PROCEDIMIENTO DE SUPRESION DE LA RESPUESTA DEL SISTEMA INMUNE A TEJIDO O CELULAS TRASPLANTADAS.

Un procedimiento para preparar una composición para su uso en la supresión de la enfermedad del injerto contra el huésped en un individuo que recibe una preparación de trasplante,

que comprende las etapas de:

(a) tratar una cantidad de sangre extracorpórea del receptor candidato de trasplante provocando que la sangre fluya a través de un aparato que tiene canales de plástico para inducir que los monocitos contenidos en la sangre se diferencien en células dendríticas

(b) tratar las células dendríticas para interrumpir la maduración de las células dendríticas en una fase en la que las células dendríticas inducen la supresión de una respuesta del sistema inmune;

(c) tratar las células dendríticas después que se haya interrumpido la maduración para eliminar las células dendríticas que muestran antígenos característicos de las células dendríticas maduras;

(d) combinar las células dendríticas con una preparación de trasplante derivada del donante del trasplante propuesto;

(e) incubar de manera conjunta las células dendríticas del receptor propuesto con la preparación de trasplante del donante de trasplante; y

(f) preparar un medicamento para administrar las células dendríticas incubadas conjuntamente y preparación del trasplante al receptor candidato de trasplante

Procedimiento de supresión de la respuesta del sistema inmune a tejido o células trasplantadas.

Campo de la invención

La presente invención se refiere a procedimientos de supresión de la respuesta del sistema inmune en receptores de órganos, tejido, o células trasplantados. En una realización, se proporcionan procedimientos para reducir los efectos de enfermedad de injerto contra huésped (GVHD) en individuos que reciben trasplantes de células del tronco o médula ósea. En otras realizaciones, se proporcionan procedimientos para suprimir la respuesta inmune en individuos que reciben órganos o tejido trasplantados para reducir la probabilidad de rechazo de los órganos o tejido por el receptor de trasplante.

Antecedentes de la invención

El trasplante de órganos, tejido o células de una persona distinta genéticamente (donante) a otro (receptor) está impedido por el rechazo inmunológico del receptor de los órganos o células donados. Este fenómeno de rechazo se entiende que implica tanto mecanismos celulares como humorales, mediados respectivamente por Células T y anticuerpos. El sistema inmune del receptor dirige la distinción de los antígenos de histocompatibilidad sobre las células trasplantadas. Excepto en casos raros, los antígenos de histocompatibilidad del donante no coincidirán exactamente con los del receptor de antígenos de histocompatibilidad, y el sistema inmune del receptor ataca los órganos o células del donante.

Con respecto al rechazo mediado inmunológicamente, los más potentes antígenos de histocompatibilidad son los complejos de histocompatibilidad (MHC) conocidos como los antígenos de leucocitos humanos, HLA-A, HLA-B y HLA-C. Aunque originalmente definidos por su presencia sobre las membranas celulares de leucocitos humanos, se han reconocido durante mucho tiempo que están presentes en virtualmente todas las células con núcleo del cuerpo humano. Ya que cada persona recibe genes que codifican un conjunto de estos antígenos se cada padre, las células humanas expresan típicamente seis antígenos HLA principales. Además de los antígenos de histocompatibilidad principales, existen varios antígenos de histocompatibilidad secundarios.

Cuando se trasplantan tejido o células, es deseable que coincidan, hasta el máximo grado posible, los antígenos de histocompatibilidad del donante y del receptor La mejor coincidencia inmunológica del donante y receptor está entre gemelos idénticos, ya que compartes los seis antígenos HLA principales. Además, los gemelos idénticos comparten los mismos antígenos de histocompatibilidad secundarios, y por lo tanto los órganos o células trasplantados de un gemelo idéntico al otro son inmunológicamente tolerados. En la situación más lejana común en la que el donante y receptor no son genéticamente idénticos, se produce regularmente algún nivel de rechazo inmunológico de tejido trasplantado. Para minimizar este rechazo y permitir la supervivencia del tejido injertado, se hacen de manera rutinaria esfuerzos para encontrar la mejor coincidencia entre donante y receptor. Si no está disponible un gemelo idéntico, la siguiente mejor elección es de manera típica un hermano no idéntico del receptor que comparte los mismos seis antígenos HLA principales, una situación que se produce sobre el promedio de uno a cuatro hermanos. Tal coincidencia de seis HLA entre hermanos es preferible a una coincidencia seis de seis entre individuos no relacionados, debido a que los hermanos coincidentes también más probablemente compartirán algunos antígenos de histocompatibilidad secundarios heredados de sus padres comunes. Todavía, debido a que no son hermanos idénticos, existe una alta probabilidad de diferencia en los antígenos de histocompatibilidad secundarios, y el donante y receptor casi serán ciertamente distintos en términos de antígenos celulares de manera que algún nivel de rechazo de producirá después del trasplante de tejido de un hermano a otro.

