Una composición farmacéutica que comprende uno o más péptidos seleccionados del grupo que consiste en un péptido que consiste en por la secuencia de una cualquiera de las SEC ID Nº 1 a SEC ID Nº: 42

CAMPO DE LA INVENCIÓN

La presente invención se refiere a péptidos y usos de los mismos en el tratamiento o prevención de la infección por el virus de la hepatitis C (VHC).

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

Los virus deben infectar las células huésped para replicarse, producir una infección que se disemine y causar enfermedad. La infección por virus con cubierta requiere la unión del virión a una o más estructuras sobre la superficie de la célula (Flint y McKeating, 2000). La etapa inicial puede ser una unión inespecífica de baja afinidad (Barth y col., 2003). Posteriormente, el virus se une a los receptores primarios con alta afinidad y, después, en algunos casos, a los receptores secundarios o co-receptores (Bartosch y coI., 2003; Hsu y col., 2003; Roccasecca y coI., 2003; Cormier y coI., 2003; Pohlmann y coI., 2003; Zhang y coI., 2004). Las etapas de unión a la superficie celular se pueden asociar con una variedad de reorganizaciones estructurales sobre las proteínas de superficie del virión y cambios en las interacciones proteína-proteína entre las proteínas de la superficie viral (Jardetsky y Lamb, 2004; Modis y coI., 2004; Bressanelli y coI., 2004; Gibbons y col., 2004). Las últimas etapas pueden exponer el péptido de fusión, un dominio hidrófobo de una glicoproteína viral que es capaz de interaccionar con las membranas celulares (Flint y coI., 1999; Allison y coI., 2001). En algunos casos, la unión del virus a los receptores de la superficie celular desencadena la captación del virus por vías endocítica o vesicular similar (Garry y Dash, 2003; Jardetsky y Lamb, 2004). La exposición a condiciones más ácidas en las vesículas puede desencadenar cambios conformacionales en las proteínas de la superficie viral, incluidas las que exponen el péptido de fusión (Kuhn y coI., 2002; Lescar y col., 2001). Para la mayoría de los virus, la unión al receptor celular es, principalmente, la función de una proteína de la superficie viral, mientras que la fusión de las membranas celular y viral es, principalmente, la función de otra proteína de la superficie viral. Un ejemplo de un virus con proteínas distintas de unión al receptor y de fusión es el VIH. La proteína de unión al receptor del VIH es la glicoproteína de superficie (SU; gp120) y la proteína de fusión es la glicoproteína transmembrana (TM; gp41) (Kwong y coI., 1998; Gallaher y coI., 1987; 1989). La mayoría de los virus con proteínas de fusión de clase I en las que el péptido de fusión se localiza en, o cerca de, el extremo amino, por ejemplo retrovirus, ortomixovirus, paramixovirus, arenavirus y coronavirus, usan una proteína para la unión al receptor y otra para la fusión (Wilson y coI., 1981; Gallaher y col., 1996; 2001). Los alfavirus, que tienen una proteína de fusión de clase II con un péptido de fusión interno, también usan una proteína principalmente para la unión al receptor y otra para la fusión de las membranas viral y celular (Straus y Straus, 1994). La proteína de la cubierta (E) codificada por los miembros del género flavivirus de Flaviviridae, tiene un péptido de fusión interno pero sirve tanto la función de unión al receptor y de fusión (Allison y col., 2001).

El virus de la hepatitis C codifica dos glicoproteínas de cubierta, E1 (gp35) y E2 (gp70), ambas con dominios de anclaje transmembrana (Flint y McKeating, 2000). La E2 interacciona con varias proteínas de superficie celular (CD81, SR-BI y L-SIGN), lo que sugiere que es la proteína de union al receptor del VHC (McKeating, 2004). La función de la E1 está menos clara y puede actuar para acompañar a la E2 (Flint y coI., 1999; Garry y Dash, 2003). Los péptidos sintéticos correspondientes a la E2 del virus de la hepatitis C pueden bloquear la infección mediada por el virus de la hepatitis C. Las determinaciones estructurales de la E2 del virus de la hepatitis C permiten la identificación de varias características hasta ahora desconocidas de la E2 del virus de la hepatitis C para el desarrollo de fármacos y de vacunas.

