Una formulación líquida estable de turbidez baja que comprende (a) un anticuerpo dirigido contra IgE en una cantidad de aproximadamente 150 a 260 mg/ml,

en la que el anticuerpo dirigido contra IgE comprende la secuencia de aminoácidos identificada como E25 en la Figura 10A y una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos identificada como E25 en la figura 10B (b) arginina-HCl en una cantidad de 100 a 200 mM, (c) histidina en una cantidad de 10 a 100 mM, (d) polisorbato en una cantidad de 0,01 a 0,1%, en la que la formulación tiene además un pH que varía entre 5,5 y 7,0, una viscosidad cinemática de aproximadamente 50 cs o menos y una osmolaridad que varía entre 200 mOsm/kg y 450 mOsm/kg

Formulaciones de anticuerpos y de proteínas a concentración elevada.

Antecedentes de la invención

Esta invención se refiere a formulaciones de anticuerpos a concentración elevada, que son particularmente adecuadas para administración subcutánea. La invención proporciona además formulaciones líquidas estables muy concentradas (por ejemplo, ≥q100 mg/ml de proteínas).

Existe una demanda significativa de formulaciones líquidas de anticuerpos muy concentradas. Sin embargo, las formulaciones de proteínas muy concentradas presentan diversos problemas. Un problema es la inestabilidad debida a la formación de material particulado. En las preparaciones liofilizadas reconstituidas para generar formulaciones líquidas, este problema se ha resuelto mediante el uso de tensioactivos (por ejemplo, un polisorbato), pero los tensioactivos son inadecuados para las formulaciones líquidas, debido a que dificultan el procesado adicional. Además, los tensioactivos no reducen el incremento de la viscosidad producido como resultado de las numerosas interacciones moleculares debidas a la naturaleza macromolecular de los anticuerpos.

Aunque se ha demostrado que los tensioactivos reducen significativamente el grado de formación de partículas de las proteínas, no resuelven el problema del incremento de la viscosidad que dificulta la manipulación y la administración de formulaciones concentradas de anticuerpos. Los anticuerpos tienden a formar disoluciones viscosas con elevada concentración debido a su naturaleza macromolecular y al potencial de interacciones intermoleculares. Además, a menudo se usan como estabilizantes azúcares farmacéuticamente aceptables en grandes cantidades. Dichos azúcares pueden potenciar las interacciones intermoleculares, incrementando por tanto la viscosidad de la formulación. Formulaciones muy viscosas son difíciles de fabricar, arrastrar en una jeringuilla e inyectar subcutáneamente. El uso de fuerza en la manipulación de formulaciones viscosas conduce a una excesiva formación de espuma, que puede acarrear la desnaturalización y la inactivación de los compuestos biológicos activos. Se carece de solución satisfactoria para este problema.

Aunque la técnica anterior indica numerosos ejemplos de excipientes que se pueden emplear adecuadamente para crear formulaciones farmacéuticas, se han formulado satisfactoriamente muy pocas proteínas por encima de 100 mg/ml, o se han descrito técnicas para realizar lo anterior.

Los solicitantes han descubierto que la Arginina, específicamente Arginina-HCl es particularmente adecuada para formulaciones líquidas muy concentradas de proteínas o anticuerpos.

Se dan a conocer formulaciones estables de proteínas liofilizadas isotónicas en la publicación PCT WO 97/04801, publicada el 13 de febrero de 1997. Las formulaciones liofilizadas dadas a conocer se pueden reconstituir para generar formulaciones líquidas con elevada concentración de proteínas sin pérdida aparente de estabilidad. Se ha reducido previamente la agregación de las proteínas mediante la adición de azúcares, pero al hacer eso, se puede incrementar drásticamente la viscosidad y la osmolaridad, haciendo por tanto poco práctico el procesado y el uso.

La solicitud PCT de los solicitantes, publicación WO02/30463, publicada el 18 de abril de 2002 da a conocer formulaciones con concentraciones elevadas de proteínas, pero de baja viscosidad, conseguidas: 1) mediante pH bajo (aproximadamente 4,0 a 5,3); 2) pH alto (aproximadamente 6,5 a 12,0), o 3) incrementando la fuerza iónica total de la formulación mediante la adición de sales o tampones. Sin embargo, aunque el aumento de la fuerza iónica disminuye la viscosidad de la formulación (tal como con NaCl) esto puede dar también como resultado un incremento de la turbidez, que está asociado a menudo con la formación de partículas de proteínas (por ejemplo, agregación). De esta manera, una formulación óptima con una elevada concentración de proteínas debe superar los desafíos de la estabilidad, viscosidad, osmolaridad y turbidez.

Resumen de la invención

La presente invención se refiere a formulaciones muy concentradas de anticuerpos E25 dirigidos contra IgE que son estables, y de baja viscosidad y turbidez, según se define en las reivindicaciones.

