COMPOSICIÓN FARMACÉUTICA ESTABLE QUE CONTIENE FACTOR VIII.

Una composición farmacéutica sólida obtenible mediante la liofilización de una disolución desprovista de aminoácidos que comprende (a) factor VIII;

(b) un tensoactivo; (c) cloruro cálcico; (d) sacarosa; (e) cloruro sódico; (f) citrato trisódico; y (g) un tampón desprovisto de aminoácidos; que tiene un pH de 6 a 8 antes de la liofilización y después de la reconstitución en agua para inyección

La invención se refiere a una composición farmacéutica estable nueva que contiene factor VIII.

El factor VIII es una proteína plasmática muy conocida que es esencial para el proceso de coagulación de la sangre, y por lo tanto se usa en el tratamiento de la hemofilia.

Se han usado o se pretenden usar varias formas de factor VIII como principios activos para el tratamiento de la hemofilia. Estas incluyen el factor VIII humano (como los principios activos de Humate® P, Monoclate® P, Immunate® o Hemofil® M), el factor VIII humano recombinante (como r-VIII SQ que se describe en la solicitud de patente PCT WO 91/09122 (el principio activo de ReFacto®) o los principios activos de Kogenate® o Recombinate®), el factor VIII porcino (que es el principio activo del producto Hyate:C® vendido por Ipsen, Inc., EE.UU.) o el factor VIII porcino recombinante (p.ej., una forma sin dominio B modificada del factor VIII porcino como la descrita en la solicitud de patente WO 01/68109 e identificada como "POL1212" o la proteína de SEQ. ID. NO. 38 de la misma solicitud de patente).

La estabilidad de las formulaciones ha sido siempre un problema para la industria farmacéutica relacionada con las composiciones farmacéuticas de factor VIII.

Se ha usado a menudo albúmina para estabilizar estas formulaciones. Sin embargo, a pesar de su efecto de estabilización interesante, la albúmina presenta el inconveniente de ser cara, y también el riesgo de portar especies infecciosas tales como priones. Por estas razones, en los últimos años la industria farmacéutica ha estado intentando sustituir la albúmina por otros agentes estabilizantes en las composiciones farmacéuticas de factor VIII.

El experto en la técnica ya conoce varias composiciones farmacéuticas estables exentas de albúmina. Por ejemplo:

- La patente de EE.UU. nº 5.565.427 describe una disolución estabilizada exenta de albúmina con actividad de factor VIII:C que contiene factor VIII:C, un aminoácido o una de sus sales u homólogos y un detergente (como polisorbato 80 o Tween® 80) o un polímero orgánico (como polietilenglicol). -La patente de EE.UU. nº 5.605.884 se refiere a una composición estable de factor VIII que comprende factor VIII y un medio de fuerza iónica elevada, que consiste preferiblemente en una disolución acuosa que comprende una mezcla de cloruro sódico, cloruro cálcico e histidina como ión tamponador.

- Las patentes de EE.UU. nºs 5.763.401 y 5.874.408 describen una composición estable de factor VIII recombinante exenta de albúmina que comprende factor VIII recombinante, glicocola, histidina, sacarosa, cloruro sódico y cloruro cálcico. -La patente de EE.UU. nº 5.962.650 describe una composición estable de factor VIII exenta de albúmina que consiste en una disolución acuosa con una concentración reducida de oxígeno que comprende factor VIII recombinante, una sal de calcio como cloruro cálcico y preferiblemente un antioxidante, un tensoactivo no iónico, cloruro sódico o potásico, un aminoácido y un mono-o disacárido. -La patente de EE.UU. nº 5.972.885 se refiere a una formulación farmacéutica para administración subcutánea, intramuscular o intradérmica que comprende factor VIII recombinante muy concentrado (al menos 1.000 UI/ml) y, preferiblemente, uno o más elementos seleccionados del grupo constituido (en particular) por cloruro sódico o potásico, cloruro cálcico, un tensoactivo no iónico (p.ej., un poloxámero), un mono-o disacárido (preferiblemente sacarosa) y antioxidantes (p.ej., ácido cítrico). -La solicitud de patente PCT WO 89/09784 describe un método para la producción de un concentrado de factor VIII termoestable que comprende la filtración en gel de una disolución tampón que contiene dicho factor VIII y tris(hidroximetil)metilamina, citrato trisódico, cloruro sódico, sacarosa y cloruro cálcico, seguido por la liofilización del concentrado obtenido. El factor VIII así obtenido es capaz de resistir temperaturas de hasta 80ºC durante hasta 72 horas. -La solicitud de patente PCT WO 94/07510 describe una composición de factor VIII que se estabiliza mediante un tensoactivo no iónico (p.ej., un poloxámero como polisorbato 80). Tal composición puede comprender además uno o más elementos seleccionados del grupo constituido (en particular) por cloruro sódico o potásico, cloruro cálcico, un aminoácido, un mono-o disacárido tal como sacarosa.

