FORMULACIÓN DE COMPUESTOS DE ACIDO BORONICO.

Un compuesto de la formula (1): en la que: P es hidrogeno o un resto de proteccion de grupo amino;

R es hidrogeno o alquilo de C1-12; A es 0, 1, o 2; R1, R2, y R3 son cada uno independientemente hidrogeno, alquilo de C1-12, cicloalquilo de C3-12, arilo de C6-14, o -CH2- R5; R5 , en cada caso, es arilo de C6-14, aril(C6-14)alquilo(C1-12,), alquil(C1-12)arilo(C6-14,), cicloalquilo de C3-12, heterociclilo comprendiendo 3 a 8 atomos, en el que uno o mas atomos esta seleccionado entre N, O y S, heteroarilo comprendiendo 5 a 14 atomos, en el que 1-4 atomos estan seleccionados entre N, O y S, o -W-R6, en el que W es un calcogeno y R6 es alquilo de C1-12; en la que la porcion anillo de cualquiera de dichos arilo, aralquilo, alquilarilo, cicloalquilo, heterociclilo, o heteroarilo en R1, R2, R3, o R5 puede estar opcionalmente substituido; y Z1 y Z2 conjuntamente forman un resto obtenido de mannitol, en la que el atomo unido al boro en cada caso es un atomo de oxigeno, y en la que el compuesto de formula (1) esta opcionalmente liofilizado

La presente invención se refiere a la formulación de compuestos farmacéuticos. Más particularmente, la invención se refiere a composiciones aceptables farmacéuticamente, estables, preparadas a partir de compuestos de ácido borónico. Igualmente, la invención se refiere a procedimientos para la preparación de dichas composiciones.

Los compuestos de ácido y éster borónico muestran una diversidad de actividades biológicas útiles farmacéuticamente. Shenvi y otros, Patente de EE.UU. No. 4.499.082 (1985), divulgan que los ácidos péptido borónicos son inhibidores de ciertas enzimas proteolíticas. Kettner y Shenvi, Patente de EE.UU. No. 5.187.157 (1993); Patente de EE.UU. No. 5.242.904 (1993); y Patente de EE.UU. No. 5.250.720 (1993), describen una clase de ácidos péptido borónicos que inhiben proteasas de tipo tripsina. Kleeman y otros, Patente de EE.UU. No. 5.169.841 (1992), divulgan ácidos péptido borónicos N-terminalmente modificados que inhiben la acción de la renina. Kinder y otros, Patente de EE.UU. No. 5.106.948 (1992), divulgan que ciertos compuestos de ácido tripéptido borónico inhiben el desarrollo de células de cáncer.

Adams y otros, Patente de EE.UU. No. 5.780.454 (1998), Patente de EE.UU. No. 6.066.730 (2000), Patente de EE.UU. No. 6.083.903 (2000), y Patente de EE.UU. No. 6.297.217 (2001), incorporadas aquí por referencia en su totalidad, describen compuestos de ácido y éster péptido borónicos útiles como inhibidores proteasomas. Las referencias describen igualmente el uso de compuestos de ácido y éster borónicos para reducir el ritmo de degradación de proteína del músculo, para reducir la actividad de NF-κB en una célula, para reducir el ritmo de degradación de proteína p53 en una célula, para inhibir la degradación de ciclina en una célula, para inhibir el desarrollo de una célula de cáncer, para inhibir la presentación de antígeno en una célula, para inhibir la adhesión de célula dependiente de NF-κB, y para inhibir la replicación del VIH. Brand y otros, Patente WO 98/35691, expone que los inhibidores de proteasomas, incluyendo compuestos de ácido borónico, son útiles para el tratamiento de infartos tales como los que se producen durante la apoplejía o el infarto de miocardio. Elliott y otros, Patente WO 99/15183, expone que los inhibidores de proteasomas son útiles para el tratamiento de enfermedades inflamatorias y autoinmunes.

Desgraciadamente, los ácido alquilborónicos son relativamente difíciles de obtener en forma pura analíticamente. Snyder y otros, J. Am. Chem. Soc., pág. 3611 (1958), exponen que los compuestos de ácido alquilborónico forman fácilmente boroxinas (anhídridos) bajo condiciones deshidratantes. Igualmente, los ácidos alquilborónicos y sus boroxinas son frecuentemente sensibles al aire. Korcek y otros, J. Chem. Soc., Perkin Trans., vol. 2, pág. 242, (1972), expone que el ácido butilborónico es fácilmente oxidado por el aire para generar 1-butanol y ácido bórico. Estas dificultades limitan la utilidad farmacéutica de compuestos del ácido borónico, complicando la caracterización de agentes farmacéuticos que comprenden compuestos de ácido borónico y limitando su tiempo de almacenamiento.

