CARBOHIDRATO U OLIGONUCLEOTIDOS MODIFICADOS EN POSICIÓN 2' QUE TIENEN ENLACES INTERNUCLEOSIDICOS ALTERNOS.

Carbohidrato u oligonucleótidos modificados en posición 2' que tienen enlaces internucleosídicos alternos Campo de la invención La presente invención se refiere al diseño y síntesis de oligonucleótidos de fosforotioato resistentes a nucleasas que son útiles como productos terapéuticos, de diagnóstico y como reactivos de investigación. Se proporcionan oligonucleótidos que contienen al menos una región de nucleósidos modificados en la posición 2 conectados por enlaces alternos fosfodiéster y fosforotioato. Dichos compuestos son resistentes a la degradación por nucleasas y son capaces de modular la actividad del ADN y el ARN. Antecedentes de la invención Es bien sabido que la mayoría de los estados corporales en los organismos multicelulares, incluyendo la mayoría de los estados patológicos, se efectúan por proteínas. Dichas proteínas, actuando directamente o a través de sus funciones enzimáticas u otras funciones, contribuyen en una proporción importante a muchas enfermedades y funciones reguladoras en los animales y el ser humano. Para los estados patológicos, los productos terapéuticos clásicos generalmente se han centrado en interacciones con dichas proteínas con la intención de moderar sus funciones causantes de la enfermedad o potenciadoras de la enfermedad. En enfoques terapéuticos más nuevos, se desea la modulación de la producción real de dichas proteínas. Al interferir con la producción de proteínas, puede obtenerse el efecto terapéutico máximo con efectos secundarios mínimos. Por lo tanto, es un objeto general de dichos enfoques terapéuticos interferir o modular de otra manera la expresión génica, que conduciría a la formación de proteínas indeseadas. Un procedimiento para inhibir la expresión de genes específicos es con el uso de oligonucleótidos, especialmente oligonucleótidos que son complementarios a una secuencia de ARN mensajero (ARNm) diana específico. Actualmente, varios oligonucleótidos se están sometiendo a ensayos clínicos para dicho uso. Actualmente se están usando oligonucleótidos de fosforotioato como agentes terapéuticos en ensayos clínicos humanos contra diversos estados patológicos, incluyendo el uso como agentes antivirales. Además de dicho uso tanto como reguladores directos como reguladores indirectos de proteínas, los oligonucleótidos también han encontrado uso en ensayos de diagnóstico. Dichos ensayos de diagnóstico pueden realizarse usando fluidos biológicos, tejidos, células intactas o componentes celulares aislados. Como ocurre con la inhibición de la expresión génica, las aplicaciones de diagnóstico utilizan la capacidad de los oligonucleótidos de hibridar con una cadena complementaria de ácido nucleico. La hibridación es la unión por formación de enlaces de hidrógeno específicos de secuencia de compuestos oligoméricos mediante pares de bases de Watson-Crick y/o Hoogsteen en el ARN o ADN. Se dice que las bases de dichos pares de bases son complementarias entre sí. Los oligonucleótidos también se usan ampliamente como reactivos de investigación. Son útiles para comprender la función de muchas otras moléculas biológicas así como en la preparación de otras moléculas biológicas. Por ejemplo, el uso de oligonucleótidos como cebadores en reacciones de PCR ha dado lugar a una industria comercial en expansión. La PCR se ha convertido en un pilar de los laboratorios comerciales y de investigación, y las aplicaciones de la PCR se han multiplicado. Por ejemplo, la tecnología de PCR ahora encuentra uso en los campos de los estudios forenses, en