Un anticuerpo o una parte de unión antigénica del mismo, que se une específicamente al Aß humano,

en el que dicho anticuerpo comprende:

a) Una CDR1 de cadena liviana que comprende la secuencia de aminoácidos del NÚM. ID. SEC.: 8;

b) Una CDR2 de cadena liviana que comprende la secuencia de aminoácidos del NÚM. ID. SEC.: 23;

c) Una CDR3 de cadena liviana que comprende la secuencia de aminoácidos del NÚM. ID. SEC.: 34;

d) Una CDR1 de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos del NÚM. ID. SEC.: 38;

e) Una CDR2 de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos del NÚM. ID. SEC.: 59; y

f) Una CDR3 de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos del NÚM. ID. SEC.: 71

Moléculas de unión al Aß.

Antecedentes de la invención

La invención se refiere a anticuerpos humanizados que se unen al péptido beta amiloide (Aß) y al tratamiento preventivo y terapéutico de las afecciones asociadas con el péptido Aß, tales como la enfermedad de Alzheimer, el síndrome de Down y la angiopatía cerebral amiloide.

El péptido Aß en la forma circulante se compone de 39 - 43 aminoácidos (principalmente de 40 ó 42 aminoácidos) que resultan de la división de una proteína precursora, proteína precursora amiloide (APP). La conversión de Aß de formas solubles a formas insolubles con un alto contenido de láminas ß y su deposición como placas neuríticas y cerebrovasculares en el cerebro parece estar asociada con un número de afecciones y enfermedades. Entre estas afecciones y enfermedades están la enfermedad de Alzheimer, tanto preclínica como clínica, el síndrome de Down y la angiopatía cerebral amiloide (CAA), tanto preclínica como clínica. La prevención y/o la inversión de la deposición de Aß son procedimientos prometedores para el tratamiento de afecciones asociadas con el péptido Aß.

Los agentes terapéuticos que pueden prevenir o invertir la deposición de Aß incluyen desde anticuerpos hasta péptidos Aß. Los documentos WO 00/72880 y "Nature Med." de Bard. F. y colaboradores (2000) 6: 916 - 919 describen una reducción significativa de la placa en el cortex y en el hipocampo en un modelo de ratón transgénico de la enfermedad de Alzheimer cuando se trata utilizando fragmentos del terminal N de péptidos y anticuerpos Aß que se unen a ellos, pero no cuando se trata con el conjugado del fragmento Aß 13-28 para el IgG ovino antimurínico o con un anticuerpo contra el fragmento 13 - 28, anticuerpo 266. Basándose en estudios in vitro así como un posterior ensayo ex vivo (Bard, F. y colaboradores, Proc. Natl. Acad. Sci. (2003) 100:2023-2038), se ha comprobado que los anticuerpos dirigidos del terminal N cruzan la barrera sangre - cerebro y para inducir la fagocitosis de las placas amiloides.

Las patentes de EE.UU. 5.766.846; 5.837.672 y 5.593.846 describen la producción de anticuerpos monoclonales murinos para el dominio central del péptido Aß. Entre los anticuerpo que se sabe que se unen entre los aminoácidos 13 y 28 de Aß están los anticuerpos murinos 266, 4G8 y IC2.

Previamente se había hallado, tal como se describe en el documento WO 01/62801, que la administración del anticuerpo murino 266 (m266) restaura casi completamente la cognición que sigue a períodos prolongados de administración semanal del anticuerpo 266 (memoria objeto) en ratones transgénicos hemicigotos de 24 meses (APP^V717F). También se había observado que la administración periférica del anticuerpo 266 da como resultado un rápido eflujo de cantidades relativamente grandes de película de péptido Aß del SNC dentro del plasma. El tratamiento prolongado también dio como resultado un aclaramiento alterado del Aß soluble, la prevención de la formación de la placa y la mejora en la cognición incluso sin tener necesariamente las características que según la técnica se requieren para que un anticuerpo sea efectivo, nominalmente, la reducción de la cantidad de placa amiloide del Aß, el cruce de la barrera sangre/cerebro hasta una cantidad significativa, la decoración de la placa, la activación de los mecanismos celulares o la unión con una gran afinidad al Aß agregado.

En conjunción con los resultados puestos de manifiesto con un modelo muríno que indican una utilidad terapéutica de un anticuerpo 266, el documento WO 01/62801 también presenta anticuerpos 266 humanizados. Estos anticuerpos contienen variaciones en las regiones estructurales que rodean regiones determinantes complementarias (CDR) del anticuerpo m266, así como dos sustituciones de aminoácidos en una posición simple en la CDR1 de la cadena liviana del anticuerpo m266. Anticuerpos 266 humanizados adicionales se presentan en el documento WO 03/016466, en los cuales las sustituciones de aminoácidos se producen en tres posiciones en la CDR2 a partir de la cadena pesada del anticuerpo m266.

Los anticuerpos terapéuticamente beneficiosos que se unen al epítopo reconocido por el m266 deseablemente serán estables en solución, mostrarán farmacocinéticas favorables y poseerán afinidad hacia un epítopo formado por los aminoácidos 13 y 28 del Aß. Así, existe la necesidad de anticuerpos adicionales que posean características similares o mejores que las del m266 que sean eficaces en humanos.

