MICROCÁPSULAS LÍPIDAS SÓLIDAS QUE CONTIENEN HORMONA DEL CRECIMIENTO EN EL NÚCLEO SÓLIDO INTERNO.

Microcápsulas que comprenden (1) al menos un núcleo sólido interno que contiene al menos una hormona del crecimiento,

un agente de carga, que es un alcohol de azúcar, un azúcar y/o un amino azúcar, un tensioactivo, que es un polisorbato o un copolímero de bloque polioxietileno-polioxipropileno, y (2) una cubierta externa que comprende al menos un lípido.

La presente invención hace referencia a formulaciones de hormona del crecimiento (GH) que tienen propiedades de liberación controlada, en particular la hormona del crecimiento humana (hGH) y a métodos para su preparación. Las formulaciones de hormona del crecimiento pueden elaborarse sin la desnaturalización de la proteína y pueden administrarse en forma conveniente a la persona que la necesita mediante la utilización de una jeringuilla convencional, o un dispositivo de inyección mecánico o electrónico, mediante una aguja de diámetro pequeño.

Los regímenes de tratamiento actuales para la deficiencia de hGH en humanos se basan principalmente, por ejemplo, en la administración de hGH mediante una inyección subcutánea. Las hGH desempeñan un papel fundamental en la regulación del crecimiento de células y órganos, y en la función fisiológica a lo largo de diversas etapas del desarrollo y envejecimiento. Por ejemplo, la sobreproducción de hGH produce gigantismo en niños y acromegalia en adultos, mientras que una producción insuficiente lleva al enanismo en niños [Mauras et al., J. Clin. Endocrinology and Metabolism, 85(10), 3653-3660 (2000); Frindik et al., Hormone Research, 51(1), 15-19 (1999); Leger et al., J. Clin. Endocrinology and Metabolism, 83(10), 3512-3516 (1998)], Síndrome de Turner (sólo en mujeres) [Bramswig, Endocrine, 15(1), 5-13 (2001); Pasquino et al., Hormone Research, 46(6), 269-272 (1996)] e insuficiencia renal crónica [Carroll et al., Trends in Endocrinology and Metabolism, 11(6), 231-238 (2000); Ueland et al., J. Clin. Endocrinology and Metabolism, 87(6), 2760-2763 (2002); Simpson et al., Growth Hormone & IGF Research, 12, 1-33 (2002)]. En adultos, la deficiencia de hGH puede afectar el procesamiento metabólico de las proteínas, los carbohidratos, los lípidos, los minerales y los tejidos conjuntivos, y puede dar como resultado atrofia muscular, ósea o cutánea [Mehls and Haas, Growth Hormone & IGF Research, Supplement B, S31-S37 (2000); Fine et al., J. Pediatrics, 136(3), 376-382 (2000); Motoyama et al., Clin. Exp. Nephrology, 2(2), 162-165 (1998)]. Otros trastornos relacionados con la deficiencia de hGH que se caracterizan por la deficiencia o problemas de crecimiento incluyen el síndrome de desgaste por SIDA [Hirschfeld, Hormone Research, 46, 215-221 (1996); Tritos et al., Am. J. Medicine, 105(1), 44-57 (1998); Mulligan et al., J. Parenteral and Enteral Nutrition, 23(6), S202-S209 (1999); Torres and Cadman, BioDrugs, 14(2), 83-91 (2000)] y el síndrome de Prader-Willi [Ritzen, Hormone Research, 56(5-6), 208 (2002); Eiholzer et al., Eur. J . Pediatrics, 157(5), 368-377 (1998)].

La patente US5219572 hace referencia a dispositivos de administración de liberación controlada para las proteínas macromoleculares basados en perlas microencapsuladas. Las últimas comprenden una cubierta de cera rompible, que rodea completamente una matriz del núcleo que contiene una proteína molecular y agentes tensioactivos, ligantes, estabilizadores. En el ejemplo 1 la somatotropina es combinada con arginina y sacarosa en el núcleo.

