EXPRESION DE RECEPTORES ACOPLADOS A UNA PROTEINA G EN LEVADURA.

SE PRESENTA UNA CELULA DE LEVADURA TRANSFORMADA QUE CONTIENE UNA PRIMERA SECUENCIA DE DNA HOMOLOGO QUE CODIFICA UN RECEPTOR ACOPLADO A LA PROTEINA G DE UN MAMIFERO Y UNA SEGUNDA SECUENCIA HETEROLOGA DE DNA QUE CODIFICA UNA SUBUNIDAD (ALFA) DE MAMIFERO.

LA PRIMERA Y LA SEGUNDA SECUENCIA HETEROLOGA DE DNA ES CAPAZ DE EXPRESARSE EN LA CELULA, PERO LA CELULA ES INCAPAZ DE EXPRESAR UNA SUBUNIDAD (ALFA) DE LA PROTEINA G ENDOGENA (G(ALFA) DE LA LEVADURA). LAS CELULAS SON UTILES PARA FILTRAR COMPUESTOS QUE SEAN ACEPTADOS POR LA PROPORCION DE DISOCIACION DE G(ALFA) A PARTIR DE G(BETA)GAMMA EN UNA CELULA. TAMBIEN SE PRESENTA UN NUEVO VECTOR DE EXPRESION DE DNA UTIL PARA OBTENER CELULAS COMO LAS DESCRITAS ANTERIORMENTE. EL VECTOR CONTIENE UN PRIMER SEGMENTO QUE CONTIENE AL MENOS UN FRAGMENTO DE FRECUENCIA QUE CODIFICA EL AMINO TERMINAL DEL EXTREMO DEL RECEPTOR ACOPLADO DE LA PROTEINA G DE LA LEVADURA. UN SEGUNDO SEGMENTO SE SITUA DEBAJO DEL PRIMER SEGMENTO (Y EN UNA ESTRUCTURA DE LECTURA COMPUESTA CON EL MISMO), COMPRENDIENDO EL SEGUNDO SEGMENTO UNA SECUENCIA DE DNA QUE CODIFICA UN RECEPTOR APROPIADO A LA PROTEINA G HETEROLOGA.

Tipo: Resumen de patente/invención.

Solicitante: DUKE UNIVERSITY.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: ERWIN ROAD,DURHAM NORTH CAROLINA 27706.

Inventor/es: CARON, MARC, G., KING, KLIM, DOHLMAN, HENRIK, G., LEFKOWITZ, ROBERT, J.

Fecha de Publicación: 16 de Agosto de 2001.

Fecha Solicitud PCT: 12 de Septiembre de 1991.

Fecha Concesión Europea: 28 de Febrero de 2001.

Clasificación Internacional de Patentes:

C07K14/00 QUIMICA; METALURGIA. › C07 QUIMICA ORGANICA. › C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02; proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › Péptidos con más de 20 aminoácidos; Gastrinas; Somatostatinas; Melanotropinas; Sus derivados.
C12N15/12 C […] › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Genes que codifican proteínas animales.
C12N15/62 C12N 15/00 […] › Secuencias de ADN que codifican proteínas de fusión.
C12Q1/00 C12 […] › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones.
G01N33/48 FISICA. › G01 METROLOGIA; ENSAYOS. › G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › Material biológico, p. ej. sangre, orina (G01N 33/02, G01N 33/26, G01N 33/44, G01N 33/46 tienen prioridad ); Hemocitómetros (cómputo de glóbulos repartidos sobre una superficie por barrido óptico de la superficie G06M 11/02).
G01N33/566 G01N 33/00 […] › utilizando un soporte específico o proteínas receptoras como reactivos para la formación de uniones por ligando.

Países PCT: Austria, Bélgica, Suiza, Alemania, Dinamarca, España, Francia, Reino Unido, Grecia, Italia, Liechtensein, Luxemburgo, Países Bajos, Suecia, Oficina Europea de Patentes, Australia, Canadá, Japón.

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