Resumen de la invención

La invención suministra un anticuerpo, o una parte de unión antigénica del mismo, que específicamente se une al Aß humano, dicho anticuerpo comprende:

En otro aspecto, la invención se refiere a un ácido nucleico aislado que comprende un polinucleótido que codifica un anticuerpo o una parte de unión antigénica del mismo aquí suministrado y un vector de expresión que comprende ácido nucleico codificador. Se suministra una célula anfitriona transfectada de forma estable con este vector de expresión en la que la célula anfitriona expresa una proteína del anticuerpo o de la parte de unión antigénica de la invención.

La invención se refiere además al uso del anticuerpo proporcionado por la invención para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de un sujeto con la enfermedad de Alzheimer.

Similarmente, se suministra un anticuerpo o una parte de unión antigénica del mismo que se une específicamente al Aß humano de acuerdo con la invención para su utilización en la terapia, más particularmente para su uso en el tratamiento, de la enfermedad de Alzheimer.

La presente invención también incluye procedimientos de tratamiento, prevención o inversión de afecciones y enfermedades asociadas con el péptido Aß, que incluyen la enfermedad de Alzheimer tanto preclínica como clínica, el Síndrome de Down y la angiopatía cerebral amiloide (CAA), tanto preclínica como clínica. Estos procedimientos comprenden la administración a un sujeto de una cantidad efectiva de un anticuerpo como el aquí descrito y reivindicado.

Descripción detallada de la invención

El término "anticuerpo", tal como aquí se usa, tiene la intención de referirse a moléculas de inmunoglobulina que están compuestas por cuatro cadenas de polipéptidos, dos cadenas pesadas (H) y dos cadenas livianas (L) interconectadas por enlaces de bisulfuro. Cada cadena pesada está compuesta de una región variable de cadena pesada (que aquí se abrevia como HCVR o VH) y una región constante de cadena pesada. La región constante de cadena pesada se compone de tres dominios CH1, CH2 y CH3. Cada cadena liviana está compuesta de una región variable de cadena liviana (que aquí se abrevia como LCVR o VL) y una región constante de cadena liviana. La región constante de cadena liviana se compone de un dominio, CL. Las regiones VH y VL pueden estar subdivididas además en regiones de hipervariabilidad, denominadas regiones de complementariedad determinante (CDR), intercaladas con regiones que están más conservadas, denominadas regiones de estructura (FR). Cada VH y VL se compone de tres CDR y cuatro FR, dispuestas desde el extremo amino hasta el extremo carbóxido en el siguiente orden: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR2, CDR2, FR4. Basándose en este ordenamiento, las CDR de la cadena liviana pueden denominarse como CDR L1, CDR L2 y CDR L3, mientras que las CDR de la cadena pesada pueden denominarse como CDR H1, CDR H2 y CDR H3. La asignación de aminoácidos a cada dominio está de acuerdo con las convenciones bien conocidas [Kabat "Sequences of Proteins of Immunologial Interest," National Institutes of Health, Bethesda, MD, 1987 y 1991; Chothia...

1. Un anticuerpo o una parte de unión antigénica del mismo, que se une específicamente al Aß humano, en el que dicho anticuerpo comprende:

2. El anticuerpo o una parte de unión antigénica el mismo de la reivindicación 1, que es un anticuerpo humanizado.

3. El anticuerpo de la reivindicación 2, que comprende una estructura de cadena liviana seleccionada entre el grupo que consta de los NÚM. ID. SEC.: 3 y 4 y una estructura de cadena pesada seleccionada entre el grupo que consta de los NÚM. ID. SEC.: 5 y 6.

4. El anticuerpo de la reivindicación 3 que comprende una estructura de cadena liviana tal como la mostrada en el NÚM. ID. SEC.: 4 y una estructura de cadena pesada tal como la mostrada en el NÚM. ID. SEC.: 5.

5. El anticuerpo de la reivindicación 3, que comprende una estructura de cadena liviana tal como la mostrada en el NÚM. ID. SEC.: 4 y una estructura de cadena pesada tal como la mostrada en el NÚM. ID. SEC.: 6.

6. Una parte de unión a un antígeno de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 que es un fragmento Fab o F(ab')₂.

7. Una parte de unión a un antígeno de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 que es un fragmento Fab.

8. Una parte de unión a un antígeno de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 que es un fragmento F(ab')₂.

9. El anticuerpo de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en el que dicho anticuerpo o fragmento es un isotipo IgG.

10. El anticuerpo de la reivindicación 9, en el que el isotipo se selecciona entre el grupo que consta de regiones constantes de la cadena pesada de IgG1 y IgG4.

11. Un ácido nucleico aislado, que comprende un polinucleótido que comprende un anticuerpo o una parte de unión a un antígeno del mismo de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10.

12. Un vector de expresión que comprende un ácido nucleico de acuerdo con la reivindicación 11.

13. Una célula anfitriona establemente transfectada con el vector de expresión de la reivindicación 12, en la que la célula anfitriona expresa una proteína de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10.

14. Una composición farmacéutica que comprende el anticuerpo o una parte de unión a un antígeno del mismo de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a10.

15. El uso del anticuerpo de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10 para la manufactura de un medicamento para tratar a un sujeto con la enfermedad de Alzheimer.

16. Un anticuerpo o una parte de unión a un antígeno del mismo, que se une específicamente al Aß humano de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10 para su uso en terapia.

17. Un anticuerpo o una parte de unión a un antígeno del mismo, que se une específicamente al Aß humano de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10 para su uso en el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer.