INMUNOANALISIS DEL TAXOL.
Un inmunoanálisis para detectar el taxol en una muestra que comprende proporcionar una mezcla que contiene dicha muestra,
un anticuerpo que es selectivamente reactivo con el taxol y que tiene una reactividad cruzada con el 6-a-hidroxipaclitaxel y el 3'-p-hidroxipaclitacel en comparación con el taxol de menos del 10% y un conjugado de un vehículo con un compuesto de fórmula:
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2005/026748.
Solicitante: SALADAX BIOMEDICAL INC..
Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.
Dirección: 115 RESEARCH DRIVE, JORDAN HALL,BETHLEHEM PA 18015.
Inventor/es: SALAMONE,SALVATORE, COURTNEY,JODI,BLAKE, STOCKER,DENNIS.
Fecha de Publicación: .
Fecha Concesión Europea: 14 de Julio de 2010.
Clasificación Internacional de Patentes:
- G01N33/94 FISICA. › G01 METROLOGIA; ENSAYOS. › G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › en los que intervienen narcóticos.
Clasificación PCT:
- A61K31/337 NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA. › A61 CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE. › A61K PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO (dispositivos o métodos especialmente concebidos para conferir a los productos farmacéuticos una forma física o de administración particular A61J 3/00; aspectos químicos o utilización de substancias químicas para, la desodorización del aire, la desinfección o la esterilización, vendas, apósitos, almohadillas absorbentes o de los artículos para su realización A61L; composiciones a base de jabón C11D). › A61K 31/00 Preparaciones medicinales que contienen ingredientes orgánicos activos. › que tienen ciclos de cuatro eslabones, p. ej. taxol.
- C07K16/44 QUIMICA; METALURGIA. › C07 QUIMICA ORGANICA. › C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02; proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › C07K 16/00 Inmunoglobulinas, p. ej. anticuerpos mono o policlonales. › contra material no previsto.
- C07K17/06 C07K […] › C07K 17/00 Péptidos fijados sobre un soporte o inmovilizados; Su preparación. › unidos al soporte por medio de un agente de unión.
- C12P17/02 C […] › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12P PROCESOS DE FERMENTACION O PROCESOS QUE UTILIZAN ENZIMAS PARA LA SINTESIS DE UN COMPUESTO QUIMICO DADO O DE UNA COMPOSICION DADA, O PARA LA SEPARACION DE ISOMEROS OPTICOS A PARTIR DE UNA MEZCLA RACEMICA. › C12P 17/00 Preparación de compuestos heterocíclicos que contienen O, N, S, Se o Te como únicos heteroátomos del ciclo (C12P 13/04 - C12P 13/24 tienen prioridad). › oxígeno como único heteroátomo del ciclo.
- G01N33/53 G01N 33/00 […] › Ensayos inmunológicos; Ensayos en los que interviene la formación de uniones bioespecíficas; Materiales a este efecto.
- G01N33/531 G01N 33/00 […] › Producción de materiales de investigación o de análisis inmunoquímicos.
Fragmento de la descripción:
Inmunoanálisis del taxol.
Campo de la invención
La presente invención se refiere al campo de los análisis inmunológicos para determinar la presencia y/o cuantificar la cantidad de taxol en fluidos biológicos humanos con el fin de determinar de manera rápida las concentraciones óptimas del fármaco durante una quimioterapia.
Antecedentes de la invención
Cáncer es un término usado para describir un grupo de tumores malignos que comparten el rasgo común de desarrollarse cuando las células de una parte del cuerpo comienzan a crecer sin control. La mayoría de los cánceres se forman como tumores, pero también se pueden manifestar en la sangre y circular por otros tejidos en los que crecen. Los tumores malignos cancerosos se tratan más comúnmente con una combinación de cirugía, quimioterapia y/o radioterapia. El tipo de tratamiento usado para tratar un cáncer específico depende de varios factores que incluyen el tipo de tumor maligno canceroso y el estadio en el que fue diagnosticado.
El taxol, también conocido como paclitaxel, es uno de los agentes citotóxicos más comunes usados para el tratamiento del cáncer de mama (Holmes et. al. Proc. Am. Soc. Clin. Oncol., 10, 60, 1991), del cáncer de ovario (Einzig et. al. Proc. Am. Assoc. Cancer Res., 31, 1114, 1990) y del cáncer de pulmón de células no pequeñas. El taxol tiene la fórmula:
Este compuesto se ha asociado con efectos secundarios debilitantes, tales como la pérdida de densidad de médula ósea, reacción alérgica, neutropenia, hipotensión, bardicardia, náuseas y vómitos. Mediante el control de los niveles de taxol en el cuerpo y el ajuste de la dosis, es posible controlar y limitar mejor estos efectos secundarios en los pacientes.
