PROCEDIMIENTO DE SELECCION DE AGENTES BIO-ACTIVOS POR DETECCION DE UNA VARIACION INDUCIDA DE LA CONCENTRACION INTRACELULAR DE AMPC DE UNA CELULA VIVIENTE SENSIBLE.
Procedimiento de selección de agentes, denominados agentes a probar,
susceptibles de ser biológicamente activos frente a un sistema celular viviente induciendo o inhibiendo una síntesis intracelular de AMPc cuando están en presencia de al menos una célula sensible de un sistema celular viviente, en el que: #- se prepara un sistema celular con excepción de un embrión humano, un cuerpo humano, un elemento no aislado del cuerpo humano o una célula de origen embrionario humano, que comprende al menos una célula viviente sensible que expresa al menos una proteína recombinada multimérica específica de la vía de transducción AMPc/PKA, #* estando la citada proteína recombinada, en ausencia de síntesis inducida de AMPc, en un primer estado, denominado estado complejo, en el que forma un complejo, denominado complejo RC, que comprende al menos una sub-unidad reguladora recombinada de una PKA, denominada unidad R y que incluye al menos un sitio de enlace de la AMPc, y al menos una sub-unidad catalítica de una PKA, denominada unidad C, #* estando la citada proteína recombinada, en presencia de síntesis inducida de AMPc, en un segundo estado, denominado estado disociado, en el que las unidades R y C están disociadas, y en el que al menos una unidad R fija la AMPc, #- se pone el citado sistema celular en presencia de una cantidad de al menos un agente a probar, #- se detecta el estado, complejo o disociado, de la citada proteína recombinada, caracterizado porque: #- al menos una de las unidades R o C, denominada unidad de translocación, presenta una secuencia proteica que comprende una secuencia de direccionamiento membranar que presenta un motivo de modificación post-traduccional CAAX funcional; estando la posición de la citada secuencia de direccionamiento membranar en la citada secuencia proteica adaptada para conservar la idoneidad de la proteína recombinada para formar en la membrana un complejo RC en ausencia de síntesis inducida de AMPc, y para disociarse en presencia de síntesis inducida de AMPc; #- al menos otra unidad R o C, denominada unidad marcada, distinta de la unidad de translocación, presenta un grupo, denominado grupo de detección, adaptado para: #* conservar la idoneidad de la proteína recombinada para formar un complejo RC en ausencia de síntesis inducida de AMPc, y para disociarse en presencia de síntesis inducida de AMPc, y #* permitir la detección del estado de la proteína con la ayuda de una señal de detección que, en la membrana, es diferente según la ausencia o la presencia de síntesis inducida de AMPc.
Tipo: Resumen de patente/invención.
Solicitante: NOVALEADS.
Nacionalidad solicitante: Francia.
Dirección: CEEI THEOGONE, 10, AVENUE DE L'EUROPE,31520 RAMONVILLE SAINT AGNE.
Inventor/es: FURGER,CHRISTOPHE, LORENZO,CORINNE.
Fecha de Publicación: .
Fecha Concesión Europea: 26 de Noviembre de 2008.
Clasificación PCT:
- C12N15/62 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Secuencias de ADN que codifican proteínas de fusión.
- C12N9/00 C12N […] › Enzimas, p. ej. ligasas (6.); Proenzimas; Composiciones que las contienen (preparaciones para la limpieza de los dientes que contienen enzimas A61K 8/66, A61Q 11/00; preparaciones de uso médico que contienen enzimas A61K 38/43; composiciones detergentes que contienen enzimas C11D ); Procesos para preparar, activar, inhibir, separar o purificar enzimas.
- C12N9/12 C12N […] › C12N 9/00 Enzimas, p. ej. ligasas (6.); Proenzimas; Composiciones que las contienen (preparaciones para la limpieza de los dientes que contienen enzimas A61K 8/66, A61Q 11/00; preparaciones de uso médico que contienen enzimas A61K 38/43; composiciones detergentes que contienen enzimas C11D ); Procesos para preparar, activar, inhibir, separar o purificar enzimas. › transfieren grupos que contienen fósforo, p. ej. Quinasas (2.7).
- C12Q1/48 C12 […] › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que interviene una transferasa.
- G01N33/50 FISICA. › G01 METROLOGIA; ENSAYOS. › G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › Análisis químico de material biológico, p. ej. de sangre o de orina; Ensayos mediante métodos en los que interviene la formación de uniones bioespecíficas con grupos coordinadores; Ensayos inmunológicos (procedimientos de medida o ensayos diferentes de los procedimientos inmunológicos en los que intervienen enzimas o microorganismos, composiciones o papeles reactivos a este efecto, procedimientos para preparar estas composiciones, procedimientos de control sensibles a las condiciones del medio en los procedimientos microbiológicos o enzimáticos C12Q).
- G01N33/542 G01N 33/00 […] › con inhibición estérica o modificación de la señal, p. ej. extinción de fluorescencia.
- G01N33/68 G01N 33/00 […] › en los que intervienen proteínas, péptidos o aminoácidos.
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