paleontología, estudios evolutivos y asesoramiento genético. La comercialización ha conducido al desarrollo de kits que ayudan al personal no formado en biología molecular a aplicar la PCR. En dicha tecnología de PCR se emplean oligonucleótidos, tanto naturales como sintéticos, como cebadores. También se usan oligonucleótidos en otros procedimientos de laboratorio. Varios de estos usos se describen en manuales de laboratorio comunes tales como Molecular Cloning, A Laboratory Manual, Second Ed., J. Sambrook, y col., Eds., Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989; y Current Protocols In Molecular Biology, F. M. Ausubel, y col., Eds., Current Publications, 1993. Dichos usos incluyen como sondas oligonucleotídicas sintéticas en la exploración de bibliotecas de expresión con anticuerpos y compuestos oligoméricos, secuenciación de ADN, amplificación in vitro de ADN por reacción en cadena de la polimerasa, y en mutagénesis dirigida del ADN clonado. Véase el Libro 2 de Molecular Cloning, A Laboratory Manual, supra. Véase también "DNA-protein interactions and The Polymerase Chain Reaction" en el Vol. 2 de Current Protocols In Molecular Biology, supra. Se han introducido varias modificaciones químicas en los oligonucleótidos para aumentar su utilidad en el diagnóstico, como reactivos de investigación y como entidades terapéuticas. Dichas modificaciones incluyen las destinadas a aumentar la unión a una cadena diana (es decir, aumentar las temperaturas de fusión, Tm) para ayudar a la identificación de un oligonucleótido o un complejo diana de oligonucleótido, para aumentar la penetración celular, para estabilizar frente a nucleasas y otras enzimas que degradan o interfieren con la estructura o actividad de los oligonucleótidos, para proporcionar un modo de ruptura (acontecimiento de terminación) una vez unido de forma específica de secuencia a una diana, y para mejorar las propiedades farmacocinéticas del oligonucleótido. La complementariedad de oligonucleótidos se ha usado para la inhibición de varias dianas celulares. Los oligonucleótidos complementarios comúnmente se describen como oligonucleótidos antisentido. Se han publicado diversas revisiones que describen los resultados de estos estudios, incluyendo Progress In Antisense   Oligonucleotide Therapeutics, Crooke, S.T. and Bennett, C.F., Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol., 1996, 36, 107-129. Estos oligonucleótidos han resultado ser herramientas de investigación poderosas y agentes de diagnóstico. Ciertos oligonucleótidos que se ha mostrado que son eficaces actualmente están en ensayos clínicos humanos. La actividad farmacológica de los oligonucleótidos, a diferencia de otros productos terapéuticos, depende de varios factores que influyen en la concentración eficaz de estos agentes en dianas intracelulares específicas. Un factor importante para los oligonucleótidos es la estabilidad de las especies en presencia de nucleasas. Es poco probable que los oligonucleótidos naturales, no modificados, sean agentes terapéuticos útiles porque se degradan rápidamente por las nucleasas. Las limitaciones de los procedimientos disponibles para la modificación del esqueleto de fosfato de oligonucleótidos no modificados ha conducido a una necesidad continuada y percibida desde hace mucho tiempo de otras modificaciones que proporcionen resistencia a las nucleasas y propiedades de hibridación satisfactorias para productos de diagnóstico y terapéuticos de oligonucleótidos antisentido. Ghosh y col. (1992) Phosphorothioate-phosphodiester oligonucleotide co-polymers: assessment for antisense application, Anti-Caner Drug Design, 8, 15-32 