Procedimiento para el diagnóstico de una enfermedad reumática inflamatoria,

en el que la presencia o ausencia de un anticuerpo antirreceptor de angiotensina-II-subtipo 1 se determina en una muestra a partir de un paciente que va a ser diagnosticado y en el que, la presencia de un anticuerpo antirreceptor de angiotensina-II-subtipo 1 indica la enfermedad

Procedimiento para el diagnóstico de una enfermedad que implica un anticuerpo antirreceptor AT₁.

Aproximadamente 100 millones de personas en Europa padecen de algún tipo de enfermedades reumáticas degenerativas o inflamatorias que provocan que el impacto de las enfermedades reumáticas en las sociedades europeas sea abrumador para la sociedad. Las enfermedades de las articulaciones representan la mitad de todas las enfermedades crónicas en las personas de 65 años y de edades superiores.

La calidad de vida de aproximadamente 7,5% de la población europea se encuentra grave y permanentemente disminuida por el dolor y la afectación funcional causados por las enfermedades reumáticas. La inmovilidad y la expectativa reducida de vida constituyen las consecuencias más drásticas de estas enfermedades (que, en la actualidad), son incurables. Sólo en Europa, las enfermedades reumáticas suponen una carga económica de más de 200 billones de EUR por año. Verdaderamente, el impacto de las enfermedades reumáticas aumentará de forma importante la carga económica y social cuando la población europea envejezca. Recientemente, se ha desarrollado una nueva terapia que hace diana en las moléculas implicadas en la patogénesis de las enfermedades inflamatorias crónicas. A pesar de estos esfuerzos, todavía no existe la posibilidad de curar la mayoría de las enfermedades reumáticas. Una tarea terapéutica incluye la cronicidad de la inflamación, autoinmunidad, y degeneración del sistema esquelético muscular. Aunque las enfermedades reumáticas difieren en su inmunopatología, comparten mecanismos comunes de inicio y perpetuación. Además, existe un potencial traduccional considerable para comprender otras enfermedades que implican al sistema inmunitario, por ejemplo, enfermedades autoinmunes, alergia e infección. La diversidad de enfermedades reumáticas, la multiplicidad de tejidos implicados, es decir, hueso, cartílago, articulaciones, riñón, piel, vasos sanguíneos y el enfoque multidisciplinario que requiere entender la base molecular de estas enfermedades, hacen que su diagnóstico sea muy difícil.

El diagnóstico de la artritis y de otras enfermedades reumáticas es a menudo difícil, pues muchos síntomas son similares entre las distintas enfermedades. Para llevar a cabo un diagnóstico con exactitud, un médico puede requerir realizar una historia médica, llevar a cabo un examen físico, obtener ensayos de laboratorio, rayos x y otros ensayos relacionados con la imagen. Las enfermedades reumáticas son, por ejemplo, la artritis reumatoidea, la fibromialgia, lupus eritematoso, polimialgia reumática, esclerosis sistémica progresiva, síndrome de Sjögren, lupus sistémico eritematoso e inflamación de las articulaciones.

El American College of Rheumatology ha definido (1987) diversos criterios para el diagnóstico de, por ejemplo, la artritis reumatoidea. La rigidez matinal de más de una hora, la artritis y la hinchazón tisular moderado de más de 3 de 14 articulaciones/grupos de articulaciones, la artritis de las articulaciones de la mano, la artritis simétrica, módulos subcutáneos en marcas de guía específicas, factor reumatoide a un nivel por encima del 95% y cambios radiológicos que sugieren erosión articular. Por lo menos, cuatro criterios tienen que cumplirse para establecer el diagnóstico, aunque muchos pacientes se tratan a pesar de no cumplir con los criterios. Cuando se sospecha clínicamente la artritis reumatoide, son necesarios estudios inmunológicos, tales como el factor reumatoideo (RF, un anticuerpo específico). Un RF negativo no descarta la artritis reumatoidea. Recientemente, se ha desarrollado un nuevo ensayo serológico, el cual prueba la presencia de los anticuerpos denominados antiproteína citrulinada (ACP). Como RF, este ensayo puede detectar aproximadamente el 80% de todos los pacientes RA, pero es raramente positivo en los pacientes no RA. Asimismo, otros varios ensayos sanguíneos se llevan a cabo para detectar otras causas de artritis, tales como el lupus eritematoso. Dichos ensayos incluyen la tasa de sedimentación eritrocítica (ESR), proteína creactiva, contaje sanguíneo total, función renal, enzimas hepáticas y ensayos inmunológicos, por ejemplo, anticuerpos antinucleares/ANA, se llevan a cabo en este estadio.

