Una cepa de bacterias lácticas del género Lactobacilli que puede obtenerse mediante aislamiento a partir de tracto gastrointestinal canino seccionado y lavado que tiene actividad probiótica,

en donde la cepa es de la especie Lactobacillus murinus/ruminus cepa AHC1222-número de registro NCIMB 41194, Lactobacillus murinus/ruminus cepa AHC3133-número de registro NCIMB 41195, Lactobacillus murinus/ruminus cepa AHC5323-número de registro NCIMB 41196, Lactobacillus murinus/ruminus cepa AHC6331-número de registro NCIMB 41197 o mezclas de los mismos.

CAMPO TÉCNICO

La presente invención se refiere al campo de los microorganismos probióticos, más específicamente bacterias lácticas probióticas caninas y métodos de uso.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

Los mecanismos de defensa de protección del tracto gastrointestinal (TG) de mamíferos frente a la colonización por bacterias son muy complejos. En la mayoría de los mamíferos, el tracto gastrointestinal está colonizado por microflora nativa y microorganismos patógenos invasivos. En un estado saludable, esta microflora competitiva está en estado de equilibrio. La modificación del equilibrio de la microflora intestinal puede provocar o prevenir muchos trastornos del tracto gastrointestinal, tanto en humanos como en otras especies de mamíferos como, por ejemplo, animales de compañía, incluyendo gatos, perros y conejos. El bienestar de los animales de compañía está muy relacionado con su alimentación y la salud de su tracto gastrointestinal, y el mantenimiento del equilibrio de la microflora intestinal de dichos animales puede resultar en mascotas más sanas.

La cantidad y composición de la microflora intestinal tiende a ser estable, aunque la edad y la dieta pueden modificarla. La acidez gástrica, la bilis, la peristalsis intestinal y la inmunidad local son factores que se consideran importantes en la regulación de la flora bacteriana en el intestino delgado de los seres humanos y diversos mamíferos. A menudo, los trastornos del tracto gastrointestinal, incluidos los de caninos y felinos, están asociados al exceso de crecimiento bacteriano y a la producción de enterotoxinas por parte de bacterias patógenas. Estos factores alteran el equilibrio de la microflora intestinal y pueden favorecer la inflamación y respuestas inmunes aberrantes.

Durante los últimos años, la investigación ha comenzado a resaltar algunas cepas valiosas de bacterias y su uso potencial como agentes probióticos. Se consideran como probióticos las preparaciones de bacterias, viables o muertas, sus constituyentes como, por ejemplo, proteínas o carbohidratos, o fracciones purificadas de fermentos bacterianos que favorecen la buena salud de los mamíferos conservando la microflora natural en el tracto gastrointestinal y reforzando los controles normales en las respuestas inmunes aberrantes. Algunos expertos creen que las bacterias probióticas son más eficaces cuando se derivan de las especies a tratar o especies relacionadas cercanamente con las mismas. Por lo tanto, existe la necesidad de obtener cepas probióticas derivadas de animales de compañía para usarlas para animales de compañía que sean diferentes de las derivadas de los humanos.

WO 01/90311 describe microorganismos probióticos aislados de muestras fecales obtenidas de gatos y perros que tienen actividad probiótica. Sin embargo, estas bacterias se obtuvieron de muestras fecales, y pueden no formar parte de la microflora intestinal natural presente en la parte superior del tracto gastrointestinal.

JCM, número de registro 5670 se refiere a una cepa de Lactobacillus animalis depositada por Dent y Williams (1983).

JCM, número de registro 1717 se refiere a una cepa de Lactobacillus murinus, depositada por Hemme y col. (1982).

“Species specific oligonucleotide probes for the detection and identification of Lactobacillus isolated from mouse faeces” de S.H. Park y K. Itoh en J. Appl. microbiology 2005,99,51-57 se refiere al desarrollo de técnicas de seguimiento específicas para cada especie para la detección e identificación rápida de Lactobacillus procedentes de heces de ratón.

WO03/01298 se refiere a cepas de Lactobacillus salivarius probióticas.

Por consiguiente, es necesario proporcionar cepas de bacterias que puedan obtenerse mediante aislamiento de la microflora intestinal natural presente en la parte superior del tracto gastrointestinal que estén adaptadas especialmente para animales de compañía y se hayan seleccionado por sus propiedades probióticas y capacidad para sobrevivir el procesamiento, e incorporar dichas cepas en composiciones que son adecuadas para su uso.