En la patente US2001044026 una composición insoluble en agua comprende un material de núcleo y un material de cubierta insoluble en agua. La formulación de las composiciones de microcápsulas incluye compuestos de núcleo orgánicos insolubles o ligeramente solubles en agua, y comprende la mezcla de un agente tensioactivo o una sal inorgánica micronizada con dicho material de núcleo.

Se han desarrollado varios productos en un intento por abordar la necesidad de agentes terapéuticos de hGH estables y de larga duración y que, por lo tanto, puedan administrarse mediante una pauta de inyecciones menos frecuentes.

A estos efectos, se han utilizado diversas tecnologías de administración de fármacos, tales como hidrogeles [Katakam et al., J. Controlled Release, 49 (1), 21-26 (1997); Kim and Park, J. Controlled Release, 80(1-3), 69-77 (2002)], liposomas [Weiner et al., J . Pharm. Sci ., 74(9), 922-925 (1985)], emulsiones de aceite [Yu et al., J. Pharm. Sci., 85(4), 396-401 (1996); Zhao et al., J. Dairy Sci., 75(11), 3122-3130 (1992)] y microesferas de polímeros biodegradables [Jostel et al., Clin. Endocrinol. (Oxf), 62 (5) :623-627 (2005); Sun et al., J. Pharmacol. Exp. Ther., 289 (3):1523-1532 (1999); Jones et al., Adv. Drug Deliv. Rev., 28(1): 1-84 (1997); Johnson et al., Wat Med, 2(7):795-799 (1996)]. Sin embargo, las formulaciones de hGH resultantes habitualmente presentan una liberación repentina no deseable del fármaco, o bien pueden ser difíciles de elaborar.

Por ejemplo, la Nutropin Depot®, es una suspensión inyectable de microesferas de poliláctido-co-glicólido (PLG) que contienen hormona del crecimiento humana recombinante (r-hGH) (véase http://www.gene.com). Los considerables costes de elaboración han ocasionado la retirada de ese producto del mercado. Además, los estudios que incluyen la administración de Nutropin Depot® en pacientes pediátricos llevan a reacciones adversas en el sitio de inyección, dando como resultado nódulos, eritema, dolor, contusiones, picazón, lipoatrofia e hinchazón.

Otro producto actualmente en desarrollo por LG Pharmaceuticals Inc. (Corea del Sur), es una formulación de suspensión de micropartículas que contiene hGH, hialuronato, lecitina y triglicéridos. Los inconvenientes de este producto incluyen medios de administración desfavorables, específicamente, un fluido de administración que se debe inyectar por medio de una aguja calibre 26 [Kim et al., J. Controlled Release, 104: 323-335 (2005); Solicitud de Patente de los Estados Unidos Nº 2005/0100605; EP 0918535 B1].

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Las solicitudes de patente PCT WO 2004/060310 y WO 2004/060920 hacen referencia a formulaciones de hGH, que incluyen aquellas que comprenden cristales de hGH del complejo formado con polielectrolitos (es decir, policationes). Tales composiciones son estables y capaces de una liberación de hGH controlada por hasta un período de 1 semana. Mientras que los componentes de cristales de hGH del complejo formado por policationes vuelven estables y de larga duración a estas composiciones, existe la posibilidad de que en algunos pacientes, la naturaleza cargada de la superficie de cristal en complejo pueda llevar a una reacción local, que incluye enrojecimiento e hinchazón leves en el sitio de la inyección.

Es objeto de la presente invención proporcionar una formulación de liberación controlada, que evite en gran medida las desventajas de las formulaciones del arte previo tales como los efectos de estallido, propiedades de liberación controlada limitadas y que no contenga auxiliares que causen reacciones adversas tales como los polielectrolitos. Además, la formulación de liberación controlada debería administrarse fácilmente mediante una aguja calibre 27-29

(G) mediante la utilización de una jeringuilla convencional, o a través de un dispositivo de inyección mecánico o electrónico.

