FORMULACIÓN DE ADYUVANTE PARA ADMINISTRACIÓN EN MUCOSAS.

Formulación de adyuvante para administración en mucosas CAMPO DE LA INVENCIÓN Esta invención se refiere en general a adyuvantes para el uso con vacunas; más específicamente, adyuvantes para el uso con vacunas mucosas que no son inmunógenos y que sirven para modular las reacciones inmunitarias hacia los antígenos que están en contacto con las superficies mucosas en seres humanos. ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Las vacunas mucosas están ganando popularidad a escala mundial debido en parte a la comodidad de administración de estas vacunas, a diferencia de los medios de administración tradicionales subcutáneos o de otro tipo, a la comodidad al facilitar la autoadministración de las vacunas mucosas, a diferencia de los retrasos tradicionales aso- ciados a reunir grupos de personas para la administración de las vacunas tradicionales, así como a la reducción y la eliminación final de las agujas hipodérmicas. Un beneficio adicional del desarrollo de vacunas mucosas eficaces es la autoadministración, por lo que se evita la necesidad de personal cualificado para los medios de administración tradicionales. Las superficies mucosas son la vía de entrada más habitual de microorganismos que provocan enfermedades en animales y en seres humanos. Un sistema inmunitario especializado, equipado con grandes cantidades de células linfoides, protege estas superficies contra la invasión por microorganismos. El denominado sistema inmunitario de mucosas puede generar respuestas inmunitarias específicas intensas hacia microorganismos patógenos invasores, así como hacia antígenos de vacunas que se administran en las superficies mucosas. Existe un fundamento bioló- gico sólido por el interés creciente tanto en la medicina humana como en la veterinaria hacia las vacunas mucosas que interaccionan directamente con esta parte importante del sistema inmunitario. El desarrollo rápido en este campo también está estimulado por las ventajas evidentes de las vacunas que se pueden administrar en forma de aerosoles nasales o tónicos orales, en comparación con las vacunas inyectables. Sin embargo, las vacunas muco- sas no se convertirán en alternativas realistas a las vacunas inyectables existentes a menos que se pueda mejorar la eficacia de tales vacunas. El uso de sustancias auxiliares, o adyuvantes, es una de las maneras más prometedoras de aumentar la respuesta de anticuerpos y la eficacia clínica de las vacunas mucosas. Los adyuvantes se han usado durante mucho tiempo con las vacunas tradicionales para mejorar la respuesta inmunitaria, lo que permite usar menos vacuna para producir la respuesta inmunitaria. Se ha realizado gran parte del trabajo relacionado con las diferencias entre la vía de inmunización, que compara los medios de inyección más tradicionales con la administración mucosa, y las conclusiones se han aceptado de manera generalizada. Existen pruebas sustanciales que sugieren dos sistemas inmunitarios; un sistema inmunitario periférico y un sistema inmunitario de mucosas. Se cree que estos sistemas funcionan por separado y simultáneamente en la mayoría de las especies, lo que incluye los seres humanos. El centro de la presente solicitud son las vacunas mucosas, y más específicamente una formulación nueva de vacuna y adyuvante por la que el adyuvante debería ser atóxico, no debería alterar la integridad de las membranas mucosas, debería tener características fisicoquímicas que fueran adecuadas para el transporte a través de las célu- las M en los tejidos mucosos, debería activar la inmunidad inespecífica sin inducir la producción de anticuerpos hacia sí mismo (el adyuvante), debería estimular que los linfocitos produzcan anticuerpos dirigidos específicamente hacia los antígenos, no debería inducir tolerancia hacia los antígenos, debería actuar como un vehículo compatible para los antígenos, debería aumentar la inmunidad inespecífica y debería mejorar la eficacia clínica de las vacunas específicas. La presente invención describe por primera vez formulaciones de vacunas mucosas con las características deseadas, y presenta pruebas de un auténtico efecto adyuvante mucoso sin una respuesta simultánea de anticuerpos hacia sí mismo. Por lo tanto, se prevé que la formulación de adyuvante mucoso presentada en la presente memoria puede ser una nueva contribución útil para la medicina humana y veterinaria. DESCRIPCIÓN DETALLADA La dirección selectiva de los antígenos y los adyuvantes hacia las células M de las superficies mucosas parece ser la manera más prometedora de generar una respuesta inmunitaria secretora, ya que estas células están especializadas en tomar muestras de los antígenos para la exposición directa a las células inmunitarias en los tejidos mucosos del tracto gastrointestinal y respiratorio. Se sabe que el transporte por medio de las células M es más eficaz para las sustancias particuladas que para las sustancias solubles. En contraste con las partículas, las sustancias solubles también se pueden adherir y penetrar hasta otras partes de la membrana epitelial, y por lo tanto interfieren con una variedad más amplia de células inmunocompetentes, y como consecuencia tienen un efecto menos predecible sobre la respuesta inmunitaria que los antígenos particulados y los adyuvantes particulados. La eficacia del transporte de 2   las partículas se ve afectada