Las reacciones adversas después del trasplante de un órgano o tejido de un individuo genéticamente distinto a otro pueden ser profundamente peligrosas. La reacción adversa principal es rechazo inmunológico del órgano o tejido trasplantado. Si el órgano es elemental para la vida, tal como un corazón, hígado o pulmón, la destrucción de ese órgano puede conducir directamente a la muerte del paciente. En tras circunstancias, tales como células de islote pancreático que producen insulina o riñones, la calidad de vida del receptor se puede devastar por el rechazo de tejido. Con el fin de evitar o prevenir o limitar el rechazo, los pacientes de manera típica reciben una combinación de fármacos inmunosupresores, que introducen sus propios efectos secundarios principales. Estos fármacos son usualmente de manera global inmunosupresores, por lo tato incrementando en gran medida la susceptibilidad del receptor a graves infecciones, a menudo mediante organismos contra la que un sistema inmune no comprometido se defendería fácilmente. Los fármacos inmunosupresores individuales tienen cada uno sus propios efectos adversos, especialmente cuando se usan en las dosis necesarias para inhibir el rechazo de órganos trasplantados. Por ejemplo, altas dosis de prednisona precipitan la diabetes mellitus e hipertensión, mientras que de manera simultánea provocan la desmineralización de los huesos de apoyo. Otro fármaco inmunosupresor usado de manera común, ciclosporina A, tiene efectos secundarios importantes sobre el riñón. De manera global los tratamientos de inmunosupresores también incrementan la susceptibilidad de los receptores de trasplante a infecciones oportunistas, contra las que los individuos normales tienen fuertes defensas.

Estos efectos adversos han estimulado investigaciones par alas terapias que pueden suprimir de manera más selectiva el rechazo del tejido trasplantado, mientras que dejan el resto del sistema inmune intacto y no lesionando otros órganos importantes. Un planteamiento especialmente prometedor ha siso el uso de un dispositivo de Fotoferesis convencional para administrar la inmunoterapia en general mencionada en el presente documento como "Transinmunización" para evitar o invertir el rechazo de órganos trasplantados. Dependiendo de las circunstancias, el impacto terapéutico de la Transinmunización se puede potenciar mediante la siguiente etapa de Fotoferesis convencional cuna fase de incubación durante toda una noche, antes de devolver las células tratadas al paciente. La Transinmunización se puede llevar a cabo usando un aparato de, aunque la Transinmunización también se puede llevar a cabo sin el uso de un aparato de Fotoferesis, usando otra metodología.

Un ensayo controlado que compara Fotoferesis convencional más inmunosupresión convencional con inmunosupresión convencional sola en la prevención de rechazo de corazones trasplantados se reseñan por Barr et al., Photopheresis for the prevention of rejection in cardiac transplantation, New England Journal of Medicine, Vol. 339, No. 4,1744 - 51, 10 de diciembre de 1998. Ese estudio reveló que la adición de la Fotoferesis al régimen inmunosupresor convencional redujo de manera completamente significativa y segura el número de episodios de rechazo, por lo tanto disminuyendo de manera notable la necesidad de activación peligrosa de los niveles de fármacos inmunosupresores convencionales. De manera similar, en Greinix et al., Successful use of extracorporeal photochemotherapy in the treatment of severe acute and chronic enfermedad del injerto contra el huésped, Blood, Vol. 92, No. 9, 3098 - 3104, 1998, y en Greinix et al., Extracorporeal photochemotherapy in the treatment of severe steroid-refractory acute graft- versus-hostdisease: a pilotstudy, Blood, Vol. 96, No. 7, 2426 - 31, 2000, los autores describen el ensayo que reveló que la Fotoferesis era particularmente eficaz en la inversión de los efectos adversos (conocidos como la enfermedad de injerto contra el huésped o GVHD) después de trasplante de células de médula ósea o del tronco.