De manera sorprendente, se ha descubierto que tal formulación puede obtenerse al proporcionar microcápsulas, que comprenden al menos un núcleo sólido interno que contiene una hormona del crecimiento, un agente de carga y un tensioactivo, y una cubierta externa alrededor de ese núcleo sólido interno que comprende al menos un lípido. En consecuencia, la presente invención hace referencia a una formulación de partículas que comprende (1) al menos un núcleo sólido interno que contiene al menos una hormona del crecimiento, un agente de carga y un tensioactivo y

(2) una cubierta externa que comprende al menos un lípido. El núcleo sólido interno está hecho de al menos una micropartícula que contiene una hormona del crecimiento. Las microcápsulas con multinúcleos sólidos, es decir que contienen más de una micropartícula de hormona del crecimiento rodeada por una cubierta externa, también son parte de la invención.

La hormona del crecimiento que puede formularse de acuerdo con la presente invención puede ser de origen animal, tal como la hormona del crecimiento bovina o porcina. Preferentemente, es de origen humano. Una realización preferente de la invención hace referencia a microcápsulas, en donde la hormona del crecimiento es una hormona del crecimiento humana (hGH) o un derivado, fragmento, variante, o análogo funcional, o una sal de la misma que retiene la actividad biológica de la hormona del crecimiento humana.

El término "hormona del crecimiento humana", o "hGH", como se utiliza en la presente invención, preferentemente comprende una secuencia de aminoácidos como se ilustra en la Figura 5. El término "hormona... [Seguir leyendo]

1. Microcápsulas que comprenden (1) al menos un núcleo sólido interno que contiene al menos una hormona del crecimiento, un agente de carga, que es un alcohol de azúcar, un azúcar y/o un amino azúcar, un tensioactivo, que es un polisorbato o un copolímero de bloque polioxietileno-polioxipropileno, y (2) una cubierta externa que comprende al menos un lípido.

2. Microcápsulas conforme a la reivindicación 1, en donde la hormona del crecimiento es una hormona del crecimiento humana (hGH) o un derivado, fragmento, variante, análogo funcional, o una sal de ésta que retiene la actividad biológica de la hormona del crecimiento humana.

3. Microcápsulas conforme a la reivindicación 2, en donde el azúcar es un mono-, di-o trisacárido.

4. Microcápsulas conforme a la reivindicación 3, en donde el azúcar es sucrosa, lactosa, maltosa o trehalosa, preferentemente sucrosa.

5. Microcápsulas conforme a la reivindicación 2, en donde el amino azúcar es glucosamina, N-metilglucosamina, galactosamina o ácido neuramínico.

6. Microcápsulas conforme a la reivindicación 2, en donde el alcohol de azúcar es manitol, sorbitol, dulcitol, xilitol o ribitol, preferentemente manitol.

7. Microcápsulas conforme a una o más de las reivindicaciones 1 a 7, en donde el tensioactivo es éster de ácidos grasos de sorbitán polioxietileno, monooleato de sorbitán polioxietileno (20) o monolaurato de sorbitán polioxietileno (20).

8. Microcápsulas conforme a una o más de las reivindicaciones 1 a 7, en donde el lípido tiene un punto de fusión de al menos aproximadamente 40ºC, preferentemente en el rango de 45ºC a 80ºC y más preferentemente en el rango de 48ºC a 75ºC.

9. Microcápsulas conforme a una o más de las reivindicaciones 1 a 8, en donde el lípido es un alcohol graso, un éster de ácidos grasos, un éster de poliol o un éster de al menos un ácido graso y al menos un poliol.

10. Microcápsulas conforme a una o más de las reivindicaciones 1 a 9, en donde el lípido es un glicérido poliglicolisado y/o un éster de glicerol y ácidos grasos.

11. Microcápsulas conforme a una o más de las reivindicaciones 1 a 10, en donde el lípido es glicéridos poliglicolisados saturados que tienen un punto de fusión de 50ºC y un valor HLB igual a 2, un gliceril (palmitoestearato) o una mezcla de éstos.

12. Microcápsulas conforme a una o más de las reivindicaciones 1 a 11, en donde la fase que constituye la cubierta externa contiene un agente de dispersión para el núcleo interno.

