Composición, que comprende:

i) un conjugado que comprende

(a) un primera zona que comprende la proteína P21 que presenta la secuencia de aminoácidos tal como se define en la SEC.

ID. nº 1, o un homólogo de la misma que presenta por lo menos el 60% de identidad de secuencia con la SEC. ID. nº 1 y que tiene la función de la proteína natural P21; y

(b) una segunda zona que comprende homeodominio de antennapedia que presenta la secuencia de aminoácidos definida en la SEC. ID. nº 3; y

ii) un fármaco quimioterapéutico

Conjugado que comprende la proteína P21 para el tratamiento del cáncer.

Campo de la invención

La presente invención se refiere a conjugados de la proteína P21 en composiciones que comprenden un fármaco quimioterapéutico. Estas composiciones resultan particularmente útiles en el tratamiento del cáncer.

Antecedentes a la invención

El cáncer es una de las principales causas de mortalidad humana y ha sido tema de intensa investigación. Es bien conocido que casi todos los tumores malignos proceden de la transformación de una sola célula en estado inmortal donde la célula ha perdido la capacidad para controlar la proliferación.

La proliferación incontrolada procede de una disfunción en el control del ciclo celular que, en los eucariotas, está controlada en gran medida por las ciclinas y las cinasas dependientes de la ciclina (CDK). Un mecanismo complejo de control del estado de fosforilación de las ciclinas y las CDK controla si los complejos cliclina/CDK son capaces de conducir la célula a la fase siguiente del ciclo. La importancia del estado de fosforilación de los complejos ciclina/CDK está reflejada por el hecho de que un gran número de cánceres conlleva mutaciones en las proteínas P53 y P21 supresoras del tumor, que son componentes clave en el control de la fosforilación de cliclina/CDK y en la formación del complejo. En particular, P21 bloquea la formación del complejo cycD/cdk4 y origina la interrupción de G1. Los estudios que detallan la proteína P21 y su función biológica pueden encontrarse en O'Reilly MA., Antioxid. Redox Signal. Ene.-Feb. 2005; 7(1-2):108-18 y Liu G & Lozano G., Cancer Cell, Feb. 2005; 7(2):113-4.

El tratamiento del cáncer conlleva normalmente una combinación de procedimientos quirúrgicos, radioterapia y quimioterapia (incluyendo inmunoterapia). A pesar de los significativos avances en las terapias del cáncer en los últimos años, continúa existiendo la necesidad constante de desarrollar terapias mejoradas. En el mejor de los casos, una terapia para el cáncer se dirigirá específicamente y destruirá solamente las células cancerosas.

Un problema adicional que necesita ser estudiado es la resistencia al fármaco resultante de la quimioterapia. La administración continuada de un fármaco citotóxico puede producir un tumor, que era inicialmente sensible al fármaco, para volverse cada vez más resistente de modo que el fármaco pierde su eficacia terapéutica. Por consiguiente, se necesitan también procedimientos para mejorar la sensibilidad de las células cancerosas a los fármacos.

El documento US 2003133971 de JR. Smith et al. describe un liposoma que comprende la proteína SDI-1 o un ácido nucleico que la codifica, para inhibir la proliferación celular, por ejemplo el cáncer (por ejemplo párrafo 185).

El documento de Bonfanti M. et al. (1997) Cancer Research vol. 57 págs. 1442-1446 describe la inhibición del crecimiento de la célula tumoral por las proteínas de fusión constituidas por una secuencia peptídica de la proteína p21 y de una secuencia de transposición procedente del homeodominio de Antennapedia.

El documento US 2002068706 de Gyuris J. et al. describe proteínas de fusión constituidas por un inhibidor de CDK y un factor de transposición, y su utilización en el tratamiento anticanceroso. De manera notable, reivindica la fusión de p21 a una secuencia que favorece la transcitosis (reivindicación 26), en la que la proteína que favorece la transcitosis puede proceder de la proteína de Antennapedia (reivindicación 43).

La patente US nº 6.521.602 describe ácidos nucleicos que expresan el híbrido CDKI segregable e interiorizable (es decir una fusión de un inhibidor CDK de CIP, un inhibidor CDK de INK4 y un dominio de transducción de la proteína) y describe la acción sinérgica con la proteína E4 adenovírica en la inducción de la apoptosis de células neoplásicas.