Al mismo tiempo, a menudo, existe una relación muy variable entre la dosis del taxol y la concentración del fármaco en suero resultante que afecta al efecto terapéutico. El grado de variabilidad farmacocinética intra- e interindividual del taxol puede ser tan elevado como de cinco veces (Gurney et. al., J. Clin. Oncol. 14, pp 2590-2611, 1996) y se ve afectado por muchos factores que incluyen:
la función orgánica,
la regulación genética,
el estado patológico,
la edad,
la interacción fármaco-fármaco,
el momento de la ingestión del fármaco,
el modo de administración del fármaco y
la administración en relación con la técnica.
Como resultado de esta variabilidad, las dosis iguales de un mismo fármaco en individuos diferentes pueden producir resultados clínicos espectacularmente diferentes (Hon et. al. Clinical Chemistry 44, pp 388-400,1998). La eficacia de la misma dosis de taxol varía significativamente en base al aclaramiento del fármaco individual y la concentración de fármaco en suero final en el paciente. La administración terapéutica del fármaco proporcionaría al profesional clínico la oportunidad de comprender la variación producida en el paciente en la administración tanto oral como intravenosa del fármaco. Con la administración terapéutica del fármaco, se podrían individualizar las dosis de fármaco para el paciente, y las posibilidades de tratar el cáncer con eficacia, sin los no deseados efectos secundarios, podrían ser mucho mayores.
Además, la administración terapéutica del fármaco taxol serviría como una excelente herramienta para garantizar la administración de la quimioterapia con las dosis reales prescritas y el logro de niveles de concentración en suero eficaces. Se ha descubierto que la variabilidad de la concentración en suero no sólo se debe a factores fisiológicos, sino que también puede ser el resultado de la variación en la técnica de administración.
La administración terapéutica rutinaria del fármaco taxol requeriría la disponibilidad de análisis automáticos sencillos adaptables al equipo de laboratorio general. Los análisis que mejor cumplen estos criterios son los inmunoanálisis. Para el taxol, se han publicado un radioinmunoanálisis y un análisis de inmunoabsorción ligado a una enzima (análisis ELISA) (Erlanger et. al., patente estadounidense 5.756.301, 26 de mayo de 1998 y Grothaus et al., J. Nat. Prod., 1995, Vol. 58, n.º 7, pp 1003-1014). Sin embargo, los derivados y los inmunógenos usados en este análisis confieren a los correspondientes anticuerpos una amplia reactividad cruzada con el taxol y los metabolitos del taxol, particularmente, con el 6-a-hidroxipaclitaxel. Para ser más eficaz en el control de los niveles de fármaco, el anticuerpo debería ser más específico del compuesto activo y presentar una reactividad cruzada de muy baja a nula con los metabolitos no activos.
Resumen de la invención
Según la presente invención, se ha producido una nueva clase de anticuerpos que son sustancialmente selectivamente reactivos con el taxol como para unirse al taxol sin una reactividad cruzada sustancial con los metabolitos del taxol, particularmente, con el 6-a-hidroxipaclitaxel y el 3'-p-hidroxipaclitaxel. "Selectivamente reactivo" pretende significar que este anticuerpo sólo reacciona con la molécula de taxol y no reacciona sustancialmente con otros compuestos, tales como los metabolitos del taxol, siendo los metabolitos bloqueadores más importantes el 6-a-hidroxipaclitaxel y el 3'-p-hidroxipaclitaxel.
Se ha descubierto que mediante el uso de inmunógenos que sean conjugados de un polímero de poliamina inmunogénico con un compuesto de fórmula:
en la que:
Y es un grupo espaciador orgánico;
X es un grupo funcional terminal capaz de unirse a un polímero de poliamina;
p es un número entero de 0 a 1; y
Ph es fenilo
y B es -CH2- o
o mezclas del mismo; se producen anticuerpos que son específicos del taxol y que no reaccionan sustancialmente ni se unen con otros compuestos, tales como metabolitos o compuestos relacionados del taxol, tales como Bacatina III, 3'-p-hidroxipaclitaxel y 6-a-hidroxipaclitaxel. El suministro de estos anticuerpos que reaccionan sustancialmente selectivamente con el taxol y no reaccionan de manera cruzada con el 6-a-hidroxipaclitaxel ni con el 3'-p-hidroxipaclitaxel (i.e., menos del 10%) permite la producción de un inmunoanálisis que puede detectar y controlar específicamente el taxol en muestras de fluidos de pacientes que estén siendo tratados con taxol. También se incluyen en la presente los reactivos y equipos para dicho inmunoanálisis. La presencia del 6-a-hidroxipaclitaxel y el 3'-p-hidroxipaclitaxel como metabolitos del taxol es la causa principal de lecturas de falsos positivos en los inmunoanálisis pasados del taxol.