SUMARIO DE LA INVENCIÓN

Una cepa de bacterias lácticas del género Lactobacilli que puede obtenerse mediante aislamiento de tracto gastrointestinal seccionado y lavado que tiene actividad probiótica, en donde la cepa es la especie Lactobacillus murinus/ruminus AHC1222-número de registro NCIMB41194, Lactobacillus murinus/ruminus AHC 3133-número de registro NCIMB 41195, Lactobacillus murinus/ruminus AHC 5323-número de registro NCIMB 41196, Lactobacillus murinus/ruminus AHC 6331-número de registro NCIMB 41197 o mezcla de los mismos.

Además, la presente invención tiene como objeto proporcionar usos de bacterias lácticas que pueden obtenerse mediante aislamiento de tracto gastrointestinal canino seccionado y lavado para mantener y mejorar la salud de las mascotas, y composiciones que comprenden bacterias lácticas.

Estas características y otras características, aspectos y ventajas de la presente invención resultarán evidentes para los expertos en la técnica después de leer el presente ejemplo. BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS La Figura 1 demuestra la inhibición del crecimiento in vitro de Salmonella typhimurium por parte de la bacteria Lactobacilli de la presente invención según la metodología expuesta en el ejemplo 2. La Figura 2 demuestra la inhibición del crecimiento in vitro de Listeria monocytogenes por parte de la bacteria Lactobacilli de la presente invención según la metodología expuesta en el ejemplo 2.

La Figura 3 demuestra la inhibición del crecimiento in vitro de Listeria innocua por parte de la bacteria Lactobacilli de la presente invención según la metodología expuesta en el ejemplo 2. 10 La Figura 4 demuestra la inhibición del crecimiento in vitro de Escherichia coli 0157H45 por parte de la bacteria

Lactobacilli de la presente invención según la metodología expuesta en el ejemplo 2. La Figura 5 demuestra la estabilidad en medio ácido in vitro de las bacterias Lactobacilli de la presente invención según la metodología expuesta en el ejemplo 3.

La Figura 6 demuestra las características del crecimiento de las bacterias Lactobacilli de la presente invención en presencia de sales biliares porcinas en una cantidad de 0,5%, 1% y 5%. La Figura 7 demuestra la capacidad in vitro de las bacterias Lactobacilli de la presente invención para adherirse a células epiteliales estomacales HT-29.

Secuencias SEC. n.° 1 – 16s-23s secuencia de nucleótidos del espaciador intergénico de Lactobacillus murinus AHC 1222 20 (NCIMB 41194).

SEC. n.° 2 – 16s-23s secuencia de nucleótidos del espaciador intergénico de Lactobacillus murinus AHC 3133 (NCIMB 41195). SEC. n.° 3 – 16s-23s secuencia de nucleótidos del espaciador intergénico de Lactobacillus murinus AHC 5323

(NCIMB 41196). SEC. n.° 4 – 16s-23s secuencia de nucleótidos del espaciador intergénico de Lactobacillus murinus AHC 6331 (NCIMB 41197). SEC. n.° 5 – 16s-23s PCR secuencias cebadoras para análisis de secuencia. Números de registro de bacterias La siguiente tabla indica especies Lactobacillus y número de cepa para las cepas que son ejemplos de la presente invención. Las cepas bacterianas están depositadas en National Collections of Industrial Food and Marine Bacteria (NCIMB), Aberdeen, Reino Unido.

DESCRIPCIÓN DETALLADA Todos los pesos, medidas y concentraciones de la presente memoria están medidos a 25 °C en la composición en su totalidad, salvo que se indique lo contrario. Salvo que se indique lo contrario, todos los porcentajes de composiciones referidas en la presente memoria son porcentajes en peso y todas las relaciones son relaciones en peso. Salvo que se indique lo contrario, todos los pesos moleculares son pesos moleculares promedios en peso.

Excepto en los casos en los que se detallan los valores de medición reales de ejemplos específicos, los valores numéricos a los que se hace referencia en la presente memoria deberán considerarse acompañados por la palabra “aproximadamente”.