La familia de Flavivirus incluye una variedad de patógenos humanos y animales importantes. El virus de la hepatitis C (VHC) es la principal causa viral de hepatitis crónica, cirrosis, insuficiencia hepática y carcinoma hepatocelular (Poynard y coI., 2003). Solo en Estados Unidos, aproximadamente 4 millones de personas están infectadas con el VHC. Esto es aproximadamente cuatro veces el número de infectados por el VIH. En EE.UU. cada año se producen 30-50.000 nuevas infecciones con el VHC y aproximadamente 15-20.000 personas mueren. Además, cabe esperar que estas cifras aumenten espectacularmente dado que una porción considerable de individuos infectados por el VIH muestran poca o ninguna respuesta a las únicas terapéuticas aprobadas actualmente (es decir, tratamiento con interferones y/o con ribavirina). La infección por VHC se transmite principalmente al compartir aguja los usuarios de drogas, aunque hay algún riesgo derivado de las punciones accidentales con agujas, productos hemoderivados antes de 1992, diálisis sanguínea crónica y contactos sexuales frecuentes. Los tratamientos actuales para el VHC usando ribavirina e interferón cuestan 8.000-20.000 $ al año y solo son parcialmente satisfactorios en aproximadamente la mitad de los pacientes tratados. En general, aproximadamente un 80% de los portadores del VHC sufren inflamación hepática crónica y cirrosis, de éstos el 25% desarrollará hepatopatía terminal o carcinoma hepatocelular (CHC) (Colombo, 2000). La enfermedad terminal por VHC es la indicación más frecuente para transplantes de hígado y esto cuesta de 250.000 $ a 300.000 $. Es urgente encontrar mejores fármacos para tratar la infección por VIH y una vacuna eficaz para prevenir la infección por el VHC.

SUMARIO DE LA INVENCIÓN

La presente invención se refiere a las composiciones tal como se han definido en las reivindicaciones, que comprenden péptidos o derivados peptídicos y usos de estas composiciones para tratar o prevenir la infección por el virus de la hepatitis C (VHC). La presente invención se hace posible por el descubrimiento de los inventores de que la glicoproteína E2 codificada por el VHC (y análogo(s) de virus relacionados) tiene dominios no descritos anteriormente que son importantes para la(s) interacción(es) y reorganización(es) de E2 con E2 y/o E1. Para interacciones de alta afinidad con receptores celulares o para interacciones proteína-proteína de E2 y E2-E1 que se producen antes de la fusión virión:membrana celular. Por tanto, la presente invención proporciona péptidos y procedimientos para el tratamiento y profilaxis de enfermedades inducidas por el VHC y virus relacionados.

La presente invención enseña que la glicoproteína E2 de la cubierta del VHC tiene varios dominios que pueden ser el objetivo de péptidos sintéticos para bloquear la infección y la patogenia. Las regiones de la E2 del VHC son importantes para la unión del VHC a sus receptores celulares de alta o baja afinidad, para reorganizaciones de E2 o para interacciones proteína-proteína de E2 que se producen antes de la fusión virión:membrana celular. La presente invención también instruye y proporciona péptidos sintéticos tal como se definen en las reivindicaciones que pueden inhibir la unión al receptor y otras etapas pre-fusión mediadas por la E2 del VHC.

Las características de la glicoproteína 2 de la cubierta del virus de la hepatitis C identificada en la presente memoria descriptiva proporcionan sorprendentes guías para el desarrollo de vacunas y/o fármacos para prevenir o tratar infecciones por el virus de la hepatitis

C. A diana para los péptidos es la E2, la proteína de unión al receptor del VHC. Aunque se ha desarrollado proteínas, tales como CD4 solubles, quimioquinas y anticuerpos, que bloquean la infección apuntando a las interacciones de unión al receptor del virión, no se han descrito mímicos peptídicos de las proteínas de la superficie viral que bloquean esta u otras etapas prefusión. Antes de la disponibilidad de datos estructurales de rayos X (Qureshi y coI., 1990; Wild, y coI., 1993; 1994), se desarrollaron varios potentes inhibidores del VIH-1 sobre la base del modelo de proteína de fusión de Gallaher HIV-1 TM (Gallaher y coI., 1989). Uno de estos inhibidores, en estudios clínicos se ha demostrado que el péptido FUZEON@ (también conocido como enfuvirtida, OP178; T20) reduce considerablemente la carga del VIH-1 en pacientes con SIDA (Lalezari, y coI., 2003). Los fármacos peptídicos, que son el objeto de la presenta invención, también se desarrollaron sin los beneficios de los datos estructurales...

1. Una composición farmacéutica que comprende uno o más péptidos seleccionados del grupo que consiste en un péptido que consiste en por la secuencia de una cualquiera de las SEC ID Nº 1 a SEC ID Nº: 42.

