USO DE ANTAGONISTAS O-ATP O BBG DE P2X7 PARA EL TRATAMIENTO DE LA FASE NEURODEGENERATIVA DE LA ESCLEROSIS MULTIPLE.

La presente invención se relaciona con el tratamiento de las enfermedades desmielinizantes y autoinmunes,

muy en especial con el tratamiento de la esclerosis múltiple. El tratamiento consiste en la administración de sustancias antagonistas de los receptores purinérgicos P2X lo que produce una remisión de los síntomas propios de este tipo de enfermedades. Esto se demostró tanto en modelos celulares in vitro, como en modelos animales

Uso de antagonistas o-ATP o BBG de P2x7 para el tratamiento de la fase neurodegenerativa de la esclerosis múltiple.

Campo de la invención

La presente invención se relaciona con el campo de la esclerosis múltiple, así como con el empleo de sustancias antagonistas de los receptores P2X7, presentes en los oligodendrocitos, para el tratamiento de las enfermedades mencionadas anteriormente, y con composiciones que pueden contener dichos antagonistas.

Antecedentes de la invención

La esclerosis múltiple (EM) es la enfermedad desmielinizante más frecuente del sistema nervioso central. Afecta a un millón y medio de personas en el mundo, y sus síntomas aparecen generalmente en adultos jóvenes, por lo que sus consecuencias a nivel personal y socioeconómico son muy graves.

Se piensa que la susceptibilidad a la EM se debe a factores genéticos y ambientales desconocidos. La prevalencia de la enfermedad se sitúa entre 50 a 100 personas por cada 100.000 habitantes en las regiones de alto riesgo, que se localizan principalmente en las zonas septentrionales del hemisferio norte, en Europa y América. El riesgo a padecer EM aumenta 10-20 veces en parientes de pacientes de primer grado, y la concordancia entre gemelos monocigóticos (idénticos genéticamente) se eleva hasta el 30%-50%,mientras que gemelos dicigóticos sólo alcanza el 2%-5%. La susceptibilidad genética no está caracterizada. Hasta el momento se tienen evidencias de que puede residir en algún polimorfismo de los genes que codifican antígenos leucocitarios humanos (HLA), glicoproteína oligodendrocítica de la mielina (MOG) y otros genes de los cromosomas 10 y 15.

Existe un consenso entre los investigadores de la EM según el cual la enfermedad tiene dos fases, una inicial inflamatoria, de naturaleza autoinmune, y otra secundaria, neurodegenerativa progresiva. En la primera, las células T activadas atraviesan la barrera hematoencefálica, y una vez dentro del Sistema Nervioso Central liberan citoquinas proinflamatorias que desencadenan una cascada inmunológica que termina en la destrucción de la mielina y muerte de los oligodendrocitos. El conocimiento con un cierto detalle del proceso autoinmune ha servido para desarrollar agentes de naturaleza inmunomoduladora cuya eficacia terapéutica es muy modesta. Sin embargo, no se ha creado ningún medicamento que retrase o detenga el avance de la fase neurodegenerativa de la enfermedad que cursa con deterioro neurológico progresivo e invalidez, y que se caracteriza por la aparición de lesiones desmielinizantes graves en la sustancia blanca con pérdida masiva de oligodendrocitos, atrofia y daño axonal severo. Hasta ahora se han descrito diversas dianas para la intervención durante la fase inflamatoria de la esclerosis múltiple (Zamvil y Steinman, 2003, Neuron 38, 685-688). Entre ellas se encuentran las que se dirigen a reducir la inflamación del sistema nervioso iniciada por la activación de células T específicas de mielina, que promueven la autoinmunidad en particular contra componentes de la mielina, penetran en el tejido nervioso central y liberan en él citoquinas proinflamatorias tales como el interferón-? y el factor de la necrosis tumoral-a. El inmunomodulador interferón-ß, aprobado para el tratamiento de la esclerosis múltiple remitente-recurrente, previene también las interacciones celulares que llevan a la penetración de las células T activadas a través del endotelio vascular. Otros tratamientos en fase de ensayo clínico están dirigidos a neutralizar la actividad de las citoquinas pro-inflamatorias y/o a potenciar las anti-inflamatiorias. Un estudio reciente (Youssef y col., 2002, Nature 420, 78-84) ha puesto de manifiesto que el medicamento atorvastatina, empleado en el tratamiento de la hipercolesterolemia, es también un potente inmunomodulador que previene o invierte la EAE crónica mediante la potenciación de la secreción de citoquinas antiinflamatorias y la inhibición de la producción de citoquinas proinflamatorias. Los receptores purinérgicos son un tipo de receptores de membrana activados por purinas extracelulares tales como ADP y ATP y que median diversos efectos biológicos, tales como la modulación de la actividad neuronal, la liberación de neurotransmisores, la glucogenolisis, la contractilidad de la pared vascular o determinados procesos inmunológicos etc. Los receptores purinérgicos se clasifican en dos grandes grupos denominados P1, cuya activación esta mediada por adenosina, y P2 cuyos ligandos endógenos son las purinas ATP y ADP y las pirimidinas UTP y UDP. Los receptores P1 transducen la señal al interior de la célula a través de proteínas G y de acuerdo con sus propiedades moleculares, bioquímicas y farmacológicas se subdividen en cuatro grupos: A1, A2A, A2B y A3. Por su parte, los P2 se dividen en ionotrópicos (P2X) y metabotrópicos (P2Y) (Barnard y col., 1997; Ralevic y Burnstock, 1998).