desvela copolímeros oligodesoxinucleotídicos (17-meros) que comprenden diferentes proporciones y disposiciones de enlaces fosforotioato y fosfodiéster. De forma similar, el documento US 3.687.808 desvela polinucleótidos que comprenden fosforotioatos, incluyendo un polirribonucleótido con enlaces fosforotioato y fosfodiéster alternos. Los documentos WO 91/06556 y WO 97/46569 desvelan oligonucleótidos modificados en posición 2 que son resistentes a nucleasas. Sumario de la invención La presente invención proporciona compuestos que imitan y/o modulan la actividad de ácidos nucleicos de tipo silvestre. En general, los compuestos contienen una secuencia seleccionada de nucleósidos unidos covalentemente que se puede hibridar específicamente con una secuencia de nucleósidos dirigida de ADN o ARN monocatenario o bicatenario. En algunas realizaciones preferidas, se proporcionan compuestos que comprenden una pluralidad de nucleósidos modificados en posición 2' unidos covalentemente que tienen la fórmula:   en la que: cada B es una nucleobase; uno de X1 o X2 es O y el otro de X1 o X2 es S; cada R1, es, independientemente, H, hidroxilo, alquilo C1-C20, alquenilo C3-C20, alquinilo C2-C20, halógeno, tiol, ceto, carboxilo, nitro, nitroso, nitrilo, trifluorometilo, trifluorometoxi, O-alquilo, S-alquilo, NH-alquilo, N-dialquilo, O-arilo, S-arilo, NH-arilo, O-aralquilo, S-aralquilo, NH-aralquilo, amino, N-ftalimido, imidazol, azido, hidrazino, hidroxilamino, isocianato, sulfóxido, sulfona, sulfuro, disulfuro, sililo, arilo, heterociclo, carbociclo, intercalante, molécula informadora, conjugado, poliamina, poliamida, polialquilenglicol o poliéter; o... [Seguir leyendo]

1. Un compuesto que comprende una pluralidad de nucleósidos modificados en posición 2' unidos covalentemente que tienen la fórmula: en la que : cada B es una nucleobase; uno de X1 o X2 es O y el otro de X1 o X2 es S; cada R1 es, independientemente, H, hidroxilo, alquilo C1-C20, alquenilo C3-C20, alquinilo C2-C20, halógeno, tiol, ceto, carboxilo, nitro, nitroso, nitrilo, trifluorometilo, trifluorometoxi, O-alquilo, S-alquilo, NH-alquilo, N-dialquilo, O-arilo, S-arilo, NH-arilo, O-aralquilo, S-aralquilo, NH-aralquilo, amino, N-ftalimido, imidazol, azido, hidrazino, hidroxilamino, isocianato, sulfóxido, sulfona, sulfuro, disulfuro, sililo, arilo, heterociclo, carbociclo, intercalante, molécula informadora, conjugado, poliamina, poliamida, polialquilenglicol o poliéter; o R1 es un grupo de fórmula Z-R22-(R23)v; Z es O, S, NH o N-R22-(R23)v; R22 es alquilo C1-C20, alquenilo C2-C20 o alquinilo C2-C20; R23 es hidrógeno, amino, halógeno, hidroxilo, tiol, ceto, carboxilo, nitro, nitroso, nitrilo, trifluorometilo, trifluorometoxi, O-alquilo, S-alquilo, NH-alquilo, N-dialquilo, O-arilo, S-arilo, NH-arilo, O-aralquilo, 5-aralquilo, NH-aralquilo, amino, N-ftalimido, imidazol, azido, hidrazino, hidroxilamino, isocianato, sulfóxido, sulfona, sulfuro, disulfuro, sililo, arilo, heterociclo, carbociclo, intercalante, molécula informadora, conjugado, poliamina, poliamida, polialquilenglicol, poliéter; v es de 0 a 10; 28   o R1 tiene la fórmula: en la que: y1 es 0 ó 1; y2 es independientemente de 0 a 10; y3 es de 1 a 10; E es alquilo C1-C10, N(Q1) (Q2) o N=C(Q1) (Q2); cada Q1 y Q2 es, independientemente, H, alquilo C1-C10, alquilo sustituido, dialquilaminoalquilo, un grupo protector de nitrógeno, un grupo conjugado inmovilizado o no inmovilizado, un enlace para un soporte sólido; o Q1 y Q2, juntos, están unidos en un grupo protector de nitrógeno o una estructura de anillo que puede incluir al menos un heteroátomo adicional seleccionado entre N y O; o R1 