DETECCION, PREVENCION Y TRATAMIENTO DE DERMATITIS DIGITAL PAPILOMATOSA.
LA PRESENTE INVENCION SE REFIERE AL USO DE BACTERIAS O BACTERINAS SERPENS SPP.
EN COMPOSICIONES, TALES COMO VACUNAS, Y METODOS PARA LA DETECCION, PREVENCION Y/O TRATAMIENTO DE LA DERMATITIS DIGITAL PAPILLOMATOSA EN RUMIANTES. LA PRESENTE INVENCION TAMBIEN PROPORCIONA SERPENS SPP. CEPA HBL-112 BIOLOGICAMENTE PURA, Y BACTERINA DE SERPENS SPP. CEPA HBL-112 BIOLOGICAMENTE PURA
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US97/12861.
Solicitante: WALLIS, DALE
WALLIS, JAMES L.
Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.
Dirección: 1621 COLLEGE STREET,WOODLAND, CA 95696.
Inventor/es: WALLIS,DALE, WALLIS,JAMES L.
Fecha de Publicación: .
Fecha Concesión Europea: 23 de Septiembre de 2009.
Clasificación Internacional de Patentes:
- C07K14/195 QUIMICA; METALURGIA. › C07 QUIMICA ORGANICA. › C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02; proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › C07K 14/00 Péptidos con más de 20 aminoácidos; Gastrinas; Somatostatinas; Melanotropinas; Sus derivados. › de origen bacteriano.
- C12R1/01 C […] › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12R SISTEMA DE INDEXACION ASOCIADO A LAS SUBCLASES C12C - C12Q, RELATIVO A LOS MICROORGANISMOS. › C12R 1/00 Microorganismos. › Bacterias o actinomicetos.
- G01N33/569D
Clasificación PCT:
- A61K51/00 NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA. › A61 CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE. › A61K PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO (dispositivos o métodos especialmente concebidos para conferir a los productos farmacéuticos una forma física o de administración particular A61J 3/00; aspectos químicos o utilización de substancias químicas para, la desodorización del aire, la desinfección o la esterilización, vendas, apósitos, almohadillas absorbentes o de los artículos para su realización A61L; composiciones a base de jabón C11D). › Preparaciones que contienen sustancias radioactivas utilizadas para la terapia o para el examen in vivo.
- C12N1/00 C12 […] › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › Microorganismos, p.ej. protozoos; Composiciones que los contienen (preparaciones de uso médico que contienen material de protozoos, bacterias o virus A61K 35/66, de algas A61K 36/02, de hongos A61K 36/06; preparación de composiciones de uso médico que contienen antígenos o anticuerpos bacterianos, p. ej. vacunas bacterianas, A61K 39/00 ); Procesos de cultivo o conservación de microorganismos, o de composiciones que los contienen; Procesos de preparación o aislamiento de una composición que contiene un microorganismo; Sus medios de cultivo.
- C12N1/12 C12N […] › C12N 1/00 Microorganismos, p.ej. protozoos; Composiciones que los contienen (preparaciones de uso médico que contienen material de protozoos, bacterias o virus A61K 35/66, de algas A61K 36/02, de hongos A61K 36/06; preparación de composiciones de uso médico que contienen antígenos o anticuerpos bacterianos, p. ej. vacunas bacterianas, A61K 39/00 ); Procesos de cultivo o conservación de microorganismos, o de composiciones que los contienen; Procesos de preparación o aislamiento de una composición que contiene un microorganismo; Sus medios de cultivo. › Algas unicelulares; Sus medios de cultivo (como novedades vegetales A01H 13/00).
- C12N1/20 C12N 1/00 […] › Bacterias; Sus medios de cultivo.
- C12N1/36 C12N 1/00 […] › Adaptación o atenuación de células.
- G01N33/53 FISICA. › G01 METROLOGIA; ENSAYOS. › G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › Ensayos inmunológicos; Ensayos en los que interviene la formación de uniones bioespecíficas; Materiales a este efecto.
- G01N33/554 G01N 33/00 […] › siendo el soporte una célula o un fragmento de célula biológica, p. ej. células de bacterias, de levadura.
- G01N33/569 G01N 33/00 […] › para microorganismos, p. ej. protozoarios, bacterias, virus.
Clasificación antigua:
- A61K51/00 A61K […] › Preparaciones que contienen sustancias radioactivas utilizadas para la terapia o para el examen in vivo.
- C12N1/00 C12N […] › Microorganismos, p.ej. protozoos; Composiciones que los contienen (preparaciones de uso médico que contienen material de protozoos, bacterias o virus A61K 35/66, de algas A61K 36/02, de hongos A61K 36/06; preparación de composiciones de uso médico que contienen antígenos o anticuerpos bacterianos, p. ej. vacunas bacterianas, A61K 39/00 ); Procesos de cultivo o conservación de microorganismos, o de composiciones que los contienen; Procesos de preparación o aislamiento de una composición que contiene un microorganismo; Sus medios de cultivo.