Con la siguiente descripción, la abreviación CFU (“unidad formadora... [Seguir leyendo]

1. Una cepa de bacterias lácticas del género Lactobacilli que puede obtenerse mediante aislamiento a partir de tracto gastrointestinal canino seccionado y lavado que tiene actividad probiótica, en donde la cepa es de la especie Lactobacillus murinus/ruminus cepa AHC1222-número de registro NCIMB 41194, Lactobacillus murinus/ruminus cepa AHC3133-número de registro NCIMB 41195, Lactobacillus murinus/ruminus cepa AHC5323-número de registro NCIMB 41196, Lactobacillus murinus/ruminus cepa AHC6331-número de registro NCIMB 41197 o mezclas de los mismos.

2. La cepa según la reivindicación 1, que tiene la capacidad de sobrevivir y colonizar el tracto gastrointestinal de un animal de compañía, en donde el animal de compañía es un perro o un gato.

3. La cepa según la reivindicación 1 ó 2, que tiene al menos 66% de crecimiento cuando se cultiva en presencia de sales biliares al 0,5%.

4. La cepa según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, capaz de mantener viabilidad durante 1 hora a pH 2,5.

5. La cepa según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en donde dichas Lactobacilli probióticas aumentan la degradación de ácido oxálico in vitro.

6. La cepa según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, para mantener o mejorar la salud de un animal de compañía.

7. La cepa según la reivindicación 6, para aumentar la digestión de fibra en animales de compañía.

8. La cepa según la reivindicación 6, para reducir niveles de estrés en animales de compañía, en donde dichos niveles de estrés se miden determinando el nivel de hormonas de estrés seleccionadas del grupo que consiste en epinefrina, norepinefrina, dopamina, cortisol, proteína C-reactiva y mezclas de los mismos.

9. La cepa según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, para tratar enfermedades seleccionadas de la regulación del sistema inmunológico de animales de compañía, mantener o mejorar la salud de la piel y/o el pelaje de animales de compañía, mejorar o reducir los efectos del envejecimiento en los animales de compañía, evitar la pérdida de peso durante y después de una infección en animales de compañía, tratar o prevenir la infección gastrointestinal en animales de compañía, tratar o prevenir afecciones del tracto urinario en animales de compañía, o mezclas de los mismos.

10. La cepa según la reivindicación 9, para la regulación del sistema inmunológico de animales de compañía que comprende tratar o prevenir la enfermedad autoimmune en animales de compañía, tratar o prevenir la inflamación en animales de compañía, o mezclas de los mismos.

11. La cepa según la reivindicación 9, para mantener o mejorar la salud de la piel y/o el pelaje de animales de compañía que comprende tratar o prevenir la enfermedad atópica de la piel en animales de compañía.

12. La cepa según la reivindicación 9, para tratar o prevenir la infección gastrointestinal en animales de compañía que comprende mejorar la ecología microbiana de animales de compañía, reducir los niveles de bacterias patógenas en las heces de animales de compañía o mezclas de los mismos, en donde dichas bacterias patógenas se seleccionan del grupo que consiste en Clostridia, Escherichia, Salmonella, o mezclas de los mismos.

13. La cepa según la reivindicación 12, para tratar o prevenir afecciones del tracto urinario en animales de compañía en donde dicha afección del tracto urinario comprende infección del tracto urinario, piedras en el riñón o mezclas de los mismos.

14. La cepa según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13, en donde la cepa alimenta a un animal en cualquier cantidad de 1,0E+04 a 1,0E+12 CFU/animal por día, en donde el animal de compañía es un perro o un gato.

15. Una composición que comprende una cepa según cualquiera de las reivindicaciones anteriores y un vehículo.

16. La composición según la reivindicación 15, en donde la composición es un alimento húmedo para animales, un alimento seco para animales, una croqueta, un producto masticable, una galleta, un suplemento alimenticio para animales de compañía, una salsa de carne, un yogur, queso u otro producto lácteo, una cápsula, un comprimido o una pastilla.

17. La composición según una cualquiera de las reivindicaciones 15 a 16, que comprende al menos 0,001% de aproximadamente 1,0E+04 CFU/g a aproximadamente 1,0E+12 CFU/g de las bacterias lácticas según la reivindicación 1.

18. La composición según una cualquiera de las reivindicaciones 15 a 17, en donde las bacterias lácticas según la reivindicación 1 están en forma de células viables, células no viables, o las fracciones activas constituyentes de las mismas.