tiene una de las fórmulas I o II: en las que: Z0 es O, S o NH; q 1 es de 0 a 10; q 2 es de 0 a 10; q 3 es 0 ó 1; q 4 es 0, 1 ó 2; Z4 es OM1, SM1 o N(M1)2; cada M1 es, independientemente, H, alquilo C1-C8, haloalquilo C1-C8, C(=NH)N(H)M2, C(=O)N(H)M2 u OC(=O)N(H)M2; M2 es H o alquilo C1-C8; Z1, Z2 y Z3 comprenden un sistema de anillo que tiene de 4 a 7 átomos de carbono, o que tiene de 3 a 6 átomos de carbono y 1 ó 2 heteroátomos, en el que dichos heteroátomos se seleccionan entre oxígeno, nitrógeno y azufre, y en el que dicho sistema de anillo es alifático, alifático insaturado, aromático o heterocíclico saturado o insaturado; y Z5 es alquilo o haloalquilo que tiene de 1 a 10 átomos de carbono, alquenilo que tiene de 2 a 10 átomos de carbono, alquinilo que tiene de 2 a 10 átomos de carbono, arilo que tiene de 6 a 14 átomos de carbono, N(Q1), 29   (Q2), OQ1, halo, SQ1 o CN; n es de 2 a 50; m es 0 ó 1; y en la que al menos uno de R1 es un grupo seleccionado entre 2'-metoxietoxi, 2'-dimetilaminooxietoxi, 2'-metoxi, 2'aminopropoxi, flúor, O-alquilo, O-alquilamino, O-alquilalcoxi, O-alquilamino protegido, O-alquilaminoalquilo, O- alquil imidazol, poliéter de la fórmula (O-alquil)m, en la que m es de 1 a 10 y 2'-SR o 2'-NR2, en los que cada R se selecciona independientemente entre hidrógeno, un grupo protector y alquilo, alquenilo o alquinilo sustituido o sin sustituir. 2. El compuesto de la reivindicación 1, en el que R1 es -O-CH2-CH2-O-CH3. 3. El compuesto de la reivindicación 1, en el que n es de 5 a 50. 4. El compuesto de la reivindicación 1, en el que n es de 8 a 30. 5. El compuesto de la reivindicación 1, en el que n es de 4 a 15. 6. El compuesto de la reivindicación 1, en el que n es de 2 a 10. 7. Un oligonucleótido que tiene la formula: en la que: cada B es una nucleobase;   X1 es S; X2 es O; cada R1 es, independientemente, H, hidroxilo, alquilo C1-C20, alquenilo C3-C20, alquinilo C2-C20, halógeno, tiol, ceto, carboxilo, nitro, nitroso, nitrilo, trifluorometilo, trifluorometoxi, O-alquilo, S-alquilo, NH-alquilo, N-dialquilo, O-arilo, S- arilo, NH-arilo, O-aralquilo, S-aralquilo, NH-aralquilo, amino, N-ftalimido, imidazol, azido, hidrazino, hidroxilamino, isocianato, sulfóxido, sulfona, sulfuro, disulfuro, sililo, arilo, heterociclo, carbociclo, intercalante, molécula informadora, conjugado, poliamina, poliamida, polialquilenglicol o poliéter; o R1 es un grupo de fórmula Z-R22-(R23)v; Z es G, S, NH o N-R22-(R23)v; R22 es alquilo C1-C20, alquenilo C2-C20 o alquinilo C2-C20; R23 es hidrógeno, amino, halógeno, hidroxilo, tiol, ceto, carboxilo, nitro, nitroso, nitrilo, trifluorometilo, trifluorometoxi, O-alquilo, S-alquilo, NH-alquilo, N-dialquilo, O-arilo, S-arilo, NH-arilo, O-aralquilo, S-aralquilo, NH-aralquilo, amino, N-ftalimido, imidazol, azido, hidrazino, hidroxilamino, isocianato, sulfóxido, sulfona, sulfuro, disulfuro, sililo, arilo, heterociclo, carbociclo, intercalante, molécula informadora, conjugado, poliamina, poliamida, polialquilenglicol, poliéter; v es de 0 a 10; o R1 tiene la fórmula: en la que: y1 es 0 ó 1; y2 es independientemente de 0 a 10; y3 es de 1 a 10; E es alquilo C1-C10, N(Q1)(Q2) o N=C(Q1) (Q2); cada Q1 y Q2 es, independientemente, H, alquilo C1-C10, alquilo sustituido, dialquilaminoalquilo, un grupo protector de nitrógeno, un grupo conjugado inmovilizado o no inmovilizado, un enlace para un soporte sólido; o Q1 y Q2, juntos, están unidos en un grupo protector de nitrógeno o una estructura de anillo que puede incluir al menos un heteroátomo adicional seleccionado entre N y O; o R1 tiene una de las fórmulas I o II: en las que: 31   Z0 es O, S o NH; q 1 es de 