El solicitante ha descubierto ahora de forma inesperada que una composición farmacéutica sólida obtenible mediante la liofilización de una disolución desprovista de aminoácidos que comprende los siguientes componentes:

(a) factor VIII;

(b) un tensoactivo;

(c) cloruro cálcico;

(d) sacarosa;

(e) cloruro sódico;

(f) citrato trisódico; y

(g) un tampón desprovisto de aminoácidos; y dicha composición farmacéutica tiene un pH de 6 a 8 antes de la liofilización y después de la reconstitución en agua para inyección, también muestra estabilidad a lo

5 largo del tiempo.

Por factor VIII se quiere decir en la presente solicitud el factor VIII humano, factor VIII humano recombinante, factor VIII porcino, factor VIII porcino recombinante,

o más en general cualquier otro factor VIII recombinante que se pueda usar para sus10 tituirlos.

Preferiblemente, el factor VIII comprendido en las composiciones según la invención se elegirá de factor VIII porcino o factor VIII porcino recombinante. Aún más preferiblemente, el factor VIII comprendido en las composiciones según la invención será un factor VIII porcino recombinante, especialmente una forma sin dominio B modificada del factor VIII porcino como el descrito en la solicitud de patente WO 01/68109, es decir, el factor VIII porcino modificado que tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ. ID. NO. 1 siguiente:

SEQ. ID. NO. 1:

**(Ver fórmula)**

**(Ver fórmula)**

**(Ver fórmula)**

**(Ver fórmula)**

**(Ver fórmula)**

Preferiblemente, el tensoactivo será un tensoactivo no iónico. Los tensoactivos no iónicos incluyen en particular polisorbatos y copolímeros en bloque como los poloxámeros (es decir, los copolímeros de polietileno y propilen glicol). Según una variante preferida de la invención, el tensoactivo será un polisorbato. Más preferiblemente, un polisorbato incluido en una composición según la presente invención tendrá un grado medio de polimerización de 20 a 100 unidades monoméricas (preferiblemente alrededor de 80), y puede ser, por ejemplo, polisorbato 80. Además, preferiblemente, el polisorbato debería ser de origen vegetal.

Preferiblemente, el tampón desprovisto de aminoácidos será tris(hidroximetil)metilamina (en adelante abreviado como "tris").

Preferiblemente además, el pH de la composición farmacéutica antes de la liofilización y después de la reconstitución en agua para inyección será de 6,5 a 7,5, y más preferiblemente alrededor de 7,0.

