Materiales y métodos para inmovilizar, aislar y concentrar células usando superficies carboxiladas.

Un método para determinar la presencia de un ácido nucleico diana en una muestra que comprende una célula de cuello uterino y un agente fijador que es un medio de citología en base líquida que comprende:



(a) inmovilizar la célula de cuello uterino a una superficie carboxilada poniendo en contacto la superficie carboxilada con la muestra que comprende la célula y un agente fijador que es un medio de citología en base líquida, durante un tiempo suficiente para permitir que la célula se una a la superficie carboxilada, en donde el medio de citología en base líquida tiene un pH no mayor de 9, y en donde el pH del medio de citología en base líquida se reduce para mejorar la inmovilización de la célula a la superficie carboxilada antes o durante la inmovilización de la célula de cuello uterino a la superficie carboxilada;

(b) separar la superficie carboxilada de al menos una parte de la muestra, aislando así la célula;

(c) liberar el ácido nucleico diana de la célula por un método que comprende poner en contacto la célula aislada con una composición líquida adecuada para liberar el ácido nucleico de la célula; y

(d) opcionalmente, desnaturalizar el ácido nucleico diana liberado; y

(e) detectar el ácido nucleico diana por un método que comprende:

(e1) poner en contacto el ácido nucleico diana liberado y opcionalmente desnaturalizado con una o más sondas específicas para el ácido nucleico diana en condiciones que permiten que las sondas y el ácido nucleico diana hibriden formando híbridos de ácido nucleico bicatenarios; y

(e2) detectar la presencia o ausencia de híbridos de ácido nucleico bicatenarios.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2012/063385.

Solicitante: QIAGEN GAITHERSBURG, INC.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 1201 CLOPPER ROAD GAITHERSBURG, MD 20878 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: NAZARENKO,IRINA, LOWE,BRIAN, RUS,SZYMON.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C12N11/08 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN (biocidas, productos que repelen o atraen a los animales nocivos, o reguladores del crecimiento de los vegetales, que contienen microorganismos virus, hongos microscópicos, enzimas, productos de fermentación o sustancias obtenidas por o extraídas de microorganismos o sustancias animales A01N 63/00; preparaciones de uso médico A61K; fertilizantes C05F ); PROPAGACION,CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 11/00 Enzimas fijadas sobre un soporte o inmovilizadas; Células microbianas fijadas sobre un soporte o inmovilizadas; Su preparación. › siendo el soporte un polímero sintético.
  • C12N11/10 C12N 11/00 […] › siendo el soporte un hidrato de carbono.
  • C12N11/14 C12N 11/00 […] › Enzimas, o células microbianas, inmovilizadas sobre o en un soporte inorgánico.
  • C12N13/00 C12N […] › Tratamiento de microorganismos o enzimas por energía eléctrica u ondulatoria, p. ej. por magnetismo, por ondas sonoras.

PDF original: ES-2730711_T3.pdf

 

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