Tal como se ha expuesto para la artritis reumatoide como enfermedad entre (las pertenecientes) a la familia de las reumáticas inflamatorias, el diagnóstico en el campo de estas enfermedades es difícil. Por tanto, son necesarias herramientas diagnósticas fiables y seguras.

El documento WO 00/39154 A2 se refiere a péptidos del receptor AT₁ y su utilización para eliminar específicamente la unión, fisiológicamente celular activa, de los anticuerpos patológicos, en el tratamiento de la preeclampsia, así como en el diagnóstico de ésta.

Se ha mostrado que la angiotensina II está implicada en la inflamación sinovial humana de los pacientes artríticos, y que el receptor AT₁ es responsable de mediar el efecto (Walsh et al., 1994, AT₁ receptor characteristics of angiotensin analogue binding in human synovium, Br. J. Pharmacol. 112: 435-442). Además, el candesartán -un agente bloqueante del receptor aT₁- puede utilizarse para el tratamiento y profilaxis de la artritis inducida por el colágeno en el modelo murino (Dalbeth et al., 2005, The non-thiol angiotensin-converting enzyme inhibitor quinapril suppresses inflammatory arthritis, Rheumatology 44:24-31).

Sumario de la invención

La presente invención se refiere a un procedimiento para el diagnóstico de una enfermedad reumática inflamatoria, en el que, la presencia o ausencia de un anticuerpo antirreceptor AT₁ se determina en una muestra de un paciente que vaya a ser diagnosticado y en el que, la presencia de un anticuerpo antirreceptor AT₁ indica la enfermedad.

En el contexto de la presente invención se ha descubierto que más de 1/3 de pacientes (35%) con enfermedades reumáticas dan positivo para la presencia de un anticuerpo antiAT₁, mientras que en pacientes sin enfermedades reumáticas, sólo el 8,3% poseen un anticuerpo antiAT₁ detectable.

La determinación se llevó a cabo como un ensayo ciego. Todos los pacientes con enfermedades reumáticas mostraban complicaciones graves y fueron difíciles de tratar con los procedimientos estándar. Existió una correlación clara entre la presencia del anticuerpo antiAT₁ y las complicaciones de la enfermedad.

En una forma de realización preferida de la invención, la determinación de la presencia o ausencia de un anticuerpo antirreceptor AT₁ se llevó a cabo detectando uno o varios de los anticuerpos seleccionados de entre el grupo de anticuerpos IgA, IgG e IgM, y más particularmente de los anticuerpos IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4.

En una forma de realización de la invención, la invención se refiere a un inmunoensayo. Existen numerosas formas de llevar a cabo un inmunoensayo en una forma de realización preferida de la invención, siendo los inmunoensayos uno de la luciferasa y/o un (ensayo) ELISA.

La invención se refiere además a la utilización de un péptido receptor AT₁ para el diagnóstico de una enfermedad reumática inflamatoria.

La invención se refiere a un equipo de investigación y/o diagnóstico para el diagnóstico de una enfermedad reumática inflamatoria, en el que el equipo comprende un péptido receptor AT₁.