Sumario de la invención

La presente invención se basa en el descubrimiento de que se observa un efecto sinérgico cuando la proteína P21 se administra junto con por lo menos un fármaco quimioterapéutico.

Según un primer aspecto, la invención proporciona una composición que comprende:

En una forma de realización preferida, el conjugado está en forma de una proteína de fusión.

En un aspecto adicional, dicha composición está destinada a su utilización como medicamento.

Todavía en un aspecto adicional, la invención proporciona la utilización de dicha composición para la preparación de un medicamento destinado al tratamiento del cáncer.

Descripción de los dibujos

La presente invención se describe haciendo referencia a los siguientes dibujos, en los que:

La Figura 1 ilustra la citotoxicidad de la proteína de fusión antennapedia/P21 administrada a la estirpe celular SKOV-3 del carcinoma de ovario y a la estirpe SAOS-2 del osteosarcoma, que se cultivaron en placas ELISA de 96 pocillos en condiciones que se asemejan a la situación en el cuerpo humano;

la Figura 2 ilustra la citotoxicidad de la proteína de fusión antennapedia/P21 y su efecto sinérgico con cisplatino y las células SKOV-3;

la Figura 3 ilustra la citotoxicidad de la proteína de fusión antennapedia/P21 en combinación con cisplatino y taxol, en células SKOV-3, indicando que la fusión antennapedia/P21, cisplatino y taxol actúan sinérgicamente cuando se utilizan en combinación;

la Figura 4 ilustra la depuración en la sangre de la proteína de antennapedia purificada y radiomarcada (4A) y la proteína de fusión antennapedia-P21 (4B) en ratones sin tumor;

la Figura 5 ilustra las relaciones de órgano a sangre y la acumulación de proteína en varios órganos, para la proteína antennapedia (5A) y la proteína de fusión antennapedia-P21 (5B);

la Figura 6 ilustra la reducción en el crecimiento de tumores utilizando la proteína de fusión antennapedia/P21;

la Figura 7 es una curva de supervivencia Kaplan-Meyer que indica que la supervivencia de ratones es mayor cuando reciben la proteína de fusión antennapedia/P21 a su mayor concentración;

la Figura 8 demuestra un efecto sinérgico in vivo cuando se utiliza la proteína de fusión antennapedia/P21, taxol y cisplatino;

la Figura 9 ilustra la curva de supervivencia Kaplan-Meyer para los ratones que reciben la proteína de fusión antennapedia/P21 y quimioterapia, es evidente que la mejor ganancia de supervivencia la demuestran los animales que reciben tanto la proteína de fusión como quimioterapia complementaria;

la Figura 10 ilustra las curvas de supervivencia Kaplan-Meyer para los ratones que reciben la fusión antennapedia/P21 y los animales que reciben además cisplatino y taxol; y

la Figura 11 presenta las curvas de supervivencia Kaplan-Meyer para los ratones que reciben la fusión de antennapedia/P21 y un producto quimio-terapéutico adicional.

Descripción detallada de la invención

La invención utiliza un conjugado de la proteína P21 como agente terapéutico en una composición que comprende un fármaco terapéutico. Cuando se utiliza en combinación con un fármaco quimioterapéutico, se observa una sinergia sorprendente. La proteína P21 está unida a un factor de transposición, para permitir que la proteína P21 se introduzca en una célula diana.

Antes del presente descubrimiento, no se apreciaba que P21 podía utilizarse extensamente en la terapia del cáncer. La mayoría de los cánceres proceden de mutaciones en el gen P53, lo que es por consiguiente obvio, y lo más favorecido, el objetivo cuando se diseñan productos terapéuticos para el cáncer. La proteína P21, que funciona además abajo...

1. Composición, que comprende:

2. Composición según la reivindicación 1, en la que el conjugado está en forma de una proteína de fusión.

3. Composición según la reivindicación 1 ó 2 para su utilización como medicamento.

4. Utilización de una composición según la reivindicación 1 ó 2 para la preparación de un medicamento destinado al tratamiento del cáncer.