COMPOSICIONES Y PROCEDIMIENTOS PARA MODULAR LAS RESPUESTAS INMUNITARIAS.

Composiciones y procedimientos para modular las respuestas inmunitarias Antecedentes de la invención ES 2 367 810 T3 Las señales coestimuladoras positivas y negativas desempeñan papeles cruciales en la modulación de la actividad de los linfocitos T y se ha demostrado que las moléculas que median en estas señales son dianas eficaces para los agentes inmunomoduladores. La coestimulación positiva, además de la unión al receptor de los linfocitos T (TCR), es necesaria para la activación óptima de los linfocitos T no activados previamente, mientras que se cree que la coestimulación negativa es necesaria para la adquisición de autotolerancia inmunológica, así como la terminación de las funciones de los linfocitos T efectores. Tras la interacción con B7-1 o B7-2 sobre las células presentadoras de antígenos (CPA), el CD28, el prototipo de molécula coestimuladora de linfocitos T, emite señales que estimulan la proliferación y diferenciación de linfocitos T en respuesta a la union al TCR, mientras que el antígeno 4 de linfocitos T citotóxicos (CTLA-4) homólogo del CD28 participa en la inhibición de la proliferación de los linfocitos T y las funciones efectoras (Chambers y col., Ann. Rev. Immunol., 19:565-594,2001; Egen y col., Nature Immunol., 3:611­ 618, 2002). Se han descubierto varias moléculas nuevas con homología con la familia B7 (Abbas y col., Nat. Med., 5: 1345­ 6,1999; Coyle y col., Nat. Immunol., 2: 203-9,2001; Carreno y col., Annu. Rev. Immunol., 20: 29-53, 2002; Liang y col., Curr. Opin. Immunol., 14: 384-90, 2002), y solo se está comenzando a aclarar su papel en la activación de los linfocitos T. Estos nuevos contra receptores coestimuladores incluyen B7h2, PD-L1, PD-L2, B7-H3 y B7-H4 B7h2 (Swallow y col., Immunity, 11: 423-32, 1999), también conocido como B7RP-1 (Yoshinaga y col., Nature, 402: 827-32, 1999), GL50 (Ling, y col., J. Immunol., 164:1653-7, 2000), B7H2 (Wang y col., Blood, 96: 2808-13, 2000), y LICOS (Brodie y col., Curr. Biol., 10: 333-6, 2000), se une al coestimulador inducible (ICOS) sobre los linfocitos T activados y coestimula la proliferación de linfocitos T y la producción de citocinas como la interleucina 4 (IL-4) y la IL­ 10. PD-L1 (Freeman y col., J. Exp. Med., 192: 1027-34, 2000), también conocido como B7-R1 en seres humanos (Dong y col., Nat. Med., 5, 1365-9, 1999), y PD-L2 (Latchman y col., Nat. Immunol., 2: 261-8, 2001), también conocido como B7-DC (Tseng y col., J. Exp. Med., 193, 839-46, 2001) se unen al receptor 1 de muerte programada (PD-1) sobre los linfocitos T y B, aunque en la actualidad, la función de estas interacciones es controvertida. Algunos informes han demostrado que PD-L1 y PD-L2 tienen efectos inhibidores de las respuestas de los linfocitos T (Freeman y col., J. Exp. Med., 192: 1027-34, 2000; Latchman y col., Nat. Immunol., 2: 261-8, 2001), aunque en otros se ha demostrado que ambos contrarreceptores (B7-R1 y B7-DC) regulan positivamente la proliferación de linfocitos T y específicamente potencia la producción de IL-10 o el interferón gamma (IFN-.gamma.) (Dong y col., Nat. Med., 5, 1365-9, 1999; Tseng y col., J. Exp. Med., 193, 839-46, 2001). Por último, B7-H3 y B7-H4, ambos homólogos de B7 recién identificados, se unen y como contrarreceptores todavía desconocidos sobre los linfocitos T activados y se ha comunicado que potencian la proliferación de los linfocitos T colaboradores (Th) CD4+ y los linfocitos T citotóxicos (CTL o Tc) CD8+ y potencian de forma selectiva la expresión del IFN-gamma (Chapoval y col., Nat. Immunol., 2, 269-74, 2001; Sun y col., J. Immunol., 168, 6294-7, 2002). Con la excepción de los contrarreceptores PD-1, que muestran alguna expresión sobre tejidos no linfoides, la expresión de miembros de la familia B7 conocidos está en gran medida restringida a células linfoides. En conjunto, estos estudios han revelado que los miembros de la familia B7 son contrarreceptores sobre las células linfoides que