Una composición que posee propiedades trombolíticas, antiinflamatorias,

de desintoxicación y de actividad citoprotectora para tratar enfermedades acompañadas de isquemia, trombosis, intoxicación y/o inflamación, que comprende proteasas activas inmovilizadas en una mezcla de óxido de polietileno soluble en agua y dextrano

Campo de la técnica

La presente invención se refiere a medicina, particularmente a farmacología y fármacos en base a preparaciones enzimáticas, y puede utilizarse en terapia compleja para tratar enfermedad isquémica del corazón, accidente isquémico cerebral, procesos reumatoideos y otras enfermedades acompañadas por fenómenos isquémicos, trombóticos y de inflamación no específica.

La presente invención abarca el campo de hidrólisis enzimática de proteínas trombogénicas, principalmente fibrina, proteína formadora de estructura de todos los trombos, independientemente de la ubicación y tamaño de los péptidos. Más particularmente, la invención se refiere a compuestos que contienen enzimas proteolíticas que poseen propiedades fibrinolíticas, inmovilizadas en (unidas a) polímeros hidrófilos solubles en agua. La invención también está asociada a métodos para utilizar dichos compuestos para terapia fibrinolítica en el tratamiento de infartos agudos del miocardio, accidente isquémico cerebral, y también a métodos terapéuticos dirigidos a la corrección (mejora) de características hemorreológicas en el tratamiento de lesiones isquémicas de órganos y tejidos de diferente etiología, incluyendo microtrombosis.

Estado de la técnica

Existen diversas preparaciones médicas conocidas en la técnica utilizadas para tratar enfermedad isquémica del corazón y accidente isquémico cerebral. Como norma, en la etapa final de estas enfermedades el principal factor patogénico es la trombosis intravascular. En la práctica médica actual las preparaciones trombolíticas se han vuelto ampliamente utilizadas como medios de terapia etiotrópica para tratar infartos agudos del miocardio y accidente isquémico cerebral. Existen preparaciones farmacéuticas conocidas, tales como estreptasa, estreptoquinasa, activador de plasminógeno de tejidos (alteplasa) y fibrinolisina (Methodological Recommendations for Carrying out Early Therapeutic Measures in Patients with Acute Myocardial Infarction, Communication of the American Cardiologic College and American Heart Association. V.N. Ganyukov (Ed.), Collection of Papers, Novosibirsk, 1998, página 100 (traducción en ruso)). Todas estas preparaciones, directamente o como resultado de la activación del sistema anticoagulante de la sangre, actúan sobre la fibrina, llevando a su destrucción y, en consecuencia, a la lisis del trombo intravascular. A pesar de su alta efectividad terapéutica, estas preparaciones poseen un pronunciado efecto colateral, a saber, pueden inducir hemorragias incontrolables y peligrosas, debido a la disminución del sistema coagulante de sangre (Saunders W.B. Indications for Fibrinolytic Therapy Trialists Collaborative Group.//Lancet Ltd., 1994, vol. 343, páginas 311-322). Además, para dichas preparaciones como estreptoquinasa y alteplasa es difícil seleccionar una dosificación terapéutica adecuada debido a la existencia de una actividad antisérica individual a estreptococos en el organismo humano, que lleva a la inactivación de estas preparaciones.

Se conocen preparaciones medicinales que son capaces de disminuir la reacción inflamatoria. Las preparaciones más divulgadas de estas preparaciones son las preparaciones antiinflamatorias no esteroides, tales como aspirina, indometacina, diclofenac sódico, y otros (Nasonov E.L., Tsvetkova V.S., and Tov N.L., Selective inhibitors of cyclooxygenase- 2: new plospects of treating human diseases //Ter. Arkhiv, 1998, No. 5, páginas 8-14 (en ruso)). Las preparaciones farmacéuticas conocidas no están libres de desventajas esenciales: pueden causar lesiones del estómago con el desarrollo de gastropatía no esteroide, hemorragias y ulceraciones de la mucosa del tracto gastrointestinal.

El documento WO 93/20838 está dirigido a compuestos para hidrolizar selectivamente proteínas de materia pionecrótica que comprende una proteasa activa unida a geles hidrófilos o a geles en combinación con polímeros solubles en agua.

La publicación Archives of Pharmacal Research Vol. 24, No. 3, 229-233, 2001 trata el desarrollo de una tecnología para fabricar un gel hidrófilo de recepción de óxido de polietileno en el que la capacidad de radiación se emplea para causar la reticulación de polímeros en una solución acuosa.

En Radiation Physics and Chemistry, Vol. 48, No. 6, páginas 795-797, 1996 se desvela la posibilidad del uso de un haz de electrones para la inmovilización de proteasas en óxido de 1,4-polialquileno para obtener un complejo biológicamente activo para uso multipropósito.

La publicación en Applied Biochemistry and Biotechnology, Vol. 9, No. 3, páginas 231-241, 1984 desvela el uso de tecnología de radiación ionizante a enzimas unidas a un compuesto polimérico mediante la creación de grupos reactivos en este último.

En Enzym Engineering, Plenum Press, New York, No. 5, páginas 423-426, 1980, se desvela la termoestabilidad de subtilisinas solubles e inmovilizadas después de su modificación por dextranos y dextrinas.

Se conocen preparaciones farmacéuticas, que poseen propiedades citoprotectoras, tales como preductal (efecto cardioprotector) y bloqueadores de los receptores de H2 (gastrozepina, ranitidina). Las preparaciones conocidas poseen un efecto citoprotector débil y demuestran presentar acción farmacológica en la administración prolongada (Brottier L., Barat J.L., Combie C. et al., Therapeutic value of a cardioprotective agent in patients with severe ischaemic cardiomyopathy //Eur. Heart J., 1990, vol. 11, páginas 207-212).