Descripción detallada
Según la presente invención, se proporciona una nueva clase de anticuerpos que reaccionan sustancialmente selectivamente con el taxol y no reaccionan sustancialmente ni reaccionan de manera cruzada con los metabolitos del taxol mencionados anteriormente en la presente memoria. Se ha descubierto que con el uso de estos derivados del 7-hidroxi-taxol de fórmula II-B como inmunógenos, se proporciona esta nueva clase de anticuerpos de la presente invención. Mediante el uso de estos anticuerpos se ha desarrollado un inmunoanálisis, incluyendo reactivos y equipos para tal inmunoanálisis, para detectar y/o cuantificar el taxol en sangre, plasma u otras muestras de fluidos corporales. Mediante el uso de este inmunoanálisis, se puede detectar y/o cuantificar la presencia y la cantidad de taxol en muestras de fluidos corporales, preferiblemente, en una muestra de sangre o de plasma. De esta manera, se puede hacer un seguimiento de un paciente que esté siendo tratado con taxol durante una terapia y ajustar su tratamiento según dicho seguimiento. Por medio de la presente invención se consigue la administración terapéutica del fármaco taxol en pacientes con cáncer que estén siendo tratados con taxol como agente quimioterapéutico.
Los reactivos utilizados en el análisis de la presente invención son conjugados de un vehículo polimérico con los compuestos de fórmula II-B. Estos conjugados son parejas de unión competitiva con el taxol presente en la muestra por la unión con los anticuerpos de la presente. Por lo tanto, la...
Reivindicaciones:
1. Un inmunoanálisis para detectar el taxol en una muestra que comprende proporcionar una mezcla que contiene dicha muestra, un anticuerpo que es selectivamente reactivo con el taxol y que tiene una reactividad cruzada con el 6-a-hidroxipaclitaxel y el 3'-p-hidroxipaclitacel en comparación con el taxol de menos del 10% y un conjugado de un vehículo con un compuesto de fórmula:
en la que B es -CH2- o
Y es un grupo espaciador orgánico;
X es un grupo funcional terminal capaz de unirse a un polímero de poliamina;
p es un número entero de 0 a 1; y
Ph es fenilo,
que hace que el taxol de la muestra y dicho conjugado se unan con dicho anticuerpo y, a partir de entonces, medir la cantidad de dicho conjugado en dicha mezcla que está unido o no unido a dicho anticuerpo mediante lo cual se puede determinar la presencia de taxol en la muestra.
2. Un inmunoanálisis según la reivindicación 1, en el que p es 0.
3. Un inmunoanálisis según la reivindicación 1, en el que p es 1.
4. Un inmunoanálisis según la reivindicación 3, en el que Y es alquileno que contiene de 1 a 10 átomos de carbono,
en la que n y o son números enteros de 0 a 6, y m es un número entero de 1 a 6.
5. Un inmunoanálisis según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que X es
en la que R3 es hidrógeno o tomado junto con su átomo de oxígeno unido forma un éster reactivo y R4 es oxígeno o azufre.
6. Un inmunoanálisis según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que X es
y R3 es hidrógeno.
7. Un inmunoanálisis según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que X es
y R3 forma un éster reactivo.
8. Un inmunoanálisis según la reivindicación 7, en el que el éster formado es un alquiléster inferior, un imidoéster o un amidoéster.
9. Un inmunoanálisis según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que la muestra es una muestra humana.
10. Un inmunoanálisis según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que dicho anticuerpo se genera a partir de un inmunógeno que comprende un polímero inmunogénico ligado a un compuesto de fórmula:
en la que Ph, p, Y, X y B son como se definen en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8.
11. Un inmunoanálisis según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que el anticuerpo está unido a un soporte sólido.
12. Un inmunoanálisis según la reivindicación 11, en el que el soporte sólido es placas de microvaloración.
13. Un inmunoanálisis según la reivindicación 11, en el que el soporte sólido es nanopartículas.
14. Un anticuerpo que es selectivamente reactivo con el taxol y que tiene una reactividad cruzada con 6-a-hidroxipaclitaxel y 3'-p-hidroxipaclitacel en comparación con el taxol de menos del 10%.
15. Un anticuerpo según la reivindicación 14, en el que dicho anticuerpo deriva de ratones, conejos o ratas.
16. Un anticuerpo según la reivindicación 14 o la reivindicación 15, anticuerpo que es un anticuerpo monoclonal.
17. Un anticuerpo según una cualquiera de las reivindicaciones 14 a 16, anticuerpo que deriva de un inmunógeno de un polímero de poliamina con un compuesto de fórmula:
en la que Ph, p, Y, X y B son como se definen en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8.