En consecuencia, existe una necesidad en la técnica de formulaciones mejoradas de compuestos de ácido borónico. Idealmente, dichas composiciones serían preparadas de manera conveniente, mostrarían estabilidad potenciada y tiempo de almacenamiento más largo en comparación con el compuesto de ácido borónico libre, y liberarían fácilmente el compuesto de ácido borónico bioactivo cuando se administren a un sujeto que necesite terapia de ácido borónico.

La presente invención proporciona composiciones aceptables farmacéuticamente, estables, preparadas a partir de compuestos de ácido borónico. Igualmente, la invención proporciona procedimientos para la preparación de dichas composiciones. La invención proporciona el descubrimiento de que la liofilización de una mezcla acuosa que comprende un compuesto de ácido borónico y un compuesto que tiene al menos dos grupos hidroxilo produce una composición estable que libera fácilmente el compuesto de ácido borónico tras disolución en medio acuoso.

En un primer aspecto, la invención proporciona compuestos que tienen la fórmula (1):

**(Ver fórmula)**

en la que: P es hidrógeno o un resto de protección de grupo amino; R es hidrógeno o alquilo de C1-12;

A es 0, 1,ó 2;

R1, R2, y R3 son cada uno independientemente hidrógeno, alquilo de C1-12, cicloalquilo de C3-12, arilo de C6-14, o -CH2R5

;

R5 , en cada caso, es arilo de C6-14, aril(C6-14)alquilo(C1-12,), alquil(C1-12)arilo(C6-12,), cicloalquilo de C3-12, heterociclilo comprendiendo 3 a 8 átomos, en el que uno o más átomos está seleccionado entre N, O y S, heteroarilo comprendiendo 5 a 14 átomos, en el que 1-4 átomos están seleccionados entre N, O y S, o -W-R6, en el que W es un calcógeno y R6 es alquilo de C1-12;

en la que la porción anillo de cualquiera de dichos arilo, aralquilo, alquilarilo, cicloalquilo, heterociclilo, o heteroarilo en R1, R2, R3, o R5 puede estar opcionalmente substituido; y Z1 y Z2 conjuntamente forman un resto obtenido de mannitol, en la que el átomo unido al boro en cada caso es un átomo de oxígeno, y

en la que el compuesto de fórmula (1) opcionalmente está liofilizado.

En un segundo aspecto, la invención proporciona un procedimiento de preparación de un compuesto liofilizado de la fórmula (1):

**(Ver fórmula)**

en la que: P es hidrógeno o un resto de protección de grupo amino; R es hidrógeno o alquilo de C1-12; A es 0, 1,ó 2; R1, R2, y R3 son cada uno independientemente hidrógeno, alquilo de C1-12, cicloalquilo de C3-12, arilo de C5-14, o -CH2R5

; R5 , en cada caso, es arilo de C6-14, aril(C6-14)alquilo(C1-12,), alquil(C1-12)arilo(C6-14,), cicloalquilo de C3-12, heterociclilo comprendiendo 3 a 8 átomos, en el que uno o más átomos está seleccionado entre N, O y S, heteroarilo comprendiendo 5 a 14 átomos, en el que 1-4 átomos están seleccionados entre N, O y S, o -W-R6, en el que W es un calcó25 geno y R6 es alquilo;

en la que la porción anillo de cualquiera de dichos arilo, aralquilo, alquilarilo, cicloalquilo, heterociclilo, o heteroarilo en R1, R2, R3, o R5 puede estar opcionalmente substituido; y Z1 y Z2 se han obtenido de un azúcar, en el que el azúcar es mannitol; comprendiendo el procedimiento:

30 (a) preparación de una mezcla que comprende

(i) agua,

(ii) un compuesto de fórmula (3)

**(Ver fórmula)**

en la que P, R, A, R1, R2, y R3 son tal como se han descrito anteriormente; y Z' yZ''sonOH; y

(iii) mannitol; y

(b) liofilización de la mezcla.

Las realizaciones preferidas están establecidas en las subreivindicaciones.

En un tercer aspecto, la invención proporciona composiciones preparadas mediante los procedimientos de la invención.

La invención proporciona composiciones aceptables farmacéuticamente, estables, preparadas a partir de compuestos de ácido borónico y procedimientos para la preparación de las composiciones. Igualmente, la invención proporciona nuevos compuestos de éster de boronato.

Para los fines de la presente invención, se usarán las siguientes definiciones:

Tal como se usa en la presente invención, los términos “formular” y “formulación” se refieren a la preparación de un compuesto de ácido borónico en una forma adecuada para administración a un sujeto mamífero, preferiblemente un humano. Frecuentemente, la formulación del compuesto de ácido borónico comprende la adición de excipientes, diluyentes, o vehículos aceptables farmacéuticamente. En algunas realizaciones, la formulación del compuesto de ácido borónico comprende la formación de un derivado químico del compuesto de ácido borónico, preferiblemente la formación de un éster de boronato. El término “formulación” se refiere a cualquier forma comúnmente usada para la administración farmacéutica, incluyendo sólidos, líquidos, suspensiones, cremas, y geles. Para los fines de la presente invención, la formulación es, preferiblemente, un polvo liofilizado.

Tal como se usa en la presente invención, el término “polvo liofilizado” se refiere a cualquier material sólido obtenido mediante la liofilización de una mezcla... [Seguir leyendo]

1. Un compuesto de la fórmula (1):

**(Ver fórmula)**

en la que: P es hidrógeno o un resto de protección de grupo amino; R es hidrógeno o alquilo de C1-12; A es 0, 1,ó 2; R1, R2, y R3 son cada uno independientemente hidrógeno, alquilo de C1-12, cicloalquilo de C3-12, arilo de C6-14, o -CH2

R5;

R5 , en cada caso, es arilo de C6-14, aril(C6-14)alquilo(C1-12,), alquil(C1-12)arilo(C6-14,), cicloalquilo de C3-12, heterociclilo comprendiendo 3 a 8 átomos, en el que uno o más átomos está seleccionado entre N, O y S, heteroarilo comprendiendo 5 a 14 átomos, en el que 1-4 átomos están seleccionados entre N, O y S, o -W-R6, en el que W es un calcó-geno y R6 es alquilo de C1-12;

en la que la porción anillo de cualquiera de dichos arilo, aralquilo, alquilarilo, cicloalquilo, heterociclilo, o heteroarilo en R1, R2, R3, o R5 puede estar opcionalmente substituido; y

Z1 y Z2 conjuntamente forman un resto obtenido de mannitol, en la que el átomo unido al boro en cada caso es un átomo de oxígeno, y

en la que el compuesto de fórmula (1) está opcionalmente liofilizado.

2. El compuesto de la reivindicación 1, en el que A es 0.

3. El compuesto de la reivindicación 1, en el que

R1, R2, y R3 son cada uno independientemente hidrógeno, alquilo de C1-8, cicloalquilo de C3-10, arilo de C6-10, o -CH2R5

; R5

, en cada caso, es arilo de C6-C10, aril(C6-C10)alquilo(C1-C6), alquil(C1-C6)arilo(C6-C10), cicloalquilo de C3-C10, alcoxi de C1-C8, o alquiltio de C1-C8;

en el que la porción anillo de cualquiera de dichos grupos arilo, aralquilo, alcarilo, cicloalquilo, heterociclilo, o heteroarilo de R1, R2, R3, o R5 puede estar opcionalmente substituido.

4. El compuesto de la reivindicación 1, en el que P es R7-C(O)-, R7-S(O)2-, R7-NH-C(O)-, o R7-O-C(O)-;

en el que R7 es alquilo de C1-2, arilo de C6-14, alquil(C1-12)arilo(C6-14), o aril(C6-14)alquilo(C1-12), cualquiera de los cuales puede estar opcionalmente substituido, o cuando P es R7-C(O)-o R7-S(O)2-, R7 puede ser también un heterociclo saturado, parcialmente saturado, o aromático de 5 a 10 átomos opcionalmente substituido, en el que 1-4 átomos están seleccionados entre N, O y S.

5. El compuesto de la reivindicación 4, en el que A es cero; R es hidrógeno o alquilo de C1-C8; y R3 es alquilo de C1-C6.

6. El compuesto de la reivindicación 4, en el que P es R7-C(O)-o R7-S(O)2-, y R7 es un heterociclo aromático.

7. El compuesto de la reivindicación 6, en el que P es (2-piracino)carbonilo.

8. El compuesto de la reivindicación 6, en el que P es (2-piracino)sulfonilo.

9. El compuesto de la reivindicación 1, en el que dicho compuesto es un éster de mannitol del: 12

Acido N-(2-piracino)carbonil-L-fenilalanina-L-leucina borónico; Acido N-(2-quinoleino)sulfonil-L-homofenilalanina-L-leucina borónico; Acido N-(3-piridino)carbonil-L-fenilalanina-L-leucina borónico; Acido N-(4-morfolino)carbonil-L-fenilalanina-L-leucina borónico; Acido N-(4-morfolino)carbonil-β-(1-naftil)-L-alanina-L-leucina borónico; Acido N-(8-quinoleino)sulfonil-β-(1-naftil)-L-alanina-L-leucina borónico; Acido N-(4-morfolino)carbonil-(O-bencil)-L-tirosina-L-leucina borónico; Acido N-(4-morfolino)carbonil-L-tirosina-L-leucina borónico; o Acido N-(4-morfolino)carbonil-[O-(2-piridilmetil)]-L-tirosina-L-leucina borónico.

10. El compuesto de la reivindicación 1, en el que dicho compuesto es: Boronato de N-(2-piracino)carbonil-L-fenilalanina-L-leucina D-mannitol; Boronato de N-(2-quinoleino)sulfonil-L-homofenilalanina-L-leucina D-mannitol; Boronato de N-(3-piridino)carbonil-L-fenilalanina-L-leucina D-mannitol; Boronato de N-(4-morfolino)carbonil-L-fenilalanina-L-leucina D-mannitol; Boronato de N-(4-morfolino)carbonil-β-(1-naftil)-L-alanina-L-leucina D-mannitol; Boronato de N-(8-quinoleino)sulfonil-β-(1-naftil)-L-alanina-L-leucina D-mannitol; Boronato de N-(4-morfolino)carbonil-(O-bencil)-L-tirosina-L-leucina D-mannitol; Boronato de N-(4-morfolino)carbonil-L-tirosina-L-leucina D-mannitol; o Boronato de N-(4-morfolino)carbonil-[O-(2-piridilmetil)]-L-tirosina-L-leucina D-mannitol.

11. El compuesto de la reivindicación 1, en el que el mannitol es D-mannitol.

12. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, el cual es boronato de N-(2-piracino)carbonil-L-fenilalanina-Lleucina D-mannitol.

13. Un compuesto liofilizado de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, 10 y 12.

14. Un procedimiento de preparación de un compuesto liofilizado de la fórmula (1):

**(Ver fórmula)**

en la que: P es hidrógeno o un resto de protección de grupo amino; R es hidrógeno o alquilo de C1-12; A es 0, 1,ó 2; R1, R2, y R3 son cada uno independientemente hidrógeno, alquilo de C1-12, cicloalquilo de C3-12, arilo de C6-14, o -CH2

R5;

R5 , en cada caso, es arilo de C6-14, aril(C6-14)alquilo(C1-12), alquil(C1-12)arilo(C6-14), cicloalquilo de C3-12, heterociclilo comprendiendo 3 a 8 átomos, en el que uno o más átomos está seleccionado entre N, O y S, heteroarilo comprendiendo 5 a 14 átomos, en el que 1-4 átomos están seleccionados entre N, O y S, o -W-R6, en el que W es calcógeno y R6 es alquilo;

en la que la porción anillo de cualquiera de dichos arilo, aralquilo, alquilarilo, cicloalquilo, heterociclilo, o heteroarilo en R1, R2, R3, o R5 puede estar opcionalmente substituido; y Z1 y Z2 se han obtenido de un azúcar, en el que el azúcar es mannitol; comprendiendo el procedimiento:

(a) preparación de una mezcla que comprende

(i) agua,

(ii) un compuesto de fórmula (3)

**(Ver fórmula)**

en la que P, R, A, R1, R2, y R3 son tal como se han descrito anteriormente; y 10 Z'yZ''sonOH;y

(iii) manitol; y

(b) liofilización de la mezcla.

15. El procedimiento de la reivindicación 14, en el que A es cero; R es hidrógeno o alquilo de C1-C8; y R3 es alquilo de C1-C6.

