SISTEMA DE EXPRESION DE PROTEINA LCK.

UN SISTEMA DE EXPRESION PARA PRODUCIR Y ASILAR GRANDES CANTIDADES DE PROTEINA.

ESTE SISTEMA EMPLEA UN VECTOR DE EXPRESION, QUE COMPRENDE (A) UNA REGION DE CODIFICACION PARA UN POLIPEPTIDO DE ENLACE DE GLUTATIONA (TRANSFERASA-S-GLUTATIONA PREFERIDA) OPERATIVAMENTE CONECTADO A UN PROMOTOR, (B) UNA SEGUNDA REGION DE CODIFICACION EN UN MARCO CON LA PRIMERA REGION DE CODIFICACION Y (C) AL MENOS UN LUGAR DE RESTRICCION ENTRE LA PRIMERA Y LA SEGUNDA REGION DE CODIFICACION DONDE UNA PROTEINA DE FUSION DE LA PRIMERA Y SEGUNDA REGION DE CODIFICACION RESULTA DE LA EXPRESION DEL VECTOR. ESTE VECTOR SE USA EN UNA CELULA HUESPED, QUE A SU VEZ DE USA EN UN PROCESO PARA AISLAR Y PURIFICAR UNA PROTEINA. ESTE PROCESO CONSISTE (A) EN TRATAR LA CELULA HUESPED BAJO CONDICIONES QUE PERMITEN LA EXPRESION DEL VECTOR, CON LO QUE SE EXPRESA UNA PROTEINA DE FUSION DE LA PRIMERA Y SEGUNDA REGION DE CODIFICACION; (B) EXPONER PROTEINAS DE LA CELULA HUESPED A RESINA DE GLUTATIONA, CON LO QUE LA PROTEINA DE FUSION SE ADHERIRA A LA RESINA; Y (C) EXFOLIAR EL PRODUCTO DE EXPRESION DE LA SEGUNDA REGION DE CODIFICACION DE RESINA. TAMBIEN SE DESCRIBE UN PROCESO PARA EXPRESAR UNA SECUENCIA DE ACIDO NUCLEICO, QUE COMPRENDE (A) LA INSERCION DEL ACIDO NUCLEICO DENTRO DE UN VECTOR DE EXPRESION DE BACILOVIRUS EN MARCO CON LA PRIMERA REGION DE CODIFICACION; B) COLOCACION DEL VECTOR DENTRO DE UNA CELULA HUESPED; C) TRATAMIENTO DE LA CELULA HUESPED BAJO CONDICIONES QUE PERMITE LA EXPRESION DEL VECTOR, DANDO COMO RESULTADO UNA EXPRESION DE UNA PROTEINA DE FUSION DE LA PRIMERA REGION DE CODIFICACION Y LA SECUENCIA INSERTADA EN EL PASO (A); (D) EXPOSICION DE PROTEINA DE LA CELULA HUESPED A LA RESINA DE GLUTATIONA, DONDE LA PROTEINA DE FUSION SE ADHERIRA A LA RESINA, E) TRATAMIENTO DE LA PROTEINA DE FUSION ADHERIDA CON UNA PROTEASA PARA LIBERAR EL PRODUCTO DE EXPRESION DE LA SECUENCIA DE ACIDO NUCLEICO DE LA RESINA. SE PREFIERE UN SISTEMA DE EXPRESION DE BACILOVIRUS SPODOPTERA FRUGIPERDA.

Tipo: Resumen de patente/invención.

Solicitante: BRISTOL-MYERS SQUIBB COMPANY.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: P.O. BOX 4000,PRINCETON, NJ 08543-4000.

Inventor/es: FARGNOLI, JOSEPH, SPANA, CARL, BOLEN, JOSEPH B.

Fecha de Publicación: 1 de Agosto de 2000.

Fecha Concesión Europea: 15 de Marzo de 2000.

Clasificación Internacional de Patentes:

C07K14/705 QUIMICA; METALURGIA. › C07 QUIMICA ORGANICA. › C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02; proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › C07K 14/00 Péptidos con más de 20 aminoácidos; Gastrinas; Somatostatinas; Melanotropinas; Sus derivados. › Receptores; Antígenos celulares de superficie; Determinantes celulares de superficie.
C12N15/62 C […] › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Secuencias de ADN que codifican proteínas de fusión.
C12N15/86 C12N 15/00 […] › Vectores virales.
C12N9/12 C12N […] › C12N 9/00 Enzimas, p. ej. ligasas (6.); Proenzimas; Composiciones que las contienen (preparaciones para la limpieza de los dientes que contienen enzimas A61K 8/66, A61Q 11/00; preparaciones de uso médico que contienen enzimas A61K 38/43; composiciones detergentes que contienen enzimas C11D ); Procesos para preparar, activar, inhibir, separar o purificar enzimas. › transfieren grupos que contienen fósforo, p. ej. Quinasas (2.7).

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