Preferiblemente, una composición sólida según la invención será una que se pueda obtener mediante la liofilización de una disolución desprovista de aminoácidos que comprende:

(a) una concentración de factor VIII que oscila desde 50 hasta 10.000 unidades internacionales/ml de factor VIII humano o humano recombinante o desde 50 hasta

10.000 unidades porcinas/ml de factor VIII porcino o porcino recombinante;

(b) una concentración de tensoactivo que oscila desde la concentración micelar crítica hasta un 1% v/v;

(c) una concentración de cloruro cálcico que oscila desde 0,5 hasta 10 mM;

(d) una concentración de sacarosa que oscila desde 5 hasta 50 mM;

(e) una concentración de cloruro sódico que oscila desde 0,15 hasta 0,5 M;

(f) una concentración de citrato trisódico que oscila desde 1 hasta 50 mM; y

(g) una concentración de tampón desprovisto de aminoácidos que oscila desde 1 hasta 50 mM.

Para estudiar la actividad en cuanto a las unidades internacionales de factor VIII, el producto a analizar se ensaya con un patrón concentrado, tal como el patrón del Reino Unido NIBSC 95/608 (NIBSC significa Instituto Nacional de Control y Patrones Biológicos).

Por unidad porcina de factor VIII se quiere decir la unidad estándar nacional del Reino Unido mantenida por el NIBSC del Reino Unido. Para estudiar la actividad en cuanto a las unidades de factor VIII porcino, el producto a analizar se ensaya con el patrón porcino nacional del R.U. del NIBSC 86/514. Con respecto al factor VIII porcino recombinante,...

1. Una composición farmacéutica sólida obtenible mediante la liofilización de una disolución desprovista de aminoácidos que comprende

(a) factor VIII;

(b) un tensoactivo;

(c) cloruro cálcico;

(d) sacarosa;

(e) cloruro sódico;

(f) citrato trisódico; y

(g) un tampón desprovisto de aminoácidos; que tiene un pH de 6 a 8 antes de la liofilización y después de la reconstitución en agua para inyección.

2. Una composición farmacéutica sólida según la reivindicación 1 caracterizada porque el factor VIII se elige de factor VIII porcino o factor VIII porcino recombinante.

3. Una composición farmacéutica sólida según la reivindicación 2 caracterizada porque el factor VIII es factor VIII porcino recombinante.

4. Una composición farmacéutica sólida según la reivindicación 2 caracterizada porque el factor VIII porcino recombinante tiene la secuencia de aminoácidos SEQ. ID. NO. 1.

5. Una composición farmacéutica sólida según una de las reivindicaciones 1 a 4 caracterizada porque el tensoactivo es un polisorbato.

6. Una composición farmacéutica sólida según la reivindicación 5 caracterizada porque el tensoactivo es un polisorbato 80.

7. Una composición farmacéutica sólida según una de las reivindicaciones 1 a 6 caracterizada porque el tampón desprovisto de aminoácidos es tris(hidroximetil)metilamina.

8. Una composición farmacéutica sólida según una de las reivindicaciones 1 a 7 que, antes de la liofilización y después de la reconstitución en agua para inyección, tiene un pH de 6,5 a 7,5.

5 9. Una composición farmacéutica sólida según una de las reivindicaciones 1 a 8, que se puede obtener mediante liofilización de una disolución desprovista de aminoácidos que comprende:

(a) una concentración de factor VIII que oscila desde 50 hasta 10.000 unidades 10 internacionales/ml de factor VIII humano o humano recombinante o desde 50 hasta

10.000 unidades porcinas/ml de factor VIII porcino o porcino recombinante;

(b) una concentración de tensoactivo que oscila desde la concentración micelar crítica hasta un 1% v/v;

(c) una concentración de cloruro cálcico que oscila desde 0,5 hasta 10 mM; 15 (d) una concentración de sacarosa que oscila desde 5 hasta 50 mM;

(e) una concentración de cloruro sódico que oscila desde 0,15 hasta 0,5 M;

(f) una concentración de citrato trisódico que oscila desde 1 hasta 50 mM; y

(g) una concentración de tampón desprovisto de aminoácidos que oscila desde 1 hasta 50 mM.

10. Una composición farmacéutica líquida obtenible tras la dilución de una composición farmacéutica sólida según una de las reivindicaciones 1 a 9 con agua estéril que contiene opcionalmente cloruro sódico. ________