13. Microcápsulas conforme a la reivindicación 12, en donde el agente dispersante es un fosfolípido o derivado de éste, preferentemente lecitina de soja.

14. Microcápsulas conforme a una o más de las reivindicaciones 1 a 13, en donde la cubierta externa también contiene un plastificante.

15. Microcápsulas conforme a la reivindicación 14, en donde el plastificante es un triglicérido de cadena media de un Poloxamer.

16. Formulación farmacéutica que comprende microcápsulas conforme a una o más de las reivindicaciones 1 a 15 en suspensión en un medio de dispersión.

17. Forma de presentación de la formulación conforme a cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15 herméticamente cerrada en una condición de esterilización dentro de un envase adecuado para el almacenamiento antes de su utilización.

18. Kit que comprende un envase que contiene las microcápsulas conforme a una o más de las reivindicaciones 1 a 15 que comprenden (1) un núcleo interno que contiene una hormona del crecimiento, un agente de carga, que es un alcohol de azúcar, un azúcar, y/o un amino azúcar, un agente tensioactivo, que es un polisorbato o un copolímero de

bloque polioxietileno-polioxipropileno, y (2) una cubierta externa que comprende al menos un lípido y un envase con un medio de dispersión.

19. Proceso para preparar una formulación conforme a cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15, en donde el núcleo interno se prepara utilizando la técnica de secado por pulverización y la cubierta externa se prepara utilizando un proceso basado en un fluido presurizado.

20. Proceso para preparar microcápsulas conforme a la reivindicación 19, que comprende los pasos de:

(a) preparar una solución/dispersión acuosa que comprende al menos una hormona del crecimiento, un agente de carga, que es un alcohol de azúcar, un azúcar, y/o un amino azúcar, y un tensioactivo, que es un polisorbato

o un copolímero de bloque polioxietileno-polioxipropileno;

(b) secar por pulverización la solución/dispersión acuosa preparada en el paso (a) para producir micropartículas que contienen proteína;

(c) recoger las micropartículas obtenidas en el paso (b);

(d) preparar una dispersión homogénea que comprende las micropartículas obtenidas en el paso (c) y la fase que constituye la cubierta externa en un fluido presurizado, bajo condiciones de presión y temperatura donde el fluido presurizado se disuelve en la fase lípida;

(e) despresurizar la dispersión preparada en el paso (d) a través de una boquilla y recolectar las microcápsulas obtenidas en el paso (e).

21. Proceso para preparar microcápsulas conforme a cualquiera de las reivindicaciones 19 a 20 en donde el núcleo interno se prepara utilizando la técnica de secado por pulverización y la cubierta externa se prepara utilizando un fluido presurizado cuya presión durante el paso de disolución y dispersión se encuentra comprendida entre 0,4 Pc y 3 Pc, preferentemente entre 0,5Pc y 2 Pc, más preferentemente entre 0,75 Pc y 1,5 Pc, siendo Pc la presión crítica del fluido.

22. Proceso para preparar microcápsulas conforme a cualquiera de las reivindicaciones 19 a 21 en donde el fluido presurizado es dióxido de carbono.

23. Proceso conforme a la reivindicación 22 en donde el dióxido de carbono dilata el lípido para formar una fusión saturada durante el paso de disolución y dispersión (d).

24. Proceso conforme a cualquiera de las reivindicaciones 22 y 23 en donde la temperatura durante el paso de disolución y dispersión (d) se encuentra en el rango de 30ºC a 70ºC, preferentemente entre 35ºC y 65ºC, y más preferentemente es de aproximadamente 60ºC.

25. Proceso conforme a cualquiera de las reivindicaciones 22 a 24 en donde la presión durante el paso de disolución y dispersión (d) se encuentra en el rango de 6,0 MPa a 11,0 MPa, preferentemente cerca de aproximadamente 6 MPa o aproximadamente 10 MPa, y la presión pos-expansión se encuentra en el rango de 1,0 MPa a 5,5 MPa, preferentemente en el rango de 1,5 MPa a 3,5 MPa, y más preferentemente en el rango de 3,0 MPa a 5,0 MPa.