interaccionan con receptores conocidos sobre linfocitos para proporcionar señales coestimuladoras positivas o negativas que desempeñan papeles cruciales en la regulación de respuestas inmunitarias mediadas por células. En particular, se sabe que muchos trastornos autoinmunitarios implican linfocitos T autorreactivos y autoanticuerpos. Son muy deseables los agentes que sean capaces de inhibir o eliminar los linfocitos autorreactivos sin comprometer la capacidad del sistema inmunológico para defenderse contra patógenos. Por el contrario, muchas inmunoterapias para el cáncer, tales como la inmunoterapia adoptiva, expanden las poblaciones de linfocitos T específicas de tumor y las dirigen a atacar y matar células tumorales (Dudley y col., Science 298:850-854, 2002; Pardoll, Nature Biotech., 20:1207-1208, 2002; Egen y col., Nature Immunol., 3:611-618, 2002). Son muy deseables agentes capaces de aumentar el ataque a los tumores. Además, las respuestas inmunitarias a muchos antígenos diferentes (p. ej., antígenos microbianos o antígenos tumorales), aunque detectables, con frecuencia tienen una magnitud insuficiente para conferir protección contra un proceso de enfermedad mediado por agentes (p. ej., microorganismos infecciosos o células tumorales) que expresan dichos antígenos. A menudo es deseable administrar al sujeto, junto con el antígeno, un adyuvante que sirva para potenciar la respuesta inmunitaria al antígeno en el sujeto. También es deseable inhibir las respuestas inmunitarias normales al antígeno en ciertas circunstancias. Por ejemplo, es deseable la supresión de las respuestas inmunitarias normales en un paciente receptor de un transplante y son muy deseables agentes que exhiban dicha actividad inmunosupresora. Las señales coestimuladoras, particularmente señales coestimuladoras positivas, también desempeñan un papel en la modulación de la actividad de los linfocitos B. Por ejemplo, la activación de linfocitos B y la supervivencia de linfocitos B del centro germinal requieren señales derivadas de los linfocitos B además de estimulación por antígeno. 2 El contrarreceptor CD40 presente sobre la superficie de los linfocitos T colaboradores interacciona con CD40 sobre la superficie de los linfocitos B y media en muchos de estos efectos dependientes de linfocitos T en los linfocitos B. Es interesante el hecho de que no se han identificado receptores coestimuladores negativos análogos al CTLA-4 sobre los linfocitos B. Esto sugiere que pueden existir diferencias fundamentales en el modo en el que se inducen los linfocitos T y los linfocitos B para responder al antígeno, lo que tiene implicaciones en los mecanismos de autotolerancia, así como la inhibición de las funciones efectoras de los linfocitos B, tal como la producción de anticuerpos. Si se encuentra una molécula funcional similar al CTLA sobre los linfocitos B, el hallazgo cambiaría espectacularmente nuestra comprensión de los mecanismos de la estimulación de linfocitos B. Además, la identificación de dichos receptores podría proporcionar el desarrollo de nuevos agentes terapéuticos capaces de modular la activación de los linfocitos B y la producción den anticuerpos, y útiles en la modulación de las respuestas inmunológicas. El documento WO 03/68943 describe proteínas secretadas humanas (SECP) y los correspondientes polinucleótidos y anticuerpos, y procedimientos y usos relacionados. Los documentos WO 04/24072 y WO 04/24068 describen composiciones y procedimientos para el tratamiento de enfermedades relacionadas con la inmunidad. Nobis y col., J. Gen. Virol. (1985) Vol. 66, páginas 2563-2569, describen la producción de un anticuerpo monoclonal contra un epítopo sobre las células HeLa que es el sitio de unión para el poliovirus funcional. El documento WO 01/74853 describe procedimientos y productos para regular la motilidad celular. De acuerdo con esto, existe la necesidad en la técnica de identificar miembros adicionales de la familia B7, sus contrarreceptores y moléculas derivadas de los mismos