METODO PARA DETECCION DE BACTERIA DE LEGIONELA EMPLEANDO ANTICUERPOS ESPECIFICOS DE ANTIGENO PURIFICADOS.
Un método de ensayo de la presencia de una bacteria Legionela o su componente antigénico de carbohidrato en un fluido,
cuyo método comprende los siguientes pasos: (a) Cultivar células bacteriales de un cultivo de una especie conocida, un serogrupo de una especie, de bacteria Legionela en la forma de un gránulo de célula húmedo. (b) Suspender el gránulo de célula húmedo en un gramo por 20 ml en una solución alcalina acuosa, conteniendo dicha solución alcalina acuosa 0.1 M de hidróxido sódico acuoso, y mezclándolo durante 45 minutos, seguido de la adición de ácido fuerte para ajustar el pH al pH ácido y centrifugar. (c) Separar el sobrenadante del paso (b), ajustar su pH a la neutralidad y añadirle una preparación de enzima de proteasa de amplio espectro, (d) Digerir la enzima de proteasa de amplio espectro - mezcla sobrenandante neutralizada del paso (c) para destruir las proteínas residuales, (e) Añadir a la mezcla digerida del paso (d) de una solución acuosa ligeramente alcalina para ajustar el pH al lado alcalino, separando un antígeno de carbohidrato libre de proteína sobre una columna de exclusión de tamaño equilibrada con una solución ligeramente alcalina y reuniendo material eluído en el primer pico y ajustar su pH a la neutralidad, (f) Recuperar el antígeno carbohidrato libre de proteína de la solución acuosa neutral del paso (e) y enlazar este antígeno con una molécula espaciadora para forma un conjugado; (g) Enlazar el conjugado del paso (f) a una columna de afinidad cromatográfica, (h) Purificar anticuerpos sin tratar con la misma especie o serogrupo de una especie de bacteria de Legionela usada en el paso (a) pasándolos por la columna de afinidad cromatográfica del paso (g) habiéndose unido a la misma el conjugado de molécula separadora y antígeno de carbohidrato libre de proteína del paso (f), produciendo así anticuerpos específicos de antígeno purificados, y; (i) Usar los anticuerpos purificados del paso (h) para detectar la presencia de una pareja de enlace antigénica para estos anticuerpos en una muestra de test de fluido sospechosa de contenerlo.
Tipo: Resumen de patente/invención.
Solicitante: BINAX, INC.
Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.
Dirección: 217 READ STREET,PORTLAND, ME 04103.
Inventor/es: MOORE, NORMAN, JAMES, KOULCHIN, VLADIMIR, ANDREI, MOLOKOVA, ELENA, VALENTIN.
Fecha de Publicación: .
Fecha Concesión Europea: 3 de Enero de 2007.
Clasificación PCT:
- C07K1/22 QUIMICA; METALURGIA. › C07 QUIMICA ORGANICA. › C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02; proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › C07K 1/00 Procedimientos generales de preparación de péptidos. › Cromatografía de afinidad o técnicas análogas basadas en procesos de absorción selectiva.
- C07K16/12 C07K […] › C07K 16/00 Inmunoglobulinas, p. ej. anticuerpos mono o policlonales. › contra materiales bacterianos.
- C12P19/04 C […] › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12P PROCESOS DE FERMENTACION O PROCESOS QUE UTILIZAN ENZIMAS PARA LA SINTESIS DE UN COMPUESTO QUIMICO DADO O DE UNA COMPOSICION DADA, O PARA LA SEPARACION DE ISOMEROS OPTICOS A PARTIR DE UNA MEZCLA RACEMICA. › C12P 19/00 Preparación de compuestos que contienen radicales sacárido (ácido cetoaldónico C12P 7/58). › Polisacáridos, es decir, compuestos que contienen más de cinco radicales sacárido unidos entre ellos por enlaces glucosídicos.
- G01N30/06 FISICA. › G01 METROLOGIA; ENSAYOS. › G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 30/00 Investigación o análisis de materiales por separación en constituyentes utilizando la adsorción, la absorción o fenómenos similares o utilizando el intercambio iónico, p. ej. la cromatografía (G01N 3/00 - G01N 29/00 tienen prioridad). › Preparación.
- G01N30/88 G01N 30/00 […] › Sistemas integrados de análisis, especialmente adaptados a este efecto, no cubiertos por uno solo de los grupos G01N 30/04 - G01N 30/86.
- G01N33/531 G01N […] › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › Producción de materiales de investigación o de análisis inmunoquímicos.
- G01N33/543 G01N 33/00 […] › con un soporte insoluble para la inmovilización de compuestos inmunoquímicos.
- G01N33/569 G01N 33/00 […] › para microorganismos, p. ej. protozoarios, bacterias, virus.
Patentes similares o relacionadas:
Método de determinación de la presencia y/o cantidad de moléculas diana, del 22 de Julio de 2020, de Canopy Biosciences, LLC: Método para el análisis de células individuales en una muestra de sangre mediante la determinación de la presencia y/o cantidad de una o más moléculas […]
Kit de reactivos utilizado para detectar gastrina-17 y método de preparación y aplicación para el kit de reactivos, del 15 de Julio de 2020, de Shenzhen New Industries Biomedical Engineering Co., Ltd: Un kit para detectar gastrina-17, caracterizado porque comprende un componente A y un componente B, en donde el componente A es un primer […]
Un sustrato para inmovilizar sustancias funcionales y un método para preparar las mismas, del 15 de Julio de 2020, de Temasek Polytechnic: Un sustrato sólido que tiene compuestos dispuestos sobre el mismo, en donde se inmoviliza una molécula funcional sobre los compuestos, teniendo cada compuesto una cadena que […]
Análisis biológico autónomo de alta densidad, del 1 de Julio de 2020, de BioFire Diagnostics, LLC: Recipiente para realizar reacciones de amplificación en un sistema cerrado que comprende una porción flexible que tiene una serie de blísteres […]
Chip de análisis y aparato de análisis de muestras, del 1 de Julio de 2020, de Takano Co., Ltd: Un chip de análisis que comprende: un sustrato conformado sustancialmente en forma de disco; un puerto de inyección formado […]
Dispositivo para la detección de analitos, del 1 de Julio de 2020, de TECHLAB, INC.: Un dispositivo para detectar por lo menos una sustancia de interés en una muestra líquida, comprendiendo el dispositivo: (a) una unidad que […]
Estructuras para controlar la interacción de luz con dispositivos microfluídicos, del 3 de Junio de 2020, de Opko Diagnostics, LLC: Un sistema de ensayo múltiplex que comprende: un artículo que soporta ensayos en fase sólida, comprendiendo dicho artículo un sustrato plano rígido y comprendiendo […]
Uso de un estándar para la detección de agregados de proteínas de una enfermedad por plegamiento incorrecto de proteínas, del 27 de Mayo de 2020, de FORSCHUNGSZENTRUM JULICH GMBH: Uso de un estándar, que comprende una nanopartícula inorgánica con un tamaño de 2 a 200 nm, en cuya superficie ya sea mediante i) ácido carboxílico-espaciador-maleimida […]