0 a 10; q 2 es de 0 a 10; q 3 es 0 ó 1; q 4 es, 0, 1 ó 2; Z4 es OM1, SM1, o N(M1)2; cada M1 es, independientemente, H, alquilo C1-C8, haloalquilo C1-C8, C(=NH)N(H)M2, C(=O)N(H)M2 u OC(=O)N(H) M2; M2 es H o alquilo C1-C8; Z1, Z2 y Z3 comprenden un sistema de anillo que tiene de 4 a 7 átomos de carbono, o que tiene de 3 a 6 átomos de carbono y 1 ó 2 heteroátomos, en el que dichos heteroátomos se seleccionan entre oxígeno, nitrógeno y azufre, y en el que dicho sistema de anillo es alifático, alifático insaturado, aromático o heterocíclico saturado o insaturado; y Z5 es alquilo o haloalquilo que tiene de 1 a 10 átomos de carbono, alquenilo que tiene de 2 a 10 átomos de carbono, alquinilo que tiene de 2 a 10 átomos de carbono, arilo que tiene de 6 a 14 átomos de carbono, N(Q1)(Q2), OQ1, halo, SQ1 o CN; n es de 2 a 50; y m es 0 ó 1; R2 es H, un grupo protector de hidroxilo o un oligonucleótido; y R3 es OH, un oligonucleótido o un engarce conectado a un soporte sólido; y en la que al menos uno de R1 es un grupo seleccionado entre 2'-metoxietoxi, 2'-dimetilaminooxietoxi, 2'-metoxi, 2'aminopropoxi, flúor, O-alquilo, O-alquilamino, O-alquilalcoxi, O-alquilamino protegido, O-alquilaminoalquilo, Oalquilimidazol, poliéter de la fórmula (O-alquil)m, en la que m es de 1 a 10, y 2'-SR o 2'-NR2 en los que cada R se selecciona independientemente entre hidrógeno, un grupo protector y alquilo, alquenilo o alquinilo sustituido o sin sustituir. 8. El compuesto de la reivindicación 7, en el que R1 es -O-CH2-CH2-O-CH3. 9. El compuesto de la reivindicación 8, en el que R2 es H y R3 es OH. 10. El compuesto de la reivindicación 8, en el que R2 es un oligonucleótico unido a fosfodiéster o un oligonucleótido unido a fosforotioato. 11. El compuesto de la reivindicación 8, en el que R3 es un oligonucleótico unido a fosfodiéster o un oligonucleótido unido a fosforotioato. 12. El compuesto de la reivindicación 8, en el que cada uno de R2 y R3 es un oligonucleótico unido a fosfodiéster o un oligonucleótido unido a fosforotioato. 13. Un compuesto que tiene la fórmula: (5') W 1 -W 2 -W 3 (3') en la que: W 1 tiene la fórmula: 32   en la que: cada B es a nucleobase; uno de X1 o X2 es O y el otro de X1 o X2 es S; cada R1, es, independientemente, H, hidroxilo, alquilo C1-C20, alquenilo C3-C20, alquinilo C2-C20, halógeno, tiol, ceto, carboxilo, nitro, nitroso, nitrilo, trifluorometilo, trifluorometoxi, O-alquilo, S-alquilo, NH-alquilo, N-dialquilo, O-arilo, S-arilo, NH-arilo, O-aralquilo, S-aralquilo, NH-aralquilo, amino, N-ftalimido, imidazol, azido, hidrazino, hidroxilamino, isocianato, sulfóxido, sulfona, sulfuro, disulfuro, sililo, arilo, heterociclo, carbociclo, intercalante, molécula informadora, conjugado, poliamina, poliamida, polialquilenglicol o poliéter; o R1 es un grupo de fórmula Z-R22-(R23)v; Z es O, S, NH o N-R22-(R23)v; R22 es alquilo C1-C20, alquenilo C2-C20 o alquinilo C2-C20; R23 es hidrógeno, amino, halógeno, hidroxilo, tiol, ceto, carboxilo, nitro, nitroso, nitrilo, trifluorometilo, trifluorometoxi, O-alquilo, S-alquilo, NH-alquilo, N-dialquilo, O-arilo, S-arilo, NH-arilo, O-aralquilo, S-aralquilo, NH-aralquilo, amino, N-ftalimido, imidazol, azido, hidrazino, hidroxilamino, isocianato, sulfóxido, sulfona, sulfuro, disulfuro, sililo, arilo, heterociclo, carbociclo, intercalante, molécula informadora, conjugado, poliamina, poliamida, polialquilenglicol, poliéter; v es de 0 a 10; 33   o R1 tiene la fórmula: en la que: y1 es 0 ó 1; y2 es independientemente de 0 a 10; y3 es de 1 a 10; E es alquilo C1-C10, N(Q1)(Q2) o N=C(Q1) (Q2); cada Q1 y Q2 es, independientemente, H, alquilo C1-C10, alquilo