En los últimos años se ha puesto de manifiesto que los receptores purinérgicos además de participar en señales propias de la neurotransmisión, también median efectos sobre las células gliales (Rathbone y col., 1999). De hecho, la expresión de receptores purinérgicos en el sistema nervioso central no está limitada solamente a neuronas, sino que afecta también a la glía (Dunn y col., 2001; Franke y col., 2001a; Stevens y col., 2002). En particular, la señalización purinérgica en los astrocitos y la microglía sirve como un medio de comunicación glía-glía y glía-neurona (Fields y Stevens, 2000). Además, algunos estudios muy recientes señalan la presencia de receptores funcionales en oligodendrocitos in vitro (Stevens y col., 2002), que apuntan a una participación relevante en las funciones propias de este tipo celular. En particular, Stevens y col (2002) muestran que la adenosina liberada desde los axones como consecuencia de la actividad eléctrica, inhibe la proliferación de los precursores oligodendrogliales, estimula su diferenciación y promueve la formación de mielina.

La señalización a través de receptores purinérgicos tiene también importancia en la viabilidad celular en respuesta a procesos patológicos cerebrales (revisado en Abbracchio y Burnstock, 1998). Así, están implicados en la respuesta gliótica al daño nervioso (Franke y col., 2001b; James y Butt, 2001), y en la respuesta reparadora del sistema nervioso central mediante la producción de factores tróficos en astrocitos (Ciccarelli y col., 2001). A su vez, la presencia de ectonucleotidasas que degradan el ATP hasta adenosina constituye un elemento neuroprotector en la isquemia (Braun y col., 1998), mientras que el ATP produce muerte de células gliales (Honda y Kohsaka, 2001).

El conocimiento sobre la implicación del sistema purinérgico en la esclerosis múltiple es muy escaso. Esa información indica que hay alteraciones en la actividad de la 5'-nucleotidasa, el enzima que degrada ATP hasta adenosina. Esta actividad es más elevada en monocitos sanguíneos de pacientes con esclerosis múltiple cultivados durante varios días (Armstrong y col., 1988). Por su parte, las regiones del sistema nervioso central en las que se producen lesiones propias de la esclerosis múltiple tienen una actividad nucleotidasa más baja (Ansari y col., 1978), lo que puede producir concentraciones más elevadas de ATP extracelular y mayor activación de los receptores purinér- gicos P2.

Lo novedoso de la presente invención se basa en el descubrimiento por parte de los inventores de que la administración de una determinada cantidad de algún antagonista de receptores P2X7, seleccionado de BBG ó ATP oxidado (en lo sucesivo en este documento o-ATP), un inhibidor selectivo de los receptores P2X7, produce una remisión de los síntomas de la enfermedad.

Sumario de la invención

El problema a resolver por la presente invención es proporcionar una serie de compuestos para el tratamiento de la fase neurodegenerativa de la esclerosis múltiple.

La solución presentada en este documento se basa en la capacidad que poseen los receptores purinérgicos P2X7 de frenar el desarrollo de las enfermedades mencionadas anteriormente tanto en ensayos in vitro como in vivo. La invención se ilustra en el ejemplo en el que se describen los ensayos llevados a cabo por los inventores en los que, por un lado, se pone de manifiesto que los oligodendrocitos en cultivo expresan los receptores P2X7 en su superficie y, por otro, que la activación de los mismos con ATP produce un aumento del calcio citosólico y, si el estímulo es prolongado, produce finalmente la muerte de las células. Asimismo, se describen ensayos en los que se demuestra en modelos in vivo e in vitro de...

1. Uso del antagonista o-ATP o BBG de los receptores purinérgicos P2x7 para la preparación de un fármaco para el tratamiento de la fase neurodegenerativa de la esclerosis múltiple, en animales, incluido el ser humano.