- C12N1/12 C12N 1/00 […] › Algas unicelulares; Sus medios de cultivo (como novedades vegetales A01H 13/00).
- C12N1/20 C12N 1/00 […] › Bacterias; Sus medios de cultivo.
- C12N1/36 C12N 1/00 […] › Adaptación o atenuación de células.
- G01N33/53 G01N 33/00 […] › Ensayos inmunológicos; Ensayos en los que interviene la formación de uniones bioespecíficas; Materiales a este efecto.
- G01N33/554 G01N 33/00 […] › siendo el soporte una célula o un fragmento de célula biológica, p. ej. células de bacterias, de levadura.
- G01N33/569 G01N 33/00 […] › para microorganismos, p. ej. protozoarios, bacterias, virus.
Fragmento de la descripción:
Detección, prevención y tratamiento de dermatitis digital papilomatosa.
La presente solicitud de patente reivindica prioridad, de acuerdo con 35 USC 119(e)(1), de la solicitud de patente provisional de EE.UU. 60/022.915, presentada el 1 de agosto de 1996.
Campo de la invención
La presente invención se refiere a métodos y composiciones útiles en la detección, prevención y/o tratamiento de la dermatitis digital papilomatosa en rumiantes y a una nueva cepa de bacterias Serpens spp. útil para tal fin.
Fundamento de la invención
La dermatitis digital papilomatosa (abreviadamente PDD por la expresión inglesa Papillomatous Digital Dermatitis) es una enfermedad crónica infecciosa y aparentemente contagiosa de las patas y/o las partes inferiores de las piernas de ganado. La enfermedad es conocida por varios nombres comunes y científicos que incluyen dermatitis digital, papilomatosis interdigital, papilomatosis digital, dermatitis verrugosa, verrugas de las patas, verrugas pilosas de las patas, verrugas pilosas de los talones, talón frambuesa, enfermedad de la pata de fresa y podredumbre de la pata de fresa. Se ha identificado como una de las enfermedades más significativas con las que tiene que enfrentarse hoy día la industria láctea. La enfermedad da como resultado cojera lo cual conduce a reducciones económicamente significativas en la producción de leche y disminución consiguiente de la salud animal, tal como pérdida de peso y de fertilidad. Se cree que el agente causante puede ser llevado a una granja láctea por introducción de ganado nuevo o transmisión fortuita desde residuos de pezuñas, personal probador de lecherías, botas enlodadas de veterinarios, etc. Actualmente en las granjas lechera se producen pérdidas debidas a esta enfermedad, habiéndose estimado el coste por producción de leche perdida, pérdidas reproductivas y aumento de la selección de ganado en valores medios de al menos de 100 dólares por día.
Hasta la fecha, solo han demostrado ser prometedores dos métodos de control, a saber: el uso de antibióticos por vía tópica (limpieza, curado con raspado, y vendado de cada pata) o por vía parenteral (problemática por razones relacionadas con la retirada de la leche), y el uso de líquidos bacteriocidas para baños de las patas (antibióticos, formaldehído, yodo, etc.). Aunque muchas lesiones pueden responder bien a los antibióticos o a los líquidos para baños de las patas que contienen compuestos antibacterianos, se sabe que ocurren recidivas y hay pruebas de desarrollo de resistencia a los antibióticos. Estos métodos son muy laboriosos, propensos a errores humanos, costosos (los antibióticos durante 30 días para los líquidos de baños de las patas cuestan 2.500 dólares para una granja láctea de 400 vacas), están sometidos a restricciones gubernamentales, y no confieren ni limpieza ambiental ni protección duradera frente a las recidivas.
En vista del daño económico significativo causado por la PDD, es altamente deseable un modo eficaz de detectar y tratar animales infectados con la enfermedad, así como medios de protegerlos contra una infección futura.
Sumario de la invención
La presente invención se refiere a la detección, prevención y/o tratamiento de la dermatitis digital papilomatosa en rumiantes.
La presente invención comprende además un método de determinar la presencia de anticuerpos contra la PDD en una muestra de suero de rumiantes que comprende poner en contacto la muestra con la cepa de Serpens spp. HBL-112 y detectar en la muestra anticuerpos que se unan al antígeno. La presente invención también puede ser usada para determinar la presencia de antígeno de la PDD o anticuerpos anti-Serpens spp.
La presente invención proporciona la cepa de Serpens spp. HBL-112 biológicamente pura. La bacterina de la cepa de Serpens spp. HBL-112, Depósito Nº 1 y la bacterina de la cepa de Serpens spp. HBL-112, Depósito Nº 2 han sido depositadas en Hygieia Biological Laboratories, Post Office Box 8300, Woodland, California, 95776. La cepa de Serpens spp. HBL-112 es un miembro del género Serpens spp. y tiene las características biológicas y morfológicas definidas más adelante.