que tienen cualquiera de una actividad coestimuladora de linfocitos T y/o una actividad coestimuladora de linfocitos B, o ambas. Esta necesidad se basa en gran medida en su importancia biológica fundamental y el potencial terapéutico de los agentes capaces de afectar a su actividad. Dichos agentes capaces de modular señales coestimuladoras tendrían un uso significativo en la modulación de las respuestas inmunitarias y son muy deseables. La presente memoria descriptiva proporciona dichos polipéptidos para éstos y otros usos que deberían ser evidentes para los expertos en la técnica a partir de las enseñanzas del presente documento. Descripción detallada de la invención 1. Visión general ES 2 367 810 T3 La presente memoria descriptiva describe la identificación y caracterización de zB7R1, un nuevo receptor linfocítico inhibidor y el descubrimiento de su capacidad para unirse a CD155 (PVR). Por... [Seguir leyendo]

1. Uso de un anticuerpo agonista anti-zB7R1, o fragmento de anticuerpo, para la fabricación de un medicamento para suprimir una respuesta de linfocitos T en una enfermedad inflamatoria o autoinmunitaria mediada por linfocitos T, en el que dicho anticuerpo o fragmento de anticuerpo se une específicamente a al menos una porción del dominio extracelular de zB7R1 como se muestra en la SEC ID Nº 3 o la SEC ID Nº 7 y estimula la señalización mediada por zB7R1. 2. El uso de acuerdo con la reivindicación 1,, en el que la enfermedad se selecciona del grupo que consiste en artritis reumatoide, psoriasis, artritis psoriásica, esclerosis múltiple (EM), enfermedad intestinal inflamatoria (EII), enfermedad celíaca, enfermedad del injerto contra el huésped (EICH) y síndrome del intestino irritable. 3. El uso de acuerdo con la reivindicación 2, en el que la enfermedad intestinal inflamatoria se selecciona del grupo constituido por enfermedad de Crohn y colitis ulcerosa. 4. Un anticuerpo agonista anti-zB7R1, o fragmento de anticuerpo, para uso en la supresión de una respuesta de linfocitos T en una enfermedad inflamatoria o autoinmunitaria mediada por linfocitos T inhibiendo la actividad de los linfocitos T, en el que dicho anticuerpo o fragmento de anticuerpo se une específicamente a al menos una porción del dominio extracelular de zB7R1 como se muestra en la SEC ID Nº 3 o la SEC ID Nº 7 y estimula la señalización mediada por zB7R1. 5. Un procedimiento in vitro para inhibir la actividad de los linfocitos T, que comprende poner en contacto un linfocito T positivo para zB7R1 con un anticuerpo agonista anti-zB7R1, o fragmento de anticuerpo en una cantidad eficaz para inhibir al menos una actividad de linfocitos T, en el que dicho anticuerpo o fragmento de anticuerpo se une específicamente a al menos una porción del dominio extracelular de zB7R1 como se muestra en la SEC ID Nº 3 o la SEC ID Nº 7 y estimula la señalización mediada por zB7R1. 6. El uso de acuerdo con la reivindicación 1, el anticuerpo agonista anti-zB7R1, o fragmento de anticuerpo para uso de acuerdo con la reivindicación 4 o el procedimiento de acuerdo con la reivindicación 5, en el que dicha actividad de linfocitos T se selecciona del grupo que consiste en activación de linfocitos T, diferenciación de linfocitos T, proliferación de linfocitos T, supervivencia de linfocitos T, actividad citolítica de linfocitos T citotóxicos y producción de citocinas de linfocitos T colaboradores. 7. El uso, o anticuerpo agonista anti-zB7R1 o fragmento de anticuerpo para uso, o procedimiento, de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-6, en el que el anticuerpo se selecciona del grupo que consiste en un anticuerpo monoclonal humano y un anticuerpo humanizado derivado de un anticuerpo monoclonal murino. 8. El uso, o anticuerpo agonista anti-zB7R1 o fragmento de anticuerpo para uso, o procedimiento, de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-6, en el que el fragmento de anticuerpo se selecciona del grupo que consiste en F(ab)2, Fab, Fab, Fv, scFv y la unidad mínima de reconocimiento. 96