18. Un conjugado de un vehículo con un compuesto de fórmula:
en la que Ph, p, Y, X y B son como se definen en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8.
19. Un conjugado según la reivindicación 18, en el que el vehículo contiene uno o más grupos amino ligados por
en la que R4 es oxígeno o azufre.
20. Un inmunógeno que contiene un polímero de poliamina inmunogénico ligado a un compuesto de fórmula:
en la que Ph, p, Y, X y B son como se definen en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8.
21. Un inmunógeno según la reivindicación 20, en el que el polímero inmunogénico contiene uno o más grupos amino ligados por
en la que R4 es oxígeno o azufre.
22. Un equipo para determinar la presencia de taxol en una muestra de paciente que comprende reactivos en recipientes separados, siendo uno de los reactivos un conjugado de un vehículo con un compuesto de fórmula:
en la que Ph, p, Y, X y B son como se definen en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8,
y conteniendo el segundo recipiente un anticuerpo que es selectivamente reactivo con el taxol y que tiene una reactividad cruzada con 6-a-hidroxipaclitaxel y 3'-p-hidroxipaclitacel en comparación con el taxol de menos del 10%.
23. Un equipo según la reivindicación 22, en el que dicho conjugado está presente en una cantidad predeterminada en dicho primer recipiente.
24. Un equipo según la reivindicación 22 o la reivindicación 23, equipo que se usa para determinar la cantidad de taxol en dicha muestra.
25. Un equipo según una cualquiera de las reivindicaciones 22 a 24, en el que dicho anticuerpo se genera a partir de un inmunógeno de un polipéptido de poliamina inmunogénico ligado a un compuesto de fórmula:
en la que Ph, p, Y, X y B son como se definen en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8.
Patentes similares o relacionadas:
Anticuerpos para olanzapina y uso de los mismos, del 8 de Julio de 2020, de JANSSEN PHARMACEUTICA NV: Un anticuerpo aislado o un fragmento de unión del mismo, que se une a olanzapina y que se selecciona del grupo que consiste de: i) un anticuerpo aislado o un fragmento […]
Anticuerpos para haptenos de quetiapina y uso de los mismos, del 26 de Febrero de 2020, de JANSSEN PHARMACEUTICA NV: Un anticuerpo aislado o un fragmento de enlace del mismo, que enlaza específicamente con la quetiapina, y se genera en respuesta a un conjugado de un compuesto de Fórmula […]
Kits de detección de lectura directa para contaminación de superficie por fármacos antineoplásicos, del 12 de Febrero de 2020, de Centers for Disease Control and Prevention: Un procedimiento para detectar la contaminación por fármacos antineoplásicos de una superficie, que comprende: proporcionar una solución humectante […]
Método para la medición de anticuerpos anti-fármaco, del 25 de Diciembre de 2019, de JIMRO CO., LTD: Un método para medir anticuerpos anti-fármaco (ADA) en un analito a medir, comprendiendo el método: una etapa de proporcionar una muestra […]
Matriz multisensor y su uso para la detección de analitos o mezclas de los mismos en la fase gaseosa y procedimiento para su preparación, del 27 de Noviembre de 2019, de DANMARKS TEKNISKE UNIVERSITET: Una matriz multisensor para la detección de un analito o mezclas del mismo en la fase gaseosa, que comprende al menos dos compuestos quimioselectivos […]
Procedimiento diagnóstico para detectar una enfermedad autoinmunitaria relacionada con gaba(a) y materia objeto relacionada, del 27 de Noviembre de 2019, de Institut D'Investigaciones Biomèdiques August Pi i Sunyer: Uso in vitro de un GABA(A)R, fragmento de GABA(A)R, u homólogo del mismo o de una célula que expresa el GABA(A)R, fragmento de GABA(A)R, u homólogo del mismo para el pronóstico […]
Composiciones y métodos para la detección de metabolitos de metadona, del 5 de Noviembre de 2019, de SIEMENS HEALTHCARE DIAGNOSTICS INC.: Un compuesto que comprende una unidad estructural, seleccionada del grupo que consiste en unidades estructurales de etiqueta de poli(aminoácido), […]
Anticuerpos contra haptenos de olanzapina y uso de los mismos, del 15 de Mayo de 2019, de JANSSEN PHARMACEUTICA NV: Un método para producir un anticuerpo que se une a la olanzapina, el método comprendiendo: (i) seleccionar un huésped no humano para la producción de anticuerpos; […]