La bacteria de la cepa de HBL-112 se depositó en The American Type Culture Collection el día 25 de Julio de 1997 bajo la designación cepa HBL-112/1
y se le dio el número de acceso ATCC-202.005. Las bacterias de la cepa HBL-112 y las bacterias de la cepa HBL-112/1 son idénticas. En el texto y los Ejemplos que siguen sólo se usará la designación cepa HBL-112
para identificar la bacteria Serpens ssp. de la invención.
La presente invención comprende el uso de la cepa para la fabricación de un medicamento para prevenir y/o tratar la dermatitis digital papilomatosa en rumiantes.
Breve descripción de los dibujos
La presente invención se ilustra por los siguientes dibujos, en los cuales:
La Figura 1 es un gráfico que muestra la reducción clínica de la superficie total de las verrugas de la patas vistas en ganado productor de leche con verrugas en las patas preexistentes en respuesta a la vacunación usando bacterina de la cepa de Serpens spp. HBL-112, de acuerdo con la presente invención en comparación con un animal de control. La superficie de las verrugas se da en centímetros cuadrados, calculados a partir de medidas en milímetros realizadas en dos dimensiones de las lesiones de las patas del ganado afectado clínicamente. El tiempo se muestra en días desde el enrolamiento en la prueba. El tiempo total transcurrido fue 76 días.
La Figura 2 es un diagrama de barras de interacciones de las medidas de la superficie de las verrugas iniciales y post-vacunación (en el día 49) en animales vacunados y animales de control, con el análisis post hoc de Games-Howell asociado que demuestra el significado del efecto de la vacunación.
La Figura 3 es un diagrama de barras de interacciones y un análisis de Games-Howell para los títulos serológicos en una muestra aleatoria de aproximadamente la mitad de los animales incluidos en la prueba por medidas iniciales y post-vacunación (en el día 49) en animales vacunados y de control.
La Figura 4a es un gráfico que muestra una curva estándar típica de una muestra de suero bovino positiva titulada en una captura ELISA.
La Figura 4b es una gráfica que muestra una curva estándar de un ensayo ELISA competitivo que usa anticuerpo constante y antígeno titulado.
La Figura 5 es una fotomicrografía que ilustra la forma espiral inducible de la cepa de Serpens spp. HBL-112.
La Figura 6 es una fotomicrografía del mismo cultivo puro de la cepa de Serpens spp. HBL-112 que el de la Figura 5 que muestra bacilos grandes, bacilos pequeños y cuerpos esféricos típicos del género Serpens.
La Figura 7 es una fotomicrografía del mismo cultivo puro de la cepa de Serpens spp. HBL-112 que la Figura 5 que muestra flagelos asociados con la cepa de Serpens spp. HBL-112.
La Figura 8 es un gráfico que muestra el uso de la vacuna de la presente invención para la prevención de verrugas pilosas en las patas de los animales; y
La Figura 9 muestra la respuesta serológica de la vacuna de la presente invención en vaquillas sanas.
Descripción detallada de la invención
Aislamiento y purificación de la cepa de Serpens spp. HBL-112
Antes de la presente invención, la única especie conocida del género Serpens era Serpens flexibilis que se aisló de los centímetros superiores del sedimento (lodo) encontrado en estanques de agua dulce eutróficos. S. flexibilis son células en forma de bacilos, de 0,3-0,4 µm de ancho por 8-12 µm de largo. Se presentan solas o en parejas. Las células en la fase de crecimiento estacionaria son mayores y frecuentemente poseen vesículas o protuberancias esféricas. S. flexibilis tiene un movimiento único flexible. Poseen penachos bipolares de 4-10 flagelos y también unos cuantos flagelos laterales. Ninguna de la bibliografía publicada sobre este microorganismo indica proclividad a patogénesis, ni incluso asociación con animales.
La cepa de Serpens spp. HBL-112 se aisló por los autores de la presente invención de tejido de verrugas de ganado que sufría POD. El tejido de las verrugas se picó y filtró en medios líquidos, así como por inoculación directa en pocillos recortados en placas de agar...
Reivindicaciones:
1. La cepa de Serpens spp. HBL-112 ATCC 202.005 biológicamente pura.
2. Uso de la cepa de la reivindicación 1 para la fabricación de un medicamento para impedir y/o tratar la dermatitis digital papilomatosa (PPD) en rumiantes.
3. El uso de la reivindicación 2, en donde dicho rumiante tiene los síntomas de la dermatitis digital papilomatosa.
4. El uso de la reivindicación 2, en donde dicho rumiante no tiene los síntomas de la dermatitis digital papilomatosa.
5. Un método para determinar la presencia de anticuerpos contra la PDD en una muestra de suero de rumiantes que comprende poner en contacto dicha muestra de suero de rumiante con la cepa de la reivindicación 1 y detectar anticuerpos en dicha muestra que se unen a dicha cepa.
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