En la actualidad no puede encontrarse ningún dato en la literatura científica y médica con respecto a la provisión de composiciones farmacéuticas que producen efecto sinérgico mutipropósito en las principales relaciones patogénicas de isquemia, inflamación y trombosis en combinación con propiedades citoprotectoras.

Se informaron diferentes métodos para la inmovilización de enzimas, incluyendo proteasas, en un número de vehículos poliméricos. Por ejemplo, en el trabajo por R.I. Salganik et al. "Immobilized Proteolytic Enzymes in Treating Purulent Processes", Novosibirsk, páginas 3-8, 1981 (en ruso) se describe un método para tratar heridas purulentas, abscesos y flegmones con la ayuda de enzimas proteolíticas unidas covalentemente a gránulos sólidos de celulosa. El uso de polímeros líquidos con proteasas unidas es descrito por O.A. Peretyagin et al. en "Oftalmologiya", 1987, No. 3, páginas 145-148 y por Gonchar et al. en "Veterinariya", 1989, No. 4, páginas 52-55. En la mayoría de los casos se utilizó un reactivo químico bifuncional como agente de unión, en el que un grupo químico se unió al residuo de aminoácido de la proteína enzimática, mientras otro grupo reactivo se unió al vehículo polimérico. Se investigó un número de procedimientos químicos para la unión covalente de diversas proteínas a vehículos sólidos. Sin embargo, las proteasas unidas a gránulos sólidos o fibras no pueden utilizarse para tratar lesiones o enfermedades que llevan a trombosis intravascular y están acompañadas por cambios negativos de hemorreología en el canal microcirculatorio de tejidos y órganos.

Por ello, se requieren compuestos que efectivamente hidrolicen las proteínas, predominantemente aquellas responsables de trombosis en vasos sanguíneos de diferentes diámetros, que constituyen un factor etiológico del desarrollo de enfermedades tales como infarto agudo del miocardio y accidente isquémico cerebral. En la actualidad dichos compuestos que contienen trombolíticos no tóxicos y sustancias con funciones correctivas hemorreológicas no han sido sintetizados para la terapia compleja de enfermedad isquémica del corazón, enfermedad hipertensiva y enfermedades reumatoideas. También se requieren métodos simples, no costosos y convenientes para unir simultáneamente las proteasas a un complejo de vehículos poliméricos y proporcionar la esterilización del producto final. Los métodos ideales son aquellos que pueden proporcionar compuestos que poseen diferente viscosidad y estado de agregación, apropiados para diferentes propósitos y diferentes formas de administración.

Esencia de la invención

La investigación presentada en la presente memoria cumple con los requerimientos arriba mencionados y también ofrece ventajas relativas sobre otras preparaciones medicinales y métodos para preparar composiciones farmacéuticas que ofrecen un efecto terapéutico sinérgico complejo en diversas relaciones de la patogénesis de enfermedad isquémica del corazón. La investigación... [Seguir leyendo]

1. Una composición que posee propiedades trombolíticas, antiinflamatorias, de desintoxicación y de actividad citoprotectora para tratar enfermedades acompañadas de isquemia, trombosis, intoxicación y/o inflamación, que comprende proteasas activas inmovilizadas en una mezcla de óxido de polietileno soluble en agua y dextrano.

2. Una composición según la reivindicación 1, caracterizada porque la inmovilización de las proteasas en la mezcla de polímeros solubles en agua se realiza con la ayuda de radiación ionizante, mediante la acción con las mismas en una solución acuosa que contiene proteasas activas y una mezcla de óxido de polietileno soluble en agua y dextrano

3. Una composición según la reivindicación 1, caracterizada porque la radiación ionizante es un flujo de electrones acelerados, radiación gamma y radiación UV.

4. Una composición según la reivindicación 1, caracterizada porque las enzimas proteolíticas obtenidas a partir de material de partida microbiológico, animal o vegetal se utilizan como la proteasa activa.

5. Una composición según la reivindicación 4, caracterizada porque las enzimas proteolíticas producidas por Bacillus subtilis se utilizan como la proteasa activa.

6. Una composición según la reivindicación 1, caracterizada porque comprende una forma medicinal de un componente que contiene proteasas activas liofilizadas inmovilizadas en una mezcla de óxido de polietileno y dextrano, y también combinaciones con aspirina, indometacina y diclofenac.

7. Una composición según la reivindicación 1, que comprende una forma de dosificación de dos componentes que contiene proteasas activas liofilizadas inmovilizadas en una mezcla de óxido de polietileno con dextrano y un disolvente.

8. Una composición según la reivindicación 7, en la que una solución de óxido de polietileno activado por radiación ionizante se utiliza como disolvente.

9. Una composición según la reivindicación 1, que es un agente terapéutico efectivo para tratar: enfermedad isquémica del corazón e infartos agudos del miocardio, alteraciones isquémicas de la circulación cerebral, trombosis arteriales y venosas, enfermedades obstructivas de los pulmones, gastritis y úlcera de estómago, enfermedades ginecológicas, estomatológicas y quirúrgicas.

10. Una composición según la reivindicación 9, en la que el efecto terapéutico se logra con la administración parenteral, oral, intracavitaria y local.

11. Una composición según la reivindicación 1, que produce un efecto protector en la mucosa del estómago en la administración combinada con analgésicos no esteroides.

12. Un método para preparar una composición de la reivindicación 1, que comprende la unión simultánea de proteasas a la mezcla de polímeros solubles en agua para la formación de una mezcla no sólida, y esterilización por radiación de la mezcla.

13. Un método según la reivindicación 12, en el que la radiación es un flujo de electrones acelerados, radiación gamma o radiación UV.

14. Un método según la reivindicación 12, en el que dicha proteasa es subtilisina.