sustituido, dialquilaminoalquilo, un grupo protector de nitrógeno, un grupo conjugado inmovilizado o no inmovilizado, un enlace para un soporte sólido; o Q1 y Q2, juntos, están unidos en un grupo protector de nitrógeno o una estructura de anillo que puede incluir al menos un heteroátomo adicional seleccionado entre N y O; o R1 tiene una de las fórmulas I o II: en las que: Z0 es O, S o NH; q 1 es de 0 a 10; q 2 es de 0 a 10; q 3 es 0 ó 1; q 4 es 0, 1 ó 2; Z4 es OM1, SM1 o N(M1)2; cada M1 es, independientemente, H, alquilo C1-C8, haloalquilo C1-C8, C(=NH)N(H)M2, C(=O)N(H)M2 u OC(=O)N(H)M2; M2 es H o alquilo C1-C8; Z1, Z2 y Z3 comprenden un sistema de anillo que tiene de 4 a 7 átomos de carbono o que tiene de 3 a 6 átomos de carbono y 1 ó 2 heteroátomos, en el que dichos heteroátomos se seleccionan entre oxígeno, nitrógeno y azufre, y en el que dicho sistema de anillo es alifático, alifático insaturado, aromático o heterocíclico insaturado o saturado; y Z5 es alquilo o haloalquilo que tiene de 1 a 10 átomos de carbono, alquenilo que tiene de 2 a 10 átomos de 34   carbono, alquinilo que tiene de 2 a 10 átomos de carbono, arilo que tiene de 6 a 14 átomos de carbono, N(Q1) (Q2), OQ1, halo, SQ1 o CN; n es de 2 a 50; y m es 0 ó 1; R2 es H, un grupo protector de hidroxilo o un oligonucleótido; W 3 tiene la fórmula: en la que R3 es OH, un oligonucleótido o un engarce conectado a un soporte sólido; y W 2 es una pluralidad de nuclósidos unidos covalentemente ligados por enlaces fosfodiéster o fosforotioato; y en la que al menos uno de R1 es un grupo seleccionado entre 2'-metoxietoxi, 2'-dimetilaminooxietoxi, 2'-metoxi, 2'aminopropoxi, flúor, O-alquilo, O-alquilamino, O-alquilalcoxi, O-alquilamino protegido, O-alquilaminoalquilo, Oalquil imidazol, poliéter de la fórmula (O-alquil)m en la que m es de 1 a 10, y 2'-SR o 2'-NR2, en los que cada R se selecciona independientemente entre hidrógeno, un grupo protector y alquilo, alquenilo o alquinilo sustituido o sin sustituir. 14. El compuesto de la reivindicación 13, en el que R1 es -O-CH2-CH2-O-CH3. 15. El compuesto de la reivindicación 14, en el que R2 es H y R3 es OH. 16. El compuesto de la reivindicación 14, en el que n es de 5 a 50.   17. El compuesto de la reivindicación 14, en el que n es de 8 a 30. 18. El compuesto de la reivindicación 14, en el que n es de 4 a 15. 19. El compuesto de la reivindicación 14, en el que n es de 2 a 10. 20. El compuesto de la reivindicación 14, en el que W 2 es una pluralidad de nucleósidos unidos covalentemente, unidos por enlaces fosfodiéster. 21. El compuesto de la reivindicación 14, en el que W 2 es una pluralidad de nucleósidos unidos covalentemente, unidos por enlaces fosforotioato. 22. Una composición que comprende un compuesto de la reivindicación 1 y un vehículo aceptable. 23. Una composición que comprende un compuesto de la reivindicación 7 y un vehículo aceptable. 24. Una composición que comprende un compuesto de la reivindicación 12 y un vehículo aceptable. 25. Un compuesto de acuerdo las reivindicaciones 1, 7 ó 13 para su uso en medicina. 26. Un procedimiento de ensayo de un ácido nucleico, que comprende poner en contacto una solución que se sospecha que contiene dicho ácido nucleico con un compuesto de la reivindicación 1. 27. Un procedimiento de ensayo de un ácido nucleico, que comprende poner en contacto una solución que se sospecha que contiene dicho ácido nucleico con un compuesto de la reivindicación 7. 28. Un procedimiento de ensayo de un ácido nucleico, que comprende poner en contacto una suspensión que se sospecha que contiene dicho ácido nucleico con un compuesto de la reivindicación 13. 36   37   38   39