En particular, la presente invención se refiere a formulaciones de anticuerpos muy concentradas de baja turbidez que comprenden proteínas o anticuerpos (100-260 mg/ml), histidina (10-100 mM), arginina-HCl (50-200 mM) y Polisorbato (0,01%-0,1%), que tienen un pH de 5,5-7,0, una viscosidad de 50 cs o menos y una osmolaridad entre 200 mOsm/kg-450 mOsm/kg. Alternativamente, el anticuerpo en las formulaciones puede variar entre 120-260 mg/ml, alternativamente 150-260 mg/ml, alternativamente 180-260 mg/ml, alternativamente 200-260 mg/ml de anticuerpo. Alternativamente, la osmolaridad varía entre 250 mOsm/kg-350 mOsm/kg. Alternativamente, la concentración de arginina-HCl varía entre 100-200 mM, alternativamente 150-200 mM, alternativamente 180-200 mM.

Se describen también en el presente documento formulaciones de anticuerpos muy concentradas de baja turbidez que comprende el anticuerpo (40-150 mg/ml), histidina (10-100 mM), azúcar (por ejemplo, trehalosa o sacarosa, 20-350 mM) y Polisorbato (0,01%-0,1%).

En una realización particular, la invención proporciona una formulación que contiene elevadas concentraciones de proteínas de gran peso molecular, que son anticuerpos o inmunoglobulina. Los anticuerpos se dirigen contra un antígeno predeterminado concreto, cuyo antígeno es IgE (rhuMABE-25 descrito en los documentos U.S.P. 6.329.509 y WO 99/01556).

Las formulaciones de la presente invención pueden ser formulaciones farmacéuticas. En un aspecto específico, la formulación se administra subcutáneamente.

En otra realización adicional, la invención proporciona el uso médico de las formulaciones dadas a conocer en el presente documento que comprenden una cantidad terapéuticamente eficaz del anticuerpo en un procedimiento para el tratamiento, profiláctico o terapéutico, de un trastorno tratable mediante el anticuerpo formulado. Dichas formulaciones son particularmente útiles para la administración subcutánea. En un aspecto específico, el trastorno es un trastorno mediado por IgE. En otro aspecto específico adicional, el trastorno mediado por IgE es rinitis alérgica, asma (por ejemplo, asma alérgica y asma no alérgica), dermatitis atópica, gastroenteropatía alérgica, hipersensibilidad (por ejemplo, anafilaxis, urticaria, alergias alimentarias, etc.), aspergilosis broncopulmonar alérgica, enfermedades parasíticas, cistitis intersticial, síndrome de hiper IgE, ataxia-telangiectasia, síndrome de Wiskott-Aldrich, alinfoplasia tímica, mieloma de IgE y reacción de hospedador frente a injerto.

En otra realización adicional, la invención proporciona un artículo de fabricación que comprende un envase que encierra una formulación dada a conocer en el presente documento. En un aspecto, el artículo de fabricación es una jeringuilla precargada. En otro aspecto específico adicional, la jeringuilla precargada está contenida adicionalmente dentro de un dispositivo de inyección. En otro aspecto específico adicional, el dispositivo de inyección es un autoinyector.

Breve descripción de las figuras

Figura 1. Cromatografía de interacción hidrófoba de un anticuerpo monoclonal dirigido contra IgE digerido con pepsina. Se formularon las muestras a diferentes pH y tampones: (medbullet) Acetato 20 mM, (Δ) Succinato 20 mM, (-) Na₂HPO₄ 20 mM, (∇) K₂PO₄ 20 mM y (*) tampón Tris 20 mM. Se almacenaron las muestras a 30ºC durante 6 meses.

Figura 2. Cromatografía de exclusión por tamaño de un anticuerpo monoclonal dirigido contra IgE almacenado a 40ºC durante 6 meses. Se formularon las muestras a diferentes pH y tampones: (-) Glutamato 20 mM, (medbullet) Acetato 20 mM, (Δ) Succinato 20 mM, (boxempty) Histidina 20 mM, (-) Na₂HPO₄ 20 mM, (-) K₂PO₄ 20 mM y (*) tampón Tris 20 mM.

Figura 3. Actividad de un anticuerpo monoclonal dirigido contra IgE almacenado a 30ºC durante 6 meses. Se formularon las muestras a diferentes pH y tampones: (medbullet)...

1. Una formulación líquida estable de turbidez baja que comprende (a) un anticuerpo dirigido contra IgE en una cantidad de aproximadamente 150 a 260 mg/ml, en la que el anticuerpo dirigido contra IgE comprende la secuencia de aminoácidos identificada como E25 en la Figura 10A y una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos identificada como E25 en la figura 10B (b) arginina-HCl en una cantidad de 100 a 200 mM, (c) histidina en una cantidad de 10 a 100 mM, (d) polisorbato en una cantidad de 0,01 a 0,1%, en la que la formulación tiene además un pH que varía entre 5,5 y 7,0, una viscosidad cinemática de aproximadamente 50 cs o menos y una osmolaridad que varía entre 200 mOsm/kg y 450 mOsm/kg.