Un mecanismo que está implicado en la eficacia de Fotoferesis se ha descifrado recientemente. El sistema de exposición de exposición de ultravioleta de plástico plano, un componente del aparato de Fotoferesis, puede provocar la transformación de los monocitos en sangre a las células dendríticas que presentan antígeno (células dendríticas) como resultado de las fuerzas impuestas sobre los monocitos a medida que fluyen una vez que se ha pasado la superficie de plástico en un aparato convencional de Fotoferesis. Ya que los beneficios terapéuticos que se producen del uso de estas células dendríticas están provocados por la transferencia de antígenos...

1. Un procedimiento para preparar una composición para su uso en la supresión de la enfermedad del injerto contra el huésped en un individuo que recibe una preparación de trasplante, que comprende las etapas de:

(a) tratar una cantidad de sangre extracorpórea del receptor candidato de trasplante provocando que la sangre fluya a través de un aparato que tiene canales de plástico para inducir que los monocitos contenidos en la sangre se diferencien en células dendríticas

(b) tratar las células dendríticas para interrumpir la maduración de las células dendríticas en una fase en la que las células dendríticas inducen la supresión de una respuesta del sistema inmune;

(c) tratar las células dendríticas después que se haya interrumpido la maduración para eliminar las células dendríticas que muestran antígenos característicos de las células dendríticas maduras;

(d) combinar las células dendríticas con una preparación de trasplante derivada del donante del trasplante propuesto;

(e) incubar de manera conjunta las células dendríticas del receptor propuesto con la preparación de trasplante del donante de trasplante; y

(f) preparar un medicamento para administrar las células dendríticas incubadas conjuntamente y preparación del trasplante al receptor candidato de trasplante.

2. El procedimiento de la reivindicación 1, en el que la etapa de tratamiento de una cantidad de sangre extracorpórea del receptor candidato de trasplante comprende provocar que la sangre fluya a través de un aparato que tiene canales de plástico con un diámetro de entre, aproximadamente 0,5 mm y aproximadamente 5,0 mm.

3. El procedimiento de la reivindicación 1, en el que la etapa de tratamiento de una cantidad de sangre extracorpórea del receptor candidato de trasplante se realiza en un aparato de Fotoferesis.

4. El procedimiento de la reivindicación 1, en el que las etapas de tratamiento de las células dendríticas para interrumpir la maduración de las células dendríticas comprenden una de las siguientes:

(a) irradiar las células dendríticas con irradiación gamma;

(b) exponer las células dendríticas a un fármaco cistostático, de manera preferente seleccionado entre mitomicina C y ciclofosfamida.

5. El procedimiento de la reivindicación 1, en el que la etapa de tratamiento de las células dendríticas para interrumpir la maduración de las células dendríticas comprende exponer las células dendríticas a una citoquina IL-10.

6. El procedimiento de la reivindicación 1, en el que las células dendríticas y la preparación de trasplante se incuban conjuntamente durante un período de tiempo de entre aproximadamente 12 horas y aproximadamente 24 horas.

7. El procedimiento de la reivindicación 6, en el que las células dendríticas y la preparación de trasplante o las células dendríticas y los leucocitos de sangre inactivados se incuban conjuntamente a una temperatura de aproximadamente 37 grados centígrados en una atmósfera gaseosa que comprende aproximadamente 5% de dióxido de carbono y aproximadamente 95% de oxígeno.

8. El procedimiento de la reivindicación 1, en el que las células dendríticas se tratan después que la maduración se haya interrumpido, provocando que las células dendríticas fluyan a través de una columna empaquetada.

9. El procedimiento de la reivindicación 8, en el que la columna empaquetada contiene perlas de resina recubiertas con anticuerpos monoclonales que se unen de manera selectiva a antígenos mostrados por las células dendríticas maduras.