2. Una composición farmacéutica que comprende al menos un péptido seleccionado de uno o más de los siguientes: a) Un péptido que consiste en por la secuencia de aminoácidos de una cualquiera de las SEC ID Nº 1 a SEC ID Nº 42, en el que el resto N terminal es un grupo amino y el resto C-termina es un grupo carboxilo;

b) un péptido que consiste en por la secuencia de una cualquiera de las SEC ID Nº 1 a SEC ID Nº 42, en el que el resto grupo amino N-terminal es sustituido por un resto N-terminal seleccionado del grupo consiste en r: un grupo acetilo, un grupo hidrófobo, un grupo carbobenzoxilo, un grupo dansilo, un grupo tbutoxicarbonilo o un grupo transportador macromolecular, seleccionado de entre un conjugado lipídico, polietilenglicol o un hidrato de carbono y/o en los que el grupo carboxilo en C terminal está sustituido por un resto en C-terminal seleccionado del grupo consiste en por un grupo amido, un grupo hidrófobo, un grupo t-butiloxicarbonilo o un grupo macromolecular seleccionado de entre un conjugado lipídico, polietilenglicol o un hidrato de carbono;

c) un péptido consiste en por la secuencia de una cualquiera de las SEC ID Nº 1 a SEC ID Nº 42, en el que al menos uno de los enlaces que une residuos de aminoácidos adyacentes es un enlace no peptídico;

d) un péptido constituido por la secuencia de una cualquiera de SEC ID Nº a SEC ID Nº 42, a excepción de que al menos un residuo de aminoácido está en la configuración de D-isómero.

3. La composición de la reivindicación 2, en la que el resto terminal en el aminoácido N-terminal es un grupo acetilo, un grupo hidrófobo, un grupo carbobenzoxilo, un grupo dansilo, un grupo t-butiloxicarbonilo o un grupo transportador macromolecular, seleccionado de un conjugado lipídico, polietilenglicol o un hidrato de carbono; y/o el resto terminal en el aminoácido C-terminal es un grupo hidrófobo, un grupo t

butiloxicarbonilo o un grupo macromolecular seleccionado de un conjugado lipídico, polietilenglicol o un hidrato de carbono.

4. La composición de la reivindicación 2, en la que la composición incluye un péptido consiste en por la secuencia de una cualquiera de SEC ID Nº 1 a SEC ID Nº 42, en la que el resto terminal del aminoácido N-terminal es un grupo transportador macromolecular seleccionado de un conjugado lipídico, polietilenglicol o un hidrato de carbono; y/o el resto terminal en el aminoácido C-terminal es un grupo transportador macromolecular seleccionado de un conjugado lipídico, polietilenglicol o un hidrato de carbono.

5. La composición de la reivindicación 2, en la que al menos un enlace es un enlace no peptídico seleccionado del grupo consiste en por un enlace imido, un enlace éster, un enlace hidracina, un enlace semicarbazoide y un enlace azo.

6. La composición de la reivindicación 2, en la que al menos un aminoácido es un aminoácido D-isómero.

7. La composición de la reivindicación 2, en la que el resto terminal del grupo aminoácido N-terminal es un grupo amino y el resto terminal en el aminoácido C-terminal es un grupo carboxilo.

8. La composición de la reivindicación 1, en la que al menos un péptido se selecciona del grupo de péptidos que consistente en una secuencia seleccionada de las secuencias de SECIDNº 7a42.

9. Un medicamento para su uso en el tratamiento o prevención de la infección por virus de la hepatitis C en un paciente, en el que el medicamento comprende una composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8.

10. Uso de una composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 para la preparación de un medicamento para tratar o prevenir la infección por el virus de la hepatitis C en un paciente.

11. Un anticuerpo sustancialmente purificado usando como inmunógeno un péptido tal como se describe en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8.

12. Un medicamento para su uso en el tratamiento o la prevención de la infección por el

5 virus de la hepatitis C en un paciente, en el que el medicamento comprende uno o más péptidos tal como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 y/o un anticuerpo de acuerdo con la reivindicación 11 y que además comprende uno o más péptidos y/o uno o más anticuerpos dirigidos a la inhibición de la etapa de fusión con la membrana mediada por la proteína 1 de la cubierta del virus de la hepatitis C.

10

13. Un anticuerpo de acuerdo con la reivindicación 11 para usar en el tratamiento o la prevención de la infección por el virus de la hepatitis C en un paciente.

14. Uso de una composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de las

15 reivindicaciones 1 a 8 y/o un anticuerpo de la reivindicación 11 para la preparación de un medicamento para tratar o prevenir la infección por el virus de la hepatitis C en un paciente.

15. Un péptido constituido por la secuencia de una cualquiera de SEC ID Nº 1 a 6. 20

16. Un péptido constituido por la secuencia de una cualquiera de SEC ID Nº 7 a 42.