precipitado (que conserva la mayor parte de la fracción de pared celular); c) recoger el sobrenadante que contiene los componentes solubles en agua. El producto resultante es un extracto (indicado como Extracto Básico) que concentra la PEA así como otras moléculas sinérgicas tales como el fitocromo de AFA, las ficocianinas de AFA y los MAA. Por ejemplo, mientras que las microalgas Klamath tienen un contenido natural de PEA que varía de 2 a 4 mg/g, el Extracto Básico aumenta esta concentración hasta un nivel que varía de 9 a 11 mg/g (análisis de HPLC). Es posible purificar adicionalmente el extracto pasándolo a través de un sistema de ultrafiltración, preferentemente a través de una membrana con un límite de peso molecular de 30.000 Daltons. El material retenido de ultrafiltración (Extracto A) contiene como componentes activos principales tanto las ficocianinas de AFA (peso molecular = 121.000) como el fitocromo de AFA (peso molecular 480.000). Curiosamente, aun cuando los MAA tienen un peso molecular bien por debajo del tamaño límite empleado, el material retenido también aumenta la concentración de MAA. El... [Seguir leyendo]

1. El uso de un extracto de la microalga Aphanizomenon flos-aquae Aquae Ralfs ex Born. y Flah. Var. flos-aquae (AFA Klamath), en el que el extracto se prepara mediante las etapas siguientes: a) congelar el alga AFA recién recogida y descongelarla o, si el material de partida es polvo de AFA seco, sonicar el polvo de AFA diluido en agua para romper las células; b) centrifugar el producto de la etapa a) para separar el sobrenadante del precipitado; c) recoger el sobrenadante que contiene los componentes solubles en agua para la fabricación de una composición para prevenir, controlar o tratar una de las siguientes enfermedades, afecciones, disfunciones o trastornos neurológicos: enfermedad de Alzheimer, enfermedades de Parkinson, esclerosis múltiple, trastornos de déficit de atención e hiperactividad (TDAH), autismo, depresión, déficit de memoria y alteraciones del ánimo. 2. El uso de acuerdo con la reivindicación 1, en el que dicho extracto contiene los siguientes componentes de la microalga Aphanizomenon flos-aquae Aquae Ralfs ex Born. y Flah. Var. flos-aquae (AFA Klamath): complejo de Cficocianina/ficoeritrocianinas (C-PC/PEC), sus cromóforos separados ficocianobilina (PCB) y ficoviolobilina (PVB), el fitocromo de AFA, aminoácidos de tipo micosporina (MAA) y feniletilamina (PEA). 3. El uso de acuerdo con la reivindicación 1, en el que el extracto de AFA Klamath se purifica adicionalmente sometiendo dicho sobrenadante a ultrafiltración usando una membrana de ultrafiltración con un límite de peso molecular de 30.000 Daltons. 4. El uso de acuerdo con la reivindicación 1, en el que dicha composición es adecuada para su administración a seres humanos. 5. El uso de acuerdo con la reivindicación 1, en el que dicho extracto se formula con vehículos o excipientes farmacéuticamente aceptables. 16 E07764849 26-10-2011   17 E07764849 26-10-2011   18 E07764849 26-10-2011   19 E07764849 26-10-2011   E07764849 26-10-2011   21 E07764849 26-10-2011   22 E07764849 26-10-2011   23 E07764849 26-10-2011   24 E07764849 26-10-2011   E07764849 26-10-2011   26 E07764849 26-10-2011   27 E07764849 26-10-2011   28 E07764849 26-10-2011   29 E07764849 26-10-2011   E07764849 26-10-2011   31 E07764849 26-10-2011   32 E07764849 26-10-2011   33 E07764849 26-10-2011   34 E07764849 26-10-2011   E07764849 26-10-2011   36 E07764849 26-10-2011   37 E07764849 26-10-2011   38 E07764849 26-10-2011   39 E07764849 26-10-2011   E07764849 26-10-2011