Descripción detallada de la invención

En el contexto de la presente invención se ha descubierto que ciertas enfermedades pueden diagnosticarse detectando la presencia o ausencia de un anticuerpo antirreceptor AT₁ en una muestra de paciente que vaya a ser diagnosticado. De hecho, se descubrió que el 35% de los pacientes que muestran una enfermedad reumática son positivos para el anticuerpo antiAT₁. El mismo anticuerpo antiAT₁ puede detectarse sólo en un 6,2% de los casos en pacientes sin enfermedad reumática.

Así, la presente invención se refiere a un procedimiento para diagnosticar una enfermedad, en el que la presencia o ausencia de un anticuerpo antirreceptor AT₁ se determina en una muestra de un paciente que vaya a ser diagnosticado.

Se ha podido demostrar que existe una relación entre la presencia de dicho anticuerpo antirreceptor AT₁ y la probabilidad de enfermedad reumática inflamatoria. Se ha demostrado que la presencia del anticuerpo antirreceptor AT₁ da lugar a la enfermedad...

1. Procedimiento para el diagnóstico de una enfermedad reumática inflamatoria, en el que la presencia o ausencia de un anticuerpo antirreceptor de angiotensina-II-subtipo 1 se determina en una muestra a partir de un paciente que va a ser diagnosticado y en el que, la presencia de un anticuerpo antirreceptor de angiotensina-II-subtipo 1 indica la enfermedad.

2. Procedimiento según la reivindicación 1, en el que la enfermedad reumática inflamatoria se selecciona de entre el grupo de artritis reumatoide, fibromialgia, lupus eritematoso, polimialgia reumática, esclerosis sistémica progresiva, síndrome de Sjögren, lupus sistémico eritematoso e inflamación de las articulaciones.

3. Procedimiento según las reivindicaciones 1 y 2, en el que la determinación de la presencia o ausencia de un anticuerpo antirreceptor de angiotensina-II-subtipo 1 se lleva a cabo detectando uno o más de los anticuerpos seleccionados de entre el grupo de anticuerpo IgA, anticuerpo IgG y anticuerpo IgM.

4. Procedimiento según la reivindicación 3, en el que el anticuerpo IgG es seleccionado de entre el grupo de IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4.

5. Procedimiento según las reivindicaciones 1 a 4, en el que el inmunoensayo es seleccionado de entre el grupo de inmunoprecipitación, inmunoensayo enzimático (EIA), radioinmunoensayo (RIA) o inmunoensayo de fluorescencia, un ensayo quimioluminiscente, un ensayo de aglutinación, un ensayo nefelométrico, un ensayo turbidimétrico, una Transferencia Western, un inmunoensayo competitivo, un inmunoensayo no competitivo, un inmunoensayo homogéneo, un inmunoensayo heterogéneo, un bioensayo y un ensayo informativo.

6. Procedimiento según la reivindicación 5, en el que el ensayo informativo es un ensayo de luciferasa.

7. Procedimiento según la reivindicación 5 y 6, en el que el inmunoensayo es un ELISA.

8. Utilización de un péptido de receptor angiotensina-II-subtipo-1 para el diagnóstico in vitro de una enfermedad reumática inflamatoria.

9. Utilización según la reivindicación 8, en la que la enfermedad reumática inflamatoria se selecciona de entre el grupo de artritis reumatoide, fibromialgia, lupus eritematoso, polimialgia reumática, esclerosis sistémica progresiva, síndrome de Sjögren, lupus sistémico etitematoso e inflamación de las articulaciones.

10. Utilización de un kit de diagnóstico para el diagnóstico in vitro de una enfermedad reumática inflamatoria, en la que el kit comprende un péptido receptor de angiotensina-II-subtipo-1.

11. Utilización de un kit de diagnóstico según la reivindicación 10, en el que la enfermedad reumática inflamatoria se selecciona de entre el grupo de artritis reumatoide, fibromialgia, lupus eritematoso, polimialgia reumática, esclerosis sistémica progresiva, síndrome de Sjögren, lupus sistémico etitematoso e inflamación de las articulaciones.