2. La formulación de la reivindicación 1, en la que la concentración de arginina-HCl varía entre 150 mM y 200 mM.

3. La formulación de la reivindicación 1, en la que la concentración de arginina-HCl varía entre 180 mM y 200 mM.

4. La formulación de la reivindicación 1, en la que la concentración de arginina-HCl es de 200 mM.

5. La formulación de una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en la que

(a) la concentración del anticuerpo varía entre 180 mg/ml y 260 mg/ml; o

(b) la concentración del anticuerpo varía entre 200 mg/ml y 260 mg/ml.

6. La formulación de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en la que la concentración del anticuerpo es aproximadamente de 150 mg/ml.

7. La formulación de una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en la que la osmolaridad varía entre 250 mOsm/kg y 350 mOsm/kg.

8. La formulación de una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en la que el anticuerpo dirigido contra IgE comprende dos cadenas ligeras idénticas y dos cadenas pesadas idénticas.

9. Una formulación líquida estable de turbidez baja que comprende (a) un anticuerpo dirigido contra IgE en una cantidad de aproximadamente 150 mg/ml, en la que el anticuerpo dirigido contra IgE comprende dos cadenas ligeras idénticas y dos cadenas pesadas idénticas, comprendiendo cada cadena ligera la secuencia de aminoácidos identificada como E25 en la figura 10A

y comprendiendo cada cadena pesada la secuencia de aminoácidos identificada como E25 en la figura 10B (b) arginina-HCl en una cantidad de 200 mM, (c) histidina en una cantidad de 20 mM, (d) polisorbato en una cantidad de 0,01 a 0,1% en la que la formulación tiene además un pH de 6,0.

10. La formulación de la reivindicación 9, en la que el polisorbato está en una cantidad de 0,02%.

11. Un artículo de fabricación que comprende un envase que encierra la formulación de una cualquiera de las reivindicaciones anteriores.

12. El artículo de fabricación de la reivindicación 11, en el que el envase es una jeringuilla.

13. El artículo de fabricación de la reivindicación 12, en el que la jeringuilla está contenida además en el interior de un dispositivo de inyección.

14. El artículo de fabricación de la reivindicación 13, en el que el dispositivo de inyección es un autoinyector.

15. Uso de una formulación de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10 para la preparación de un medicamento para el tratamiento de un trastorno mediado por IgE.

16. Una formulación de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10 en un procedimiento para el tratamiento de un trastorno mediado por IgE.

17. El uso de la reivindicación 15 o de la formulación para uso según la reivindicación 16, en la que el trastorno mediado por IgE se selecciona entre el grupo constituido por rinitis alérgica, asma, asma alérgica, asma no alérgica, dermatitis atópica y gastroenteropatía.

18. El uso de la reivindicación 15 o de la formulación para uso según la reivindicación 16, en el que el trastorno mediado por IgE es rinitis alérgica, asma alérgica, o dermatitis atópica.

19. El uso de la reivindicación 15 o de la formulación para uso según la reivindicación 16, en el que el trastorno mediado por IgE se selecciona entre el grupo constituido por hipersensibilidad, aspergilosis broncopulmonar alérgica, enfermedades parasíticas, cistitis intersticial, síndrome de hiper-IgE, ataxia telangiectasia, síndrome de Wiskott-Aldrich, alinfoflasia tímica, mieloma de IgE y reacción de hospedador frente a injerto.

20. El uso de la reivindicación 15 o de la formulación para uso según la reivindicación 16, en el que el trastorno mediado por IgE es hipersensibilidad.

21. El uso o la formulación para uso según la reivindicación 20, en el que el trastorno de hipersensibilidad se selecciona entre el grupo constituido por anafilaxis, urticaria y alergia alimentaria.

22. El uso o la formulación para uso según la reivindicación 21, en el que el trastorno de hipersensibilidad es alergia alimentaria.

23. El uso o la formulación para uso según la reivindicación 22, en el que la alergia alimentaria es el resultado de la exposición a una legumbre.

24. El uso o la formulación para uso según la reivindicación 23, en el que la legumbre es un cacahuete.

25. El uso de la reivindicación 15 o de la formulación para uso según la reivindicación 16, en el que la formulación está en combinación con una antihistamina, un broncodilatador, un glucocorticoide o un NSAID.

26. El uso de la reivindicación 15 o de la formulación para uso según la reivindicación 16, en el que el medicamento o formulación es para la administración en combinación con la administración de una antihistamina, un broncodilatador, un glucocorticoide o un NSAID.

27. El uso de la reivindicación 15 o de la formulación para uso según la reivindicación 16, en el que el medicamento o formulación es para la administración en combinación con la administración de desensibilización alergénica.