por el tamaño, y posiblemente también por su naturaleza química. Las partículas en el intervalo de tamaños de 1-10 micrometros parecen ser las transportadas de una manera más eficaz. La búsqueda de vacunas más seguras y mejores, tanto para inyección como para administración mucosa, se ha concentrado en definir y producir antígenos purificados que inducen una respuesta elevada de anticuerpos y un alto grado de protección. La mayoría de los antígenos de vacunas purificados son, sin embargo, inmunógenos débiles cuando se aplican sobre las superficies mucosas. Por lo tanto, se ha hecho necesario proporcionar un adyuvante para aumentar la capacidad de los antígenos de las vacunas mucosas de inducir una respuesta de anticuerpos eficaz. Existen varias sustancias que tienen esta capacidad. Sin embargo, todos los adyuvantes que se han ensayado en cuanto a su capacidad de aumentar la eficacia de las vacunas mucosas tienen una o más desventajas. Los defectos más serios de los productos existentes son 1) efectos tóxicos inaceptables, 2) inducción de la producción de anticuerpos hacia el propio adyuvante, 3) inducción de tolerancia inmunológica hacia los antígenos de la vacuna. Varias sustancias con características lipófilas o de otro tipo que confieren una actividad de tensoactivo pueden incrementar la absorción a través de las membranas mucosas, por lo que se incrementa la inmunogenicidad mucosa de los antígenos de la vacuna. Tales excipientes se han mezclado y se han ensayado como adyuvantes nasales para los toxoides de difteria y tétano, y se han comparado con una vacuna adsorbida en aluminio administrada de forma nasal en un ensayo clínico en seres humanos. Se demostró un efecto adyuvante evidente, pero los efectos secundarios locales fueron importantes, probablemente provocados por el efecto de los excipientes sobre la membrana epitelial. La alteración de la integridad de la membrana también genera problemas relacionados con las respuestas inmunitarias hacia otros elementos distintos de los antígenos de la vacuna presentes de manera concomitante en la superficie mucosa. El cólera es un inmunógeno mucoso excepcionalmente potente, así como un adyuvante potente para las respuestas de anticuerpos mucosas y sistémicas hacia antígenos no relacionados aplicados simultáneamente y en el mismo sitio. El mecanismo para su actividad adyuvante es complejo, y puede incluir la captación aumentada del antígeno a través de las células epiteliales por medio de su subunidad B, la activación de las células presentadoras de antígenos, y la estimulación del cambio de las células B. Sin embargo, el efecto directo tanto de CT como de CTB (toxina del cólera B) sobre las células T in vitro es inhibitorio, lo que se ha sugerido como un posible mecanismo para la acción adyuvante, así como para la inducción de tolerancia. Se ha demostrado que el acoplamiento del antígeno a CTB recombinante aumenta la tolerancia sistémica tanto al propio CTB como al antígeno conjugado tras la administración oral. El efecto aparente de CTB como adyuvante en la administración nasal comparado con la tolerogenicidad en la administración intestinal puede ser debido a cantidades muy pequeñas de la holotoxina que contaminan las preparaciones comerciales de CTB, lo que restituye la actividad adyuvante. Sin embargo, un informe reciente que compara el CTB comercial y recombinante mostró efectos adyuvantes de CTB recombinante en la administración nasal, tanto al acoplar el antígeno de la vacuna a... [Seguir leyendo]

1. Un glucano que comprende monómeros de glucosa unidos entre sí en cadenas ramificadas mediante uniones ß-1,3 y uniones ß-1,6 para el uso en la modulación de las respuestas inmunitarias humanas hacia una vacuna vírica o bacteriana que se pone en contacto con, o que se administra sobre, una superficie mucosa, en el que dicho glucano se administra también sobre una superficie mucosa y en el que el glucano y la vacuna se co-administran. 2. El glucano para el uso según la reivindicación 1 en el que el glucano está solubilizado. 3. El glucano para el uso según la reivindicación 1 o la reivindicación 2 en el que la vacuna viral es una vacuna del virus de la gripe. 4. El glucano para el uso según cualquiera de las reivindicaciones precedentes en el que la administración es nasal. 5. El glucano para el uso según la reivindicación 4 en el que la administración es mediante aerosol nasal o gotas nasales. 6. El glucano para el uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 en el que la administración es oral, vaginal, rectal o gástrica. 7. El glucano para el uso según la reivindicación 1 en el que el glucano está micro-particulado. 8. El glucano para el uso según cualquiera de las reivindicaciones previas en el que el glucano y la vacuna están en una mezcla. 9. Una composición adyuvante que comprende un glucano como se definió en la reivindicación 1, junto con una vacuna del virus de la gripe, formulada para la administración en forma de aerosol nasal o gotas nasales. 10. El uso del glucano como se definió en cualquiera de las reivindicaciones precedentes para la fabricación de una composición adyuvante administrada de manera mucosa que comprende además una vacuna vírica o bacteriana para el uso en la modulación de las respuestas inmunitarias humanas hacia dicha vacuna, cuya composición se pone en contacto con, o se administra sobre, una superficie mucosa. 11