16. El procedimiento de la reivindicación 14, en el que

R1, R2, y R3 son cada uno independientemente hidrógeno, alquilo de C1-C8, cicloalquilo de C3-C10, arilo de C6-C10, o CH2-R5; R5, en cada caso, es arilo de C6-C10, aril(C6-C10)alquilo(C1-C6,), alquil(C1-C6)arilo(C6-C10), cicloalquilo de C3-C10, alcoxi de C1-C8, o alquitio de C1-C8;

en la que la porción anillo de cualquiera de dichos grupos arilo, aralquilo, alcarilo, cicloalquilo, heterociclilo, o heteroarilo de R1, R2, R3, o R5 puede estar opcionalmente substituido.

17. El procedimiento de la reivindicación 14, en el que P es R7-C(O)-, R7-S(O)2-, R7-NH-C(O)-, o R7-O-C(O)-; en el que R7 es alquilo de C1-2, arilo de C6-14, alquil(C1-12)arilo(C6-14), o aril(C6-14)alquilo(C1-12), cualquiera de los cuales puede estar opcionalmente substituido, o cuando P es R7-C(O)-o R7-S(O)2-, R7 puede ser también un heterociclo saturado, parcialmente saturado, o aromático de 5 a 10 átomos opcionalmente substituido, en el que 1-4 átomos están seleccionados entre N, O y S.

18. El procedimiento de la reivindicación 17, en el que P es R7-C(O)-o R7-S(O)2-y R7 es un heterociclo aromático. 30 19. El procedimiento de la reivindicación 18, en el que P es (2-piracino)carbonilo.

20. El procedimiento de la reivindicación 18, en el que P es (2-piracino)sulfonilo.

21. El procedimiento de la reivindicación 14, en el que el compuesto de fórmula (3) es: Acido N-(2-piracino)carbonil-L-fenilalanina-L-leucina borónico; Acido N-(2-quinoleino)sulfonil-L-homofenilalanina-L-leucina borónico;

35 Acido N-(3-piridino)carbonil-L-fenilalanina-L-leucina borónico; Acido N-(4-morfolino)carbonil-L-fenilalanina-L-leucina borónico;

Acido N-(4-morfolino)carbonil-β-(1-naftil)-L-alanina-L-leucina borónico; Acido N-(8-quinoleino)sulfonil-β-(1-naftil)-L-alanina-L-leucina borónico; Acido N-(4-morfolino)carbonil-(O-bencil)-L-tirosina-L-leucina borónico; Acido N-(4-morfolino)carbonil-L-tirosina-L-leucina borónico; o Acido N-(4-morfolino)carbonil-[O-(2-piridilmetil)]-L-tirosina-L-leucina borónico.

22. El procedimiento de la reivindicación 21, en el que el compuesto de fórmula (3) es ácido N-(2-piracino)carbonil-Lfenilalanina-L-leucina borónico.

23. El procedimiento de la reivindicación 14, en el que el compuesto de fórmula (1) es boronato de N-(2piracino)carbonil-L-fenilalanina-L-leucina D-mannitol.

24. El procedimiento de la reivindicación 14, en el que el resto obtenido de mannitol y el compuesto de fórmula (3) están presentes en una relación de al menos 1:1.

25. El procedimiento de la reivindicación 14, en el que el resto obtenido de mannitol y el compuesto de fórmula (3) están presentes en una relación de al menos 5:1.

26. El procedimiento de la reivindicación 14, en el que la mezcla comprende además un disolvente miscible en agua.

27. El procedimiento de la reivindicación 26, en el que el disolvente miscible en agua es un alcohol.

28. El procedimiento de la reivindicación 27, en el que el alcohol es terc-butanol.

29. El procedimiento de la reivindicación 14, en el que el mannitol es D-mannitol.

30. El procedimiento de la reivindicación 14, que comprende además (c) la reconstitución de la mezcla liofilizada con un vehículo aceptable farmacéuticamente.

31. Una composición que comprende (i) el compuesto de la reivindicación 1 y (ii) un vehículo aceptable farmacéuticamente.

32. Una composición que comprende (i) el compuesto de la fórmula (1) preparado de acuerdo con el procedimiento de la reivindicación 14 y (ii) un vehículo aceptable farmacéuticamente.

33. Una torta liofilizada que comprende el compuesto de la reivindicación 1.

34. Una torta liofilizada que comprende el compuesto de la fórmula (1) preparado de